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LacSwith II哺乳动物诱导表达系统 (pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI)说明书
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StratageneLacSwithII哺乳动物诱导表达系统StratageneLacSwitchIIInducibleMammalianExpressionSystemStratageneVectors:pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI产品参数:MammalianSelection:G418,neo载体抗性:氨苄青霉素(Ampicillin)载体描述:ImprovedSystemTheimprovedLacSwitch?IIinduciblemammalianexpressionsystemconsistsof3vectors:pOPI3CATvectorfromtheoriginalLacSwitchsystemandtwonewvectors,pCMVLacIandpOPRSVI/MCS,thatdramaticallyimprovethesystem’sperformanceandversatility.Lacrepressorprotein,producedfromthepCMVLacIvector,blockstranscriptionbybindingtheLacrepressorproteintoaspecificDNAsequence(theoperator)inthepOPI3CATandpOPRSVI/MCSvectors.IPTG,whichhasnoadverseeffectineukaryoticcells,decreasesthebindingaffinityoftheLacrepressorproteintotheoperatorsequences,triggeringtranscriptionandexpressionoftheinsertedgene.TheLacSwitchIIsystemallowsinductionofthegeneofinterestwithin4-8hours.TightRepressionThenewpCMVLacIvectorreplacesthep3’SSvectorfromtheoriginalsystem.ThepCMVLacIvectorprovidesgreaterrepressionofthegeneofinterestduetotheincreasedstrengthoftheCMVpromoter.HighexpressionofthelacIgeneprovides2-to10-foldtighterrepressionofthegeneofinterestthantheoriginalp3’SSvector.Anuclearlocalizationsequence(NLS)directsexpressionofLacrepressortothenucleus.DirectionalInsertionoftheGeneofInterestTofacilitatedirectionalcloning,themultiplecloningsitefrompBluescript?IISKwasinsertedintopOPRSVI.TheresultingpOPRSVI/MCSvectorpermitsdirectionalinsertionofthegeneofinterest,decreasingthetimerequiredforscreening.ThepresenceofT3andT7promotersoneitherendoftheMCSinthepOPRSVI/MCSvectorallowseasysequencingandverificationofpositiveinsertsusingT3andT7primers.RemovaloftheRSVPromoterThepOPI3CAToperatorvectorisincludedintheLacSwitchIIsystemforreplacingtheRSV-LTRpromoterwithapromoterofinterest.ThisvectorcontainsthreeoperatorsintheintronanduniquerestrictionsitesforremovaloftheRSVpromoter.
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LacSwith II哺乳动物诱导表达系统 (pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI)说明书
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2018-09-29 10:03
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Invitrogen GeneSwith 哺乳动物诱导系统pSwitch 说明书
- InvitrogenGeneSwith哺乳动物诱导系统InvitrogenVectors:pSwitch产品参数:MammalianSelection:Hygromycin载体抗性:氨苄青霉素(Ampicillin)载体描述:Switch-OnExpressionfromtheLowestBasalLevelsTheGeneSwitch?Systemforinduciblemammalianexpressionisidealforexperimentsthatrequiretheabsolutelowestuninducedexpressionlevels.TheexpressionvectorpGene/V5-Hisprovidesaminimalpromoter,GAL4-E1b,consistingofthebindingsitesfortheyeastGal4DNAbindingproteinfollowedbytheTATAsequencefromtheAdenovirusE1bpromoter.Withoutadditionalfactors,theGAL4-E1bpromoteristranscriptionallysilent.ToactivatetranscriptionfromtheGAL4-E1bpromoter,theGeneSwitch?regulatoryproteinisexpressedfromaminimalTKpromoteronthepSwitchvector.TheGeneSwitch?proteinhasthreefunctionaldomains:Gal4DNABindingDomain(Gal4-DBD)tobindtheregulatoryproteintotheGAL4-E1bpromoterTruncatedhumanProgesteroneReceptorLigandBindingDomain(hPR-LBD)thatundergoesaconformationalchangewhenitbindstheprogesteroneantagonist,mifepristoneTranscriptionactivationdomainfromtheNF?Btranscriptionfactorp65(p6D)toactivatetranscriptionfromthesilentGAL4-E1bpromoterIntheabsenceofmifepristone,theconformationofthehPR-LBDregionpreventstheGeneSwitch?regulatoryproteinfromactivatingtranscriptionfromtheGAL4-E1bpromoter.WhenmifepristoneisaddedandbindsthehPR-LBDregion,theGeneSwitch?regulatoryproteinassumesaconformationthatpermitsittostimulatetranscriptionfromtheGAL4-E1bpromoter.InductionoftheGeneSwitch?SystemleadstoactivationofthegeneofinterestonthevectorpGene/V5-His.Inaddition,fourGal4bindingsitesupstreamoftheminimalHSVTKpromoteronpSwitchcanbindthepSwitchregulatoryprotein.Therefore,addingmifepristoneup-regulatesproductionoftheregulatoryprotein.TheincreasedlevelsoftheGeneSwitch?regulatoryproteinresultininductionofthegeneofinterestfrompGene/V5-Histolevelsthatcanapproachthoseofviralpromoters.TheGeneSwitch?Kitoffersexceptionallylowuninducedandhighinducedexpressionlevelsinmammaliancells.ThesystemprovidestheexpressionvectorpGene/V5-Hiswiththeminimal,syntheticGAL4-E1bpromoterthatistranscriptionallysilentuntilactivated.TheGeneSwitch?regulatoryproteinbindstheGAL4-E1bpromotertoactivatetranscriptionupontheadditionofmifepristone.Inaddition,theGeneSwitch?proteinupregulatesitsownexpression,leadingtoamplifiedexpressionofthegeneofinterestfrompGene/V5-His.pGene/V5-Hisoffersseveralfeaturesthatfacilitateexpressionanalysisandpurificationofrecombinantproteinsinmammaliancells:C-terminalV5epitopetagfordetectionwithAnti-VntibodiesC-terminalpolyhistidine(6xHis)tagforrapidpurificationwithnickel-chelatingresinanddetectionwithAnti-His(C-term)AntibodiesTheZeocin?resistancegeneforeffectiveselectioninbothmammaliancellsandE.coli[详细]
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- 激光诱导击穿光谱(LIBS)是一种原子发射光谱仪。可以对固相、液相和气相基体中几乎所有元素进行定性和定量的分析。不同于传统的检测方法如ICP-OES或者XRF,LIBS在检测过程中无需进行复杂的样品制备。为了达到这个目的,LIBS采用高能量聚焦脉冲激光光束将样品激发至等离子态,对产生的对应元素发射谱进行分析。元素发射谱的波长与元素的种类直接相关,而元素谱线的强度则和元素的含量相关。[详细]
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大鼠II型胶原蛋白(Collagen II)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠II型胶原蛋白(CollagenII)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠CollagenII单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CollagenII与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠CollagenII,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,CollagenII浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CollagenII浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1000ng/ml2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:设标准管7管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第六管中吸出300ul弃去。第七管为空白对照。加上原液管总共八管。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CollagenII含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CollagenII检测浓度小于10ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠CollagenII。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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人尾加压素II(Urotensin II)ELISA试剂盒说明书
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人II型胶原(Collagen II)ELISA试剂盒说明书
- 人II型胶原(CollagenII)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CollagenII单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CollagenII与单抗结合,加入生物素化的抗人CollagenII,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CollagenII浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CollagenII浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1000ng/ml1瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:设标准管7管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第六管中吸出300ul弃去。第七管为空白对照。加上原液管总共八管。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CollagenII含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CollagenII检测浓度小于8ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CollagenII。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人血管生成素II (Ang II)ELISA试剂盒说明书
- 人血管生成素II(AngII)ELISA试剂盒试验原理:AngII试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知AngII浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AngII和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AngII的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人血管生成素II(AngII)ELISA试剂盒操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人血管生成素II(AngII)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AngII标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AngII含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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DUSTTRAK II 8532 中文说明书
- DustTrakII气溶胶监测仪8532是一款手持式电池供电型且具有数据记录功能的光散射激光光度计,能够向您提供大量实时气溶胶读数。它使用鞘气系统使得光学元件室中的气溶胶分隔,使得光学元件能够保持清洁,提高了设备的可靠性,降低了维修率。[详细]
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2018-10-27 10:00
产品样册
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