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雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书
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雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlTRACP-5b小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b规格:48T/96TAsAb小鼠抗精子抗体规格:48T/96TATGA/TGAB小鼠抗甲状腺球蛋白抗体规格:48T/96TTPO-Ab小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体规格:48T/96TTPO-Ab小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体规格:48T/96TEMAIgA小鼠抗肌内膜抗体IgA规格:48T/96Tgp210小鼠抗核膜糖蛋白210抗体规格:48T/96TAMA小鼠抗单核细胞抗体规格:48T/96TTRAb小鼠抗促甲状腺素受体抗体规格:48T/96TαFodrinIgG/IgA小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA规格:48T/96T小鼠抗IVIgG抗体ELISAKit,48T/96T小鼠抗IVIgG抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96T小鼠抗IgE受体抗体ELISAKit,48T/96T小鼠抗IgE受体抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96TMIF小鼠巨噬细胞移动YZ因子规格:48T/96TMIP-5小鼠巨噬细胞炎性蛋白5规格:48T/96TMIP-3β小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β规格:48T/96TMIP-3α小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α规格:48T/96TMIP-2小鼠巨噬细胞炎性蛋白2规格:48T/96TMIP-1δ/CCL15小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ规格:48T/96TMIP-1β/CCL4小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β规格:48T/96TMIP-1α/CCL3小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α规格:48T/96TAmAC-1小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1规格:48T/96TMDC/CCL22小鼠巨噬细胞来源的趋化因子规格:48T/96TM-CSF小鼠巨噬细胞集落刺激因子规格:48T/96TADAM8小鼠解整合素样金属蛋白酶8规格:48T/96TUU-Ab小鼠解脲脲原体抗体规格:48T/96TCNTF小鼠睫状神经营养因子规格:48T/96THpt/HP小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白规格:48T/96TCTGF小鼠结缔组织生长因子规格:48T/96TDes小鼠结蛋白规格:48T/96TCCA小鼠结肠癌抗原规格:48T/96TKAF小鼠角化细胞内分泌因子规格:48T/96TGDNF小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子规格:48T/96TCollagenaseII小鼠胶原酶II规格:48T/96TCollagenaseI小鼠胶原酶I规格:48T/96TPCT小鼠降钙素原规格:48T/96TCGRP小鼠降钙素基因相关肽规格:48T/96TCT小鼠降钙素规格:48T/96TALP小鼠碱性磷酸酶规格:48T/96TbFGF-9小鼠碱性成纤维细胞生长因子9规格:48T/96TbFGF-6小鼠碱性成纤维细胞生长因子6规格:48T/96TbFGF-4小鼠碱性成纤维细胞生长因子4规格:48T/96TbFGF小鼠碱性成纤维细胞生长因子规格:48T/96TTAb小鼠甲状腺素抗体规格:48T/96TT4小鼠甲状腺素规格:48T/96TTG小鼠甲状腺球蛋白规格:48T/96TTPO小鼠甲状腺过氧化物酶规格:48T/96TPTHrP小鼠甲状旁腺激素相关蛋白规格:48T/96T
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雌三醇(E3)ELISA试剂盒说明书
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- 人雌三醇(E3)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人E3单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的E3与单抗结合,加入生物素化的抗人E3,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,E3浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中E3浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成1000ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应E3含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的E3检测浓度小于0.8ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人E3。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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2024-09-18 18:07
产品样册
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特价销售人雌三醇ELISA检测试剂盒说明书
- 特价销售人雌三醇ELISA检测试剂盒说明书[详细]
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2015-05-11 00:00
专利
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salimetrics唾液雌三醇诊断试剂盒说明书
- Salimetrics唾液成分检测金标准Salimetrics是一家的唾液生物学研究领域专业产品供应商,其在唾液的收集方法、生物学性质及其(唾液中各生物组分的含量)定量检测技术拥有的研发与产品供应优势。作为唾液生物学研究及诊断试剂盒应用领域的行业标准,其供应的唾液手机方案及唾液成分的ELISA检测试剂盒均专门唾液的理化性质所设计,可确保客户在科学研究或临床诊断中得到稳定、准确的唾液生物学信息,并同时具有操作简便、结果极ng确可靠、可重复性高、耗时少等诸多优点。Salimetrics的唾液检测实验室及拥有丰富的唾液生物学研发经验的专业团队可以为广大客户提供唾液生物学研究及诊断应用的专业指导。雌三醇是一种性激素,可从妊妇尿中检出。雌激素的作用比雌酮弱。在胎儿的肾上腺里生成的脱氢表雄酮,在肝脏里经16α羟基化后,在胎盘里芳构化而成为雌三醇。随着妊娠的进行,在尿中的排出量逐渐增加,至分娩后锐减。作为缓和的性激素试剂,经口服可ZL更年期障碍等。salimetrics唾液雌三醇(Estriol)诊断试剂盒货号1-1802(5PK1-1802-5)灵敏度1pg/mLSalimetrics的主要产品:一、唾液ELISA检测试剂盒(适用于科研及临床诊断)Salimetrics供应多款唾液成分定量检测试剂盒,不仅适用于科学研究,也可用于临床诊断。严苛的质控标准确保了Salimetrics供应的检测试剂盒拥有极ng准的可重复性高的检测试剂盒产品,是唾液生物学研究中的行业金标准产品。该大类产品细分为科研产品系列及临床诊断产品系列,具体如下:科研产品系列产品图片检测目的物货号灵敏度17α-Hydroxyprogesterone1-2602(5PK1-2602-5)3pg/mLAlpha-Amylase1-1902(5PK1-1902-5)N/AAndrostenedione1-2902(5PK1-2902-5)5pg/mLC-ReactiveProtein1-3302(5PK1-3302-5)10pg/mLCortisol1-3002(5PK1-3002-5)<0.007ug/dLCotinine1-2002(5PK1-2002-5)0.15ng/mLDHEA1-1202(5PK1-1202-5)5pg/mLDHEA-S1-1252(5PK1-1252-5)43pg/mLEstradiol1-3702(5PK1-3702-5)0.1pg/mLEstriol1-1802(5PK1-1802-5)16pg/mLEstriol1-1802(5PK1-1802-5)1pg/mLEstrone1-3202(5PK1-3202-5)1pg/mLInterleukin-61-36020.07pg/mLInterleukin-1Beta1-3902(5PK1-3902-5)<0.37pg/mLMelatonin1-3402(5PK1-3402-5)1.37pg/mLProgesterone1-1502(5PK1-1502-5)5pg/mLSecretoryImmunoglobulinA1-1602(5PK1-1602-5)2.5g/mLTestosterone1-2402(5PK1-2402-5)1pg/mLTransferrin&BloodContamination1-1302(5PK1-1302-5)0.08mg/dLUricAcid1-3802(single),(5PK1-3802-5)0.07mg/dLLOD临床诊断产品系列产品图片检测目的物货号灵敏度Cortisol1-3102(5-pack1-3102-5)<0.007ug/dLCotinine1-2112(5-pack1-2112-5)0.15ng/mLDHEA1-2212(5-pack1-2212-5)5pg/mLEstradiol1-4702(5-pack1-4702-5)0.1pg/mLEstriol1-2812(5PK1-2812-5)1pg/mLProgesterone1-2502(5-pack1-2502-5)5pg/mLTestosterone1-2312(5-pack1-2312-5)1pg/mL二、唾液收集器有效的唾液样品收集多准确的检测结果有至关重要的影响,Saliva供应标准有效的唾液样品收集容器与方案,聚丙烯材料制作,专业的设计减少了样品起泡、增加样品收集参与度(提高收集舒适度)、节省时间,便于长期存储及冻存(to-80°C)。单个的独立包装,便于批量使用。产品如下:1、SalivaBioPassiveDroolMethod(适用于六岁以上儿童及成人)LearnMore2、SalivaBioOralSwab(SOS)Method(适用于六岁以上儿童及成人)3、SalivaBioChildren’sSwab(SCS)Method(适用于6个月以上及成人,以及动物使用)4、SalivaBioInfant’sSwab(SIS)Method(适用于6月龄以下婴儿使用)三、唾液生物学研究及分析服务凭借丰富的唾液生物学研究、生产经验及专业团队,Salimetrics提供一系列唾液生物学研究及分析服务,包括:组分定量检测,DNA提取与分析,检测/诊断试剂盒的研发与生产等。详细公司及产品信息请访问:http://www.salimetrics。。com/[详细]
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2018-09-29 10:02
产品样册
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人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒
- 人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒[详细]
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2015-01-13 00:00
期刊论文
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人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒
- 人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-27 23:54
报价单
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免费促销人雌三醇ELISA检测试剂盒特价
- 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:E3试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知E3浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将E3和生物素标记的抗体同时温育。人雌三醇ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中E3的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。人雌三醇ELISA检测试剂盒底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:人雌三醇ELISA检测试剂盒于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的E3标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的E3含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-40ng/ml4、敏感度:0.1ng/mlRC079-2ugRecombinantHumanMIP-4/CCL18(rHuMIP-4/CCL18)2ugRC080-5ugRecombinantHumanMIP-3alpha/CCL20(rHuMIP-3a/CCL20)5ugRC081-2ugRecombinantMurineSDF-1beta/CXCL12(rMuCXCL12)2ugRC082-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重组激素100ugRC083-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重组激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重组激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重组鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml细胞分离液1.077200ml[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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E3产品手册
- 保养,售后,安装等操作[详细]
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2024-09-14 02:33
操作手册
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E3 系列生物显微镜
- E3 系列生物显微镜[详细]
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2024-09-11 18:03
产品样册
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人超敏游离雌三醇(uE3)检测试剂盒
- 人超敏游离雌三醇(uE3)检测试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
其它
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雌三醇的分析
- 雌三醇的分析[详细]
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2024-09-29 07:43
标准
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ELISA试剂盒说明书
- 植物防卫素/植物抗毒素(PDF)ELISA试剂盒说明书本试剂盒植物防卫素/植物抗毒素(PDF)ELISA试剂盒仅供体外研究使用预期应用ELISA法定量测定植物组织、细胞或其它相关样本中防卫素/植物抗毒素(PDF)含量。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗PDF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗PDF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的PDF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)1.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成20ng/ml,10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。如配制10ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)20ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。2.样品稀释液:1×20ml/瓶。3.检测稀释液A:1×10ml/瓶。4.检测稀释液B:1×10ml/瓶。5.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。6.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。7.底物溶液:1×10ml/瓶。8.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。9.终止液:1×10ml/瓶(2NH2SO4)。10.覆膜:1×5张操作步骤实验开始前,请提前配制好所有试剂;试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,均应用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。建议各实验室在操作前先进行预实验以建立**稀释倍数。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。注:1.每次实验留一孔作为空白调零孔(不同于空白孔),该孔不加任何试剂,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。2.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温。使用后立即冷藏保存试剂。3.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入检测溶液B或底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,洗板拍干后请立即加入后步试剂,应避免微孔干燥掉。4.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。5.在储存和温育时避免强光直接照射。6.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。7.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。特异性本试剂盒可同时检测重组或天然的植物防卫素/植物抗毒素(PDF),且与其它相关蛋白无交叉反应。计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线(推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curveexpert1.3),根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。2.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。3.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数。5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。6.底物请避光保存。说明1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,**个孔与Z后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。4.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。6.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。7.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。8.有效期:6个月ELISA试剂盒联系人:马先生(先生)部门(职位):销售(经理)手机号码:15021200052电话:86-021-54100800/64855665传真:86-021-54261506所在地:上海公司地址:徐汇区钦江路15号1405邮政编码:200233邮件:solarbio@126.com公司网址:http://www.shsolarbio.com[详细]
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2018-09-02 10:00
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DKK-1 ELISA试剂盒说明书
- Wnt通路YZ因子DKK-1检测试剂盒背景介绍:DKK-1是影响成骨细胞成熟的WNT信号通道的拮抗剂。Dkk-1首先在人肝母细胞瘤和Wilms’瘤中,然后在肝肿瘤中被发现高表达。Dkk-1的高表达被证明可以成为多种肿瘤预后差的标志,如肝细胞癌、食道癌、骨肉瘤、肺癌、结肠癌、骨关节炎、骨质疏松症、卵巢上皮癌和多发性瘤。DKK-1对肿瘤的骨转移有促进作用,这与DKK-1能导致骨吸收,YZ骨形成的作用相一致。产品优势:用于人血清样本检测样本量小,只需20ul检测范围宽夹心法检测操作时间短参考文献:TheroleofDickkopf-1inbonedevelopment,homeostasis,anddisease.PinzoneJJetal.,Blood,2009;113:517-525.ElevatedSerumDickopf-1LevelsIncreaseRiskofHipandVertebralFractureinOlderCaucasianWomen.ArasuAetal.,EndocrRev,2013;34:SAT-224.ComparativeEffectofZoledronicAcidVersusDenosumabonSerumSclerostinandDickkopf-1LevelsofNaivePostmenopausalWomenWithLowBoneMass:ARandomized,Head-to-HeadClinicalTrial.AnastasilakisADetal.,JClinEndocrinolMetab,2013;98:3206-3212.[详细]
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2018-10-31 10:00
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