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大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响
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大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响
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大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响- 大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响[详细]
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2015-05-18 00:00
期刊论文
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- 为何牛血清在细胞培养实验中如此受宠？
- 作为各类种属的高质量血清供应商，一般客户咨询血清购买时，我们都会推荐牛血清。而我公司Z为的血清产品中莫过于胎牛血清了，那么为何牛血清在细胞培养实验中如此受宠呢？据上海恒远技术员分析，主要原因有这五个方面：1.提供结合蛋白：作用是携带重要地低分子量物质，在细胞代谢过程中起重要作用。2.提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。3.提供基本营养物质：氨基酸、维生等是细胞生长必须的物质。4.提供激素和各种生长因子。5.对培养中的细胞起到某些保护作用。针对第五个原因，我们来ZD谈谈。有一些细胞，如内皮细胞、样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。上海恒远公司技术员分析，这是因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了的粘度可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用。在昨日上午的时候，我公司业务员接到了实验技术人员的电话，其中特别说明到了有多位老师提出问题：人血清一定要加热灭活吗？不然会怎样？其实对于它的加热灭活是应该根据情况而定的。很多朋友在使用实验者认为一定需要加热灭活，其实这个认知是不正确的，是否需要灭活是要根据情况而定。人们通常通过在56℃加热30分钟的办法，来灭活其中的补体，以及其中可能的微生物（比如支原体）的污染。加热灭活带来的问题是，其中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。但是它的补体含量很低，即使在未稀释的胎牛血清中，也观察不到溶血现象。另外37℃的加热能够有效灭活补体。所以对它而言，并不需要通过专门的热灭活来灭活其中的补体。早期的人血清制备中的滤膜的孔径大于0.22um，不能有效的去除支原体的污染。热灭活可以去除支原体的污染。但是现在制备中的终端滤膜的孔径为0.1um甚至小到0.04um，所以一般没有支原体的污染。通过以上，上海恒远公司总结：除非有特别的情况，标准厂家生产的一般不需要加热灭活。不过因考虑到其质量问题，为安全起见，还是以加热灭活为好。[详细]
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2018-11-16 10:02
产品样册
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2024-09-29 00:34
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- 细胞培养中死活细胞测定
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2013-11-11 00:00
安装说明
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- 牛血清的主要作用
- 1、特级胎牛血清BioInd特级胎牛血清经过3次100nm过滤，内毒素及血红蛋白含量极低，适合于大多数细胞的培养。2、胚胎干细胞及间充质干细胞专用胎牛血清BioInd对不同批号的血清（10%胎牛血清）进行细胞培养来筛选，在既定条件下测定未分化细胞克隆数（ES-D3鼠多能性细胞，ATCC，CRL-1934），筛选出保持干细胞未分化状态良好的胚胎干培养专用胎牛血清血清，能很好的支持胚胎干细胞的体外培养及研究。间充质干细胞专用胎牛血清经筛选适合间充质干细胞的培养。3、热灭活胎牛血清血清热灭活通过提高血清温度到56度并且保持该温度30分钟完成。热灭活可以破坏补体，用于细胞表面抗原抗体研究。对于大多数细胞而言，热灭活并非必须，多个实验表明，热灭活对于提高细胞培养效果并无改善，而且热灭活会使血清沉淀增加，除非必须，否则不建议做血清热灭活。4、活性炭过滤胎牛血清（炭吸附胎牛血清）活性炭过滤胎牛血清用于体外培养验证激素的作用。研究包括类固醇受体连接，细胞受体类固醇调节，各种组织激素分泌和甲状腺激素功能。生产程序为使用活性碳和右旋糖苷去除胎牛血清中的激素。5、透析型胎牛血清大多数细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力。尽管血清可以满足一般细胞培养需求，但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中，仍必须去处这些特定的成分。去除Z常用的方法是透析。透析是将浓缩的血清循环通过中空纤维。这种透析需要在血清中添加生理盐水以补充。6、四环素调控系统专用血清本血清经过预测试可以用于四环素调控系统。7、γ-照射胎牛血清可按客户要求对血清进行γ射线照射。通过γ射线照射以灭活各种动物血清中的病毒和支原体的方法已经得到证实。研究证实照射剂量在30-45kGy为宜。这一数据符合Zxin的欧洲和美国FDA的标准，证实血清被照射后物理化学特性和细胞培养表现没有改变。标准马血清说明：本产品需要预先定制，可照射任何一种胎牛血清，价格在原胎牛血清价格上加收照射费用。[详细]
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2018-10-03 10:00
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- 免疫传感器检测牛血清中的17beta雌二醇
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2011-04-18 00:00
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2014-11-27 00:00
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2009-05-21 00:00
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2016-08-24 00:00
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2024-09-11 17:46
产品样册
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- 牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析
- 检测范围：96T3ng/ml-85ng/ml使用目的：本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中牛血清白蛋白残留检测含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛的牛血清白蛋白残留检测水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入牛的牛血清白蛋白抗原，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛的牛血清白蛋白残留检测呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛的牛血清白蛋白残留检测浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80ng/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40ng/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5ng/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
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2018-10-08 10:01
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2015-05-13 00:00
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2015-07-27 00:00
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2014-08-18 00:00
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- 细胞培养系统：杂交瘤细胞[详细]
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2008-06-27 00:00
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2018-08-24 10:00
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2024-09-14 01:07
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