QExactive一小时DDA鉴定DIA定量Hela 蛋白

本文由 赛默飞色谱及质谱 整理汇编

2018-08-10 10:58 318阅读次数

收藏 评价 举报

• 分享

立即下载

参与评论

评论

登录后参与评论

登录或新用户注册

• 微信登录
• 密码登录
• 短信登录

请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号

微信扫码，手机电脑联动

注册登录即表示同意《仪器网服务条款》和《隐私协议》

账  号：

密  码：

图片码： 看不清？
换一张？

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

手机号：

图片码： 看不清？
换一张？

短信码： 获取短信码

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

更多资料

• QExactive一小时DDA鉴定DIA定量Hela 蛋白

  数据非依赖性的扫描模式（data-independentacquisition,DIA）是近几年来发展的一种新的质谱数据采集方式[1]。它的理念是用二级碎片离子进行蛋白相对/定量。DIA扫描模式中，超高分辨质谱对特定质量范围内的所有母离子进行碎裂，采集所有母离子的碎片离子，并快速地依次扫描相邻的母离子宽口内的所有碎片离子。DIA的数据中包含了所有碎片离子的保留时间和强度信息。用非常小的质量偏差宽口（如10ppm）目标性地抽提同一肽段的多个子离子，计算子离子的强度，就能对该肽段进行鉴定和定量。DIA定量相比传统的基于母离子强度的DDA定量有选择性好，定量准确等优点[1]，所以DIA成为定量蛋白组学新的发展方向。QExactiveHF是赛默飞世尔科技在2014年的ASMS上推出的全新静电场轨道阱超高分辨质谱仪（图1）[2,3]。QExactiveHF采用了分段式四极杆技术（AdvancedQuadrupoleTechnology，AQT）使离子传输效率至少提高了2倍；超高场Orbitrap技术，提高了Orbitrap扫描速度，在15000分辨率时，二级谱图的扫描速度是20Hz。这两项技术提高了QEHF进行DDA、DIA数据的采集能力。本文用1小时快速色谱梯度对QEHF的DDA鉴定能力和DIA定量能力进行考察，同时从定量肽段数目和CV两方面对DDA定量和DIA定量能力进行比较。使用仪器：QExactiveHF[详细]

  2018-08-10 10:58

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 超高分辨质谱一小时DIA 定量4000 个Hela 蛋白

  超高分辨质谱一小时DIA 定量4000 个Hela 蛋白[详细]

  2015-12-29 00:00

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• FH0314-人宫颈癌细胞；Hela

  FH0314-人宫颈癌细胞；Hela[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 赛默飞QExactive不同高分辨定量方式在药物分析中的应用

  质谱技术因其出色的灵敏度和专属性已经被广泛的应用于药物分析，传统质谱定量采用单位分辨选择离子检测SIM或选择反应监测SRM的定量方式，高分辨质谱具有获得化合物离子极ng确质量数和分离相邻质量峰的能力，被越来越多的应用于定量分析中。基于Orbitrap静电场轨道阱技术的QExactiveFocus将高性能四极杆与高分辨Orbitrap技术相结合，具有高达70,000FWHM的分辨率和长期稳定的高质量精度，可获得高质量的一级和二级高分辨质谱数据，保证了定性和定量结果的可靠性；媲美高端三重四极杆的灵敏度和宽线性范围可轻松定量药物中的微量组分。QExactiveFocus提供不同的高分辨定量模式，满足不同的定量需要：如有需要请下载，谢谢。[详细]

  2018-08-10 10:58

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 安捷伦用于药物代谢物鉴定及定量的强大解决方案

  安捷伦用于药物代谢物鉴定及定量的强大解决方案[详细]

  2024-09-27 23:50

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定

  幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定[详细]

  2013-04-22 00:00

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定

  幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定[详细]

  2012-07-18 00:00

  标准

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人P21蛋白（P21）定量检测试剂盒（ELISA）

  上海金穗生物科技有限公司专业销售各种生化试剂、标准品、透析袋。本公司所有产品主要用于科研方面，不用于临床诊断。欢迎来电洽询！全国免费客服热线：400-021-1237本公司多年专业酶免服务，质量保证，价格低，超过5万家科研单位、10万家工厂的合作经验，让我们的elisa试剂盒、生化试剂更具有竞争力。期待您的来电合作！[详细]

  2018-10-08 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 赛默飞数据非依赖采集DIA解决方案

  赛默飞数据非依赖采集DIA解决方案[详细]

  2015-06-11 00:00

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 抗血清鉴定

  抗血清的质量直接影响分析方法的特异性和灵敏度。用于鉴定抗血清质量的参数主要有几项：1．亲和性（affinity）是指抗体分子上一个抗原结合部位与相应的抗原决定簇之间的结合强度，常用亲和常数Ka表示。Ka是正／逆向反应速度常数的比值，单位为稀释度单位（L／mol或LM-1），表示需将lmol抗体稀释至多少升，才能使抗原抗体结合下降50％；而Ka的倒数为解离常数（Kd），其单位为浓度单位（mol／L）。为提高放射免疫分析的灵敏度、精密度和准确度，需选用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清。2．特异性（specificity）是指一种抗体识别相应抗原决定簇的能力。由于一种抗原常有结构极相似的类似物（同类物、前体、降解物和代谢物），其抗血清可能对该抗原的类似物产生交叉反应。因此，抗体的特异性通常以交叉反应率表示：将反应的Zda结合率YZ下降50％时特异性抗原与类似物的剂量（）之比来计算交叉反应率。如胰岛素标准品使125I胰岛素与抗血清的Zda结合下降50％的用量为0．5ng，而类似的物（前体）胰岛素原的用量为500ng，则相应的交叉反应率（％）为：0．5／500＝0．1％。抗体交叉反应程度的高低直接影响测定结果的准确性，但应注意，抗血清特异性与分析方法特异性并不完全相同，因后者对某一待测抗原的特异性程度不仅取决于所用抗体，尚有赖于标记物的质量和方法学设计。3．效价（titer）是反映抗血清中有效抗体含量的相对参数，即抗血清稀释至能与抗原发生有效反应的Zda稀释度。通常是将一株抗血清作系列稀释后与标记抗原反应，计算不同稀释度时抗体结合标记抗原的百分率，绘制出抗体稀释度曲线。结合具体方法设计要求。效价一般指结合50％标记抗原时，抗血清的稀释度。[详细]

  2018-09-27 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 有机溶剂鉴定

  有机溶剂鉴定[详细]

  2024-09-25 21:17

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 超氧化物歧化酶对抗肿瘤药物促宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

  超氧化物歧化酶对抗肿瘤药物促宫颈癌Hela细胞凋亡的影响[详细]

  2013-07-12 00:00

  报价单

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 组织沉默调节蛋白1活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织沉默调节蛋白1（SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定组织裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（classI）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（classII）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。种类III（classIII）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。用户自备磷酸盐缓冲溶液（PBS）：用于清洗组织样品15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器（微型）台式离心机：用于组织细胞预处理培养箱：用于反应物孵育96孔板或100微升1厘米光径比色皿：用于反应和比色的容器酶标仪或分光光度仪：用于比色分析注意事项1．本产品为20次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需1次4．样品须澄清，至关重要5．样品处理时，避免使用蛋白酶YZ剂、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反应完成后即刻进行比色测定7．滤波器可以使用波长400nm替代405nm8．测定值由低到高变化；酶动法测定可以持续60分钟9．测定值吸光读数越高，表明酶活性越高10．比色测定后，比色皿须清洗彻底11．待测样本为核蛋白样品，其蛋白浓度为50微克/20微升；待测样本为组织裂解悬液，其蛋白浓度为200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）12．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度13．沉默调节蛋白1单位活性定义为：在30℃，pH8.0条件下，每分钟内能够释放1微摩尔对硝基苯酚所需的酶量作为一个活性单位14．本公司提供系列组蛋白脱乙酰基酶检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测

  主要用途细胞沉默调节蛋白1（SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（classI）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（classII）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。种类III（classIII）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 兔骨成型蛋白7（BMP-7）elisa定量试剂盒说明书

  兔骨成型蛋白7（BMP-7）elisa定量试剂盒说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中兔骨成型蛋白7（BMP-7）的含量。l有效期：6个月l保存条件：2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被兔骨成型蛋白7（BMP-7）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔骨成型蛋白7（BMP-7）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样本处理及要求1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响Z后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7.建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围：2.5pg/mL80pg/mL。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于0.1pg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。[详细]

  2024-09-28 21:57

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 蛋白（肽段）定量的原理及安捷伦的解决方案

  本文详细的介绍了蛋白（肽段）定量的意义及出现 MRM 质谱技术平台的缘由、MRM 肽段定量的基本原理、安捷伦 MRM 肽段定量的完整定义以及安捷伦 LC/QQQ 肽段定量应用实例等。[详细]

  2024-09-28 00:35

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人钙联蛋白（calnexin）定量检测试剂盒（ELISA）说明书

  本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。人钙联蛋白（calnexin）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】人钙联蛋白（calnexin）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中钙联蛋白（calnexin）的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被人钙联蛋白（calnexin）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人钙联蛋白（calnexin）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人钙联蛋白（calnexin）含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：640、320、160、80、40、20ng/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先2加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。9、显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，平板混匀器混匀30s（或用手轻轻震荡混匀30s），37℃避光显色15min。10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为20-640ng/L，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（20-640ng/L范围内），乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。3【操作程序总结】准备试剂，样品和标准品加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】20ng/L-640ng/L【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃，避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]

  2024-09-29 13:23

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 赛默飞提供数据非依赖采集DIA 解决方案

  随着生命科学的快速发展，蛋白质组学的关注焦点和研究趋势已经逐渐从定性转向定量。定量蛋白质组学是对细胞、组织乃至完整生物体的蛋白质表达量及差异进行分析，对于生物过程机理的探索和临床诊断标志物的发现与验证具有重要意义。基于静电场轨道阱Orbitrap的数据非依赖采集（DataIndependentAcquisition,DIA）是赛默飞为用户带来的一项全新的、全息式的质谱技术。DIA将质谱整个全扫描范围分为若干个窗口，高速、循环地对每个窗口中的所有离子进行选择、碎裂、检测，从而无遗漏、无差异地获得样本中所有离子的全部碎片信息（图1）。[详细]

  2018-08-10 10:58

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 重组结核分枝杆菌Mr 38 000蛋白的表达纯化和鉴定

  重组结核分枝杆菌Mr 38 000蛋白的表达纯化和鉴定[详细]

  2013-11-02 00:00

  选购指南

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测

  要用途细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂存在下，受到PP1去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品包括免疫沉淀复合物和粗提或部分纯化酶样品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又称为1型蛋白丝/苏氨酸磷酸化酶，是7个主要丝/苏氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成员之一，从酵母到人类高度进化保留。其参与调节多种重要的细胞生理功能，包括糖原代谢、细胞分裂、肌肉收缩、信号传导、神经元功能、转录、翻译等，以及与HIV-1转录过程的调节，并且与老年性痴呆等多种疾病密切相关。PP1分子结构表面的3个凹槽及β12-β13Loop环结构，是底物与YZ剂的结合部位；其催化亚体为37kd，调节亚体有2种：目标亚体和YZ亚体。基于特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情况下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，释放出游离磷酸根，与孔雀绿（malachitegreen）染料发生显色反应后，在分光光度仪下（660nm波长）产生峰值的变化，由此测定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特异活性。[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  •