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细胞凋亡检测
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细胞凋亡检测
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细胞凋亡检测
- 细胞凋亡检测[详细]
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2024-09-13 04:53
应用文章
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细胞凋亡检测试剂盒POD法
- 六折特价细胞凋亡检测试剂盒POD法产品简介:产品编号品名/Packsize的11684817910在原位细胞凋亡检测试剂盒,过氧化物酶1包(高达50测试)优点敏感:细胞凋亡(细胞染色)标签的Zda强度高于缺口翻译方法快速:使用荧光的dUTP允许后直接TUNEL反应,但在此之前的二次检测系统除了对样品的分析方便:直接标记程序,使用荧光素-dUTP标记允许在检测过程中的TUNEL反应效率的核查准确:在分子水平(DNA链断裂)和细胞凋亡的早期阶段的细胞识别凋亡鉴定灵活:无基板;提供了选择的机会,选择染色过程六折特价细胞凋亡检测试剂盒POD法6380元六折特价【021-54100800】InSituCellDeathPOD细胞凋亡检测试剂盒POD法上海索宝特价【021-54100800】产品明细:一、原理:TUNEL(TdT-mediateddUTPnickendlabe领)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdTEnzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化酶(HRP,horse-radishperoxidase)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP底物二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3‘-OH形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿瘤药的药效评价,以及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。二、器材与试剂器材:光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒(塑料饭盒与纱布)、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等;试剂:试剂盒含TdT10×、荧光素标记的dUTP1×、标记荧光素抗体的HRP;自备试剂:PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇(100、95、90、80、70%)、DAB工作液(临用前配制,5μl20×DAB+1μL30%H2O2+94μlPBS)、ProteinaseK工作液(10-20μg/mlin10mMTris/HCl,pH7.4-8)或细胞通透液(0.1%TritonX-100in0.1%sodiumcitrate,临用前配制)、苏木素或甲基绿、DNase1(3000U/ml3U/mlin50mMTris-HCl,pH7.5,10mMMgCl2,1mg/mlBSA)等。三、实验步骤操作流程图:制作石蜡切片→脱蜡、水合→细胞通透→加TUNEL反应液→加converter-POD→与底物DAB反应显色→光学显微镜计数并拍照。具体操作步骤(石蜡包埋切片的检测):1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;注:上面两步是针对石蜡切片样本的处理4.用ProteinaseK工作液处理组织15-30min在2137°C(温度、时间、浓度均需摸索)或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6.制备TUNEL反应混合液,处理组用50μlTdT+450μl荧光素标记的dUTP液混匀;而阴性对照组仅加50μl荧光素标记的dUTP液,阳性对照组先加入100μlDNase1,反应在15~25℃×10min,后面步骤同处理组。7.玻片干后,加50μlTUNEL反应混合液(阴性对照组仅加50μl荧光素标记的dUTP液)于标本上,加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37℃×1h。8.PBS漂洗3次;9.可以加1滴PBS在荧光显微镜下计数凋亡细胞(激发光波长为450~500nm,检测波长为515~565nm);10.玻片干后加50μlconverter-POD于标本上,加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37℃×30min。11.PBS漂洗3次;12.在组织处加50~100μlDAB底物,反应15~25℃×10min;13.PBS漂洗3次;14.拍照后再用苏木素或甲基绿复染,几秒后立即用自来水冲洗。梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片。15.加一滴PBS或甘油在视野下,用光学显微镜观察凋亡细胞(共计200~500个细胞)并拍照。可结合凋亡细胞形态特征来综合判断(未染色细胞变小,胞膜完整但出现发泡现象,晚期出现凋亡小体,贴壁细胞出现邹缩、变圆、脱落;而染色细胞呈现染色质浓缩、边缘化,核膜裂解,染色质分割成块状/凋亡小体)对于.培养细胞的预处理:①在载玻片上铺一层薄薄的多聚赖氨酸(见备注4),干燥后在去离子水中漂洗,干燥后4℃保存;②适当方法诱导细胞凋亡,同时设未经诱导的对照组,各组离心收集约1×106个细胞,PBS洗一次,重悬,加到铺好的多聚赖氨酸载玻片上,自然干燥,使细胞很好的吸附到载玻片上;③将吸附细胞的载玻片在4%多聚甲醛(见备注2)中固定25min;④PBS浸洗二次,每次5min;⑤将吸附细胞的载玻片在0.2%的TritonX-100(见备注5)中处理5min;⑥PBS浸洗二次,每次5min;后续操作如同石蜡包埋切片的615四、注意事项1.进行PBS清洗时,每次清洗5min。2.PBS清洗后,为了各种反应的有效进行,请尽量除去PBS溶液后再进行下一步反应。3.在载玻片上的样本上加上实验用反应液后,请盖上盖玻片或保鲜膜,或在湿盒中进行,这样可以使反应液均匀分布于样本整体,又可以防止反应液干燥造成实验失败。4.TUNEL反应液临用前配制,短时间在冰上保存。不宜长期保存,长期保存会导酶活性的失活。5.如果20×DAB溶液颜色变深成为紫色,则不可使用,需重新配制。6.用甲基绿(MethylGreen)染液(3-5%甲基绿溶于0.1M醋酸PH4.0)染色后,请用灭菌蒸馏水清洗多余的甲基绿。然后进行洗净(1**%乙醇)、脱水(二甲苯)透明、封片后通过光学显微镜观察操作。如果此时使用80~90%的乙醇洗净时,甲基绿比较容易脱色,注意快速进行脱水操作。7.荧光素标记的dUTP液含甲次酸盐和二氯钴等致癌物,可通过吸入、口服等途径进入机体,注意防护。8.试剂保存;未打开的试剂盒贮存在-20℃(-15~25℃);converter-POD液一旦解冻,以后就保存在4℃(2~8℃)下,至少在6m内稳定,避免再次冻存;TUNEL反应液临用前配好后,放至冰上直至使用。9.结果分析时注意:在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA断,从而引起假阳性结果;而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全,以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应,进而产生假阴性结果。六折特价细胞凋亡检测试剂盒POD法上海索宝特价【021-54100800】InSituCellDeathPOD细胞凋亡检测试剂盒POD法上海索宝特价【021-54100800】ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体,并能提供技术支持的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为ZX,以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司组织结构清晰,内部管理科学,拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍,保持了各个部门之间的GX合作运转,充分保障了公司在充满竞争的市场中处于领xian地位。公司注重与业界精英合作,目前公司已经和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、等企业结成紧密的合作伙伴关系,代理其领xian世界的产品,并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些都保证了我们向您提供的是Z专业Zyou质的服务!立足北京,上海,辐射全国,随着产品营销战略的不断延伸,我们将逐步发展成为yi流的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起,利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神,为ZG生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展,现公司正在诚招各地dai理商和招聘若干销售、研发人员,欢迎垂询并期待您的加入!六折特价细胞凋亡检测试剂盒POD法上海索宝特价【021-54100800】联系方式上海索莱宝生物科技有限公司电话:021-6485566518018609966传真:021-54261506邮编:200233地址:上海市钦江路15号14层邮箱:solarbio@126.com网址:www.shsolarbio.com优质试剂质量放心价格Zdi为ZG生物产业做贡献六折特价细胞凋亡检测试剂盒POD法上海索宝特价【021-54100800】手机18018609966[详细]
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2018-09-02 10:00
产品样册
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细胞凋亡检测-形态学特征的检测方法
- 一、普通光学显微镜观察方法1)苏木素-伊红染色(HE染色法)石蜡组织切片的HE染色1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。3.苏木素染色5min,自来水冲洗。4.盐酸乙醇分化30s(提插数下)。5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。6.置伊红液2min。7.常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性树脂封固。2)甲基绿-派诺宁染色法1.新鲜取材组织固定液中4℃固定3~6小时。2.直接转入95%乙醇脱水和无水乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。3.切片经二甲苯脱蜡,梯度乙醇水化至蒸馏水。4.置染色液中室温下染片约1h。5.取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。6.插入丙酮中迅速分化。7.转入丙酮二甲苯(1:1)稍洗。8.二甲苯透明2~3次。9.中性树胶封固。3)Giemsa染色1.收集细胞(1×106),PBS洗1次。2.用细胞涂片离心机制成细胞涂片。3.甲醇固定3~5min。4.入Giemsa稀释染色液15~30min,冬天在37℃温箱中染色。5.用磷酸盐缓冲液分色,以镜下控制为准。6.涂片晾干后用中性树胶封片。4)瑞氏(Wright)染色1.收集细胞(1×106),PBS洗1次。2.用细胞涂片离心机制成细胞涂片。3.甲醇固定3~5min。4.用Wright液染色2min。5.入Wright磷酸缓冲液稀释液4~10min,然后用蒸馏水冲洗。此时如果颜色较深,可0.08%醋酸分化数秒钟6.直立晾干后,用中性树胶封固。二、透射电子显微镜观察方法1)透射电镜样本的取材和固定培养细胞的取材和固定1.常规收集帖壁和悬浮细胞,置离心管中离心,800~1000r/min,10min。2.用0.01mol/LPBS5ml重悬细胞。3.将细胞悬液吸入有琼脂空槽的离心管中。4.离心,2000r/min,15~20min,使细胞成团。5.小心吸去上清,加入2.5%戊二醛固定液固定细胞团,以免细胞团散开。6.取出离心管内的琼脂,仔细切下尖槽内含有细胞团的琼脂块。7.将含细胞的团琼脂块投入含戊二醛固定液的小瓶中,4℃(可长期)保存。8.用0.1mol/LPBS缓冲液洗1次。9.1%锇酸后固定30~60min。三、荧光显微镜观察方法1)吖啶橙染色法1.制备活细胞悬液,浓度约为107/ml。2.取95μl的细胞悬液,加5μl的吖啶橙贮存液混匀。3.吸一滴混合液点洁净玻片上,直接用盖玻片封片。4.荧光显微镜选用激发滤片BG12或BV等,阻断滤片用515nm或SP3。2)Hoechst33258染色法1.原代细胞培养,细胞学涂片或细胞甩片机制备的单细胞片。2.细胞固定液4℃固定5min。3.蒸馏水稍洗后,点加Hoechst33258染色液,10min。4.蒸馏水洗片后,用滤纸沾去多余液体。5.封片剂封片后荧光显微镜观察。3)Hoechst33342染色法1.将Hoechst33342加入培养的细胞中,终浓度为10μg/ml37℃孵育30min。2.4%的多聚甲醛和培养液以1:3混合,使多聚甲醛的浓度为1%,固定细胞5~10min。3.固定好后,将细胞悬液涂在载玻片加盖玻片。4.荧光显微镜激发滤片选用UV激发滤片,阻断滤片为400~500nm。以上是先将细胞染色后再行固定观察的方法,也可先固定后染色:1.收集(0.5~3.0)×106个细胞,500~1000r/min,离心5min去上清。2.PBS洗1次,500~1000r/min,离心5min去PBS。3.用3%多聚甲醛50μl重悬细胞,室温下固定10min。4.PBS洗1次,500~1000r/min离心5min去PBS。5.用15μl的Hoechst33258或33342重悬细胞,终浓度为16μg/ml,孵育15min。6.取10μl放在玻片上,荧光显微镜下观察,可数500个细胞,计算调亡率。[详细]
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2018-09-28 10:00
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ANNEXIN V-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒
- ANNEXINV-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途ANNEXINV-FITC标记法细胞凋亡检测试剂是一种旨在使用异硫氰酸荧光素标记的膜粘连蛋白-5(AnnexinV),探寻细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻移位,来分析特征性早期细胞凋亡状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞(动物、人体、植物等)的细胞凋亡测定。广泛用于细胞凋亡的研究。产品严格无菌,即到即用,反应敏感,操作简捷,性能稳定。技术背景细胞凋亡,或细胞程序性死亡,在诸如形态发育、免疫系统调节、以及肿瘤和神经退行性疾病等各种生物学过程中,起着实质性的作用。凋亡细胞具有形态、生化、和分子方面的显著特征。抗凝血蛋白膜粘连蛋白-5(AnnexinV)是35至36kd的钙离子依赖性磷脂结合蛋白,主要与磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine;PS)可逆性结合,每个分子AnnexinV结合50个单体磷脂酰丝氨酸。在正常生理状态下,磷脂酰丝氨酸,是四种主要细胞膜磷脂成分之一,和磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine;PE)一起分布在细胞质膜的内侧,即面向胞浆的一面。一旦细胞凋亡启动,细胞膜失去了磷脂双层的非对称性分布和完整性,导致磷脂酰丝氨酸移位到细胞膜外侧,成为巨噬细胞的识别目标,由此细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸可以通过异硫氰酸荧光素(FITC)标记的AnnexinV进行探测。伴随碘化丙啶(Propidiumiodide;PI)的染色以区别晚期细胞凋亡。碘化丙啶为膜非通透性染料,受到活细胞排外,如果细胞处于晚期凋亡或死亡,则呈现红色荧光的细胞核。借助细胞流式仪,可以清晰探测细胞凋亡的程度。流式细胞术(FLOWCYTOMETRY)是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。[详细]
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2018-11-08 10:00
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人细胞凋亡YZ因子(IAP)检测试剂盒
- 人细胞凋亡YZ因子(IAP)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 17:58
选购指南
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细胞凋亡的分子机理
- 细胞凋亡的分子机理[详细]
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2015-10-29 00:00
安装说明
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细胞凋亡YZ因子抗体
- 细胞凋亡YZ因子抗体广锐生物坚守品质、锐意进取,满足于每一位老师的实验要求,厂家供货,品质保证,价格优惠,欢迎来电咨询!1.包装:0.1ml/0.2ml2.浓度:一般是200微克每100微升3.库存均有现货。4.产品订购以订货当日Zxin价格为准。5.所有产品为确保质量,出库均复检。细胞凋亡YZ因子抗体Anti-phospho-P70S6KinasebetaAnti-GRM1小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒人α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒脑红蛋白/神经血红蛋白抗体人透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒Anti-NKG2A/CD159a/KLRC1人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒细胞凋亡YZ因子抗体不同类型抗体的保存指南,用以避免抗体污染或损伤请不时核查数据表以获取特定保存建议。如果恰当保存和处理,大多数抗体应能保持活性数月乃至数年。对于很多抗体而言,分装成小等份并冻存于-20℃或-80℃是佳保存条件。分装成小等份可Z*程度减少由冻融造成的损伤,以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需冻融一次,如有剩余,可将剩余物保存于4℃。在收到抗体时,在10,000×g下离心20秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液,并以小等份转移至低蛋白结合微量离心管中。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10μl;等份越小,储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。[详细]
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2018-10-23 10:30
产品样册
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利用自动细胞成像系统分析细胞凋亡
- 细胞凋亡是一种发生在多细胞生物体内的程序性细胞死亡过程!生化反应导致细胞形态和特征变化及细胞死亡。形态变化包括细胞收缩、核分裂、染色质凝缩、染色 DNA 分裂及 mRNA 衰减。[详细]
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2024-09-11 18:18
应用文章
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V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒产品说明
- AnnexinV-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒产品简介: 细胞凋亡普遍存在于生物界,是细胞的基本特征之一,对胚胎发育及形态发生、组织修复、内环境的稳定、机体的防御和免疫反应等方面都起到十分重要的作用。 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(AnnexinV-FITC/PIApoptosisDetectionKit)是用FITC融合的重组人AnnexinV来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸(PS)的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。AnnexinV是一种分子量为35.8kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,广泛分布于真核细胞胞浆内,参与细胞信号转导。AnnexinV能与磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)高亲和力、特异地结合。在正常细胞中,PS主要分布在细胞膜内侧,在细胞发生凋亡的早期,细胞膜上的PS会外翻到细胞表面。用带有绿色荧光的AnnexinV-FITC标识出凋亡细胞。 本试剂盒还提供了碘化丙啶(PropidiumIodide,PI),PI可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。保存条件: 4℃保存,AnnexinV-FITC、PI染色液需避光保存,半年有效。若长期保存,可以把PI染色液适当分装后-20℃保存,AnnexinV-FITC结合液可以直接-20℃保存。包装规格:货号规格包装规格AnnexinV-FITC1×BindingBufferPIA005-15assays25ul2ml50ulA005-220assays100ul8ml200ulA005-350assays250ul20ml500ulA005-4100assays500ul40ml1mlA005-X100次以上[详细]
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2018-09-18 10:00
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用99Tcm-rh-Anexin V检测放疗或化疗后肿瘤细胞凋亡
- 用99Tcm-rh-Anexin V检测放疗或化疗后肿瘤细胞凋亡[详细]
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2024-09-30 14:04
产品样册
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鱼细胞凋亡因子(Fas)酶联免疫分析
- 鱼细胞凋亡因子(Fas)酶联免疫分析检测范围:96T0.8IU/L-24IU/L使用目的:本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中细胞凋亡因子(Fas)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼细胞凋亡因子(Fas)亡因子(Fas)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞凋亡因子(Fas),再与HRP标记的细胞凋亡因子(Fas)抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经。用纯化的鱼细胞凋过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞凋亡因子(Fas)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼细胞凋亡因子(Fas)浓度。试剂盒组成130倍浓20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶标试剂标准品(48IU/L)标准品稀释液3酶标包被板4样品稀释液5显色剂A液6显色剂B液10说明书11封板膜12密封袋2张1个标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过(HRP)活性。鱼细胞凋亡因子(Fas)酶联免疫分析操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24IU/L12IU/L6IU/L5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液3IU/L1.5IU/L2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用配液:将30倍浓洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静重复5次,拍干。30秒后弃去,如此加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。鱼细胞凋亡因子(Fas)酶联免疫分析注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。鱼细胞凋亡因子(Fas)酶联免疫分析保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
产品样册
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人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒
- 人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒[详细]
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2014-08-21 00:00
其它
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小鼠细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒
- 小鼠细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠BCL-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的BCL-2与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠BCL-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,BCL-2浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中BCL-2浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清测定前用标本稀释液至少作1:5稀释(取40ul,加标本稀释液160ul,稀释5倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应BCL-2含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的BCL-2检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠BCL-2。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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大鼠细胞凋亡相关基因试剂盒使用说明书
- 大鼠细胞凋亡相关基因(Bcl-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中细胞凋亡相关基因(Bcl-2)含量。实验原理大鼠细胞凋亡相关基因试剂盒使用说明书应用双抗体夹心法测定标本中大鼠细胞凋亡相关基因(Bcl-2)水平。用纯化的大鼠细胞凋亡相关基因(Bcl-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞凋亡相关基因(Bcl-2),再与HRP标记的细胞凋亡相关基因(Bcl-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞凋亡相关基因(Bcl-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠细胞凋亡相关基因(Bcl-2)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(400μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。200μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液100μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液50μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液25μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液12.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算大鼠细胞凋亡相关基因试剂盒使用说明书以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
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人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒
- 人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-14 22:39
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人细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒说明书
- 人细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人BCL-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的BCL-2与单抗结合,加入生物素化的抗人BCL-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,BCL-2浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中BCL-2浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1:5-10稀释(取40ul,加标本稀释液160ul,稀释5倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应BCL-2含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的BCL-2检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人BCL-2。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)试剂盒使用说明书
- 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)水平。用纯化的猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞凋亡相关因子(Bcl-2),再与HRP标记的细胞凋亡相关因子(Bcl-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞凋亡相关因子(Bcl-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)浓度。猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)试剂盒使用说明书试剂盒组成30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶标试剂标准品(200μg/L)标准品稀释液3酶标包被板4样品稀释液5显色剂A液6显色剂B液10说明书11封板膜12密封袋2张1个猪细胞凋亡相关因子(Bcl-2)试剂盒使用说明书标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。100μg/L50μg/L5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液25μg/L12.5μg/L6.25μg/L2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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小鼠细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠BCL-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的BCL-2与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠BCL-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,BCL-2浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中BCL-2浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清测定前用标本稀释液至少作1:5稀释(取40ul,加标本稀释液160ul,稀释5倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应BCL-2含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的BCL-2检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠BCL-2。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2024-09-29 10:16
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产品应用(51)利用EarlyTox细胞活力检测试剂盒评估GM-CSF和TNFα 诱导的细胞凋亡
- 肿瘤坏死因子(TNFα)是一个关键的细胞炎症因子,它可以通过许多细胞通路来调控各种细胞事件。[详细]
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2021-02-24 15:46
应用文章
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产品应用(1)利用SpectraMax Paradigm 多功能检测平台同时进行细胞凋亡和细胞坏死筛选工作
- 细胞凋亡和细胞坏死的本质均为细胞死亡,但我们可以通过其发生机制和病理形态学方面所表现出的特征加以区别。[详细]
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2021-02-23 16:11
应用文章
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