资料库
毕赤酵母表达系统说明书
-
本文由 上海起发实验试剂有限公司 整理汇编
2018-09-29 10:02 1849阅读次数
文档仅可预览首页内容,请下载后查看全文信息!
-
立即下载
毕赤酵母表达系统说明书YoucanputthepowerofP.pastorisintoyourlaboratorywithacompletePichiaExpressionKitorwithindividualPichiaexpressionvectors.ThreePichiaExpressionKitsareavailable,eachofwhichincludesvectors,P.pastorisstrains,reagentsfortransformation,sequencingprimers,media,andacomprehensivemanual(Table3).Inaddition,thepPICZ,pGAPZ,andpPIC6vectorsareavailableseparately(seeinsertfororderinginformation).ChoosethekitorvectorthatbestmeetsyourresearchneedsandtakeadvantageoftheprovenstrengthofP.pastoris.Table3Pichiaexpressionkitcomponents.EasySelectPichiaExpressionKitMulti-CopyPichiaExpressionKitOriginalPichiaExpressionKitVectorspPICZA,B,C(20geach)pPICZαA,B,C(20geach)pPIC9K(20g)pPIC3.5K(20g)pAO815(20g)pPIC9(10g)pPIC3.5(10g)pHIL-D2(10g)pHIL-S1(10g)StrainsX-33(Mut+,His+)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/pPICZ/lacZ(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)TransformationreagentsPichiaEasyCompKit(120transformations)SpheroplastModule(50transformations)SpheroplastModule(50transformations)SequencingprimersOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorMediaandsupplementsYPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)Zeocin(250mg)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)上海起福生物科技有限公司联系人:杨建辉400电话:4006551678办公电话:021-50724187传真:021-50724961*8006手机:15921799099企业QQ:4006551678网址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦东新区绣川路561号1102室
登录或新用户注册
请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号
微信扫码,手机电脑联动
更多资料
-
毕赤酵母表达系统说明书
- 毕赤酵母表达系统说明书YoucanputthepowerofP.pastorisintoyourlaboratorywithacompletePichiaExpressionKitorwithindividualPichiaexpressionvectors.ThreePichiaExpressionKitsareavailable,eachofwhichincludesvectors,P.pastorisstrains,reagentsfortransformation,sequencingprimers,media,andacomprehensivemanual(Table3).Inaddition,thepPICZ,pGAPZ,andpPIC6vectorsareavailableseparately(seeinsertfororderinginformation).ChoosethekitorvectorthatbestmeetsyourresearchneedsandtakeadvantageoftheprovenstrengthofP.pastoris.Table3Pichiaexpressionkitcomponents.EasySelectPichiaExpressionKitMulti-CopyPichiaExpressionKitOriginalPichiaExpressionKitVectorspPICZA,B,C(20geach)pPICZαA,B,C(20geach)pPIC9K(20g)pPIC3.5K(20g)pAO815(20g)pPIC9(10g)pPIC3.5(10g)pHIL-D2(10g)pHIL-S1(10g)StrainsX-33(Mut+,His+)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/pPICZ/lacZ(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)TransformationreagentsPichiaEasyCompKit(120transformations)SpheroplastModule(50transformations)SpheroplastModule(50transformations)SequencingprimersOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorMediaandsupplementsYPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)Zeocin(250mg)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)上海起福生物科技有限公司联系人:杨建辉400电话:4006551678办公电话:021-50724187传真:021-50724961*8006手机:15921799099企业QQ:4006551678网址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦东新区绣川路561号1102室[详细]
-
2018-09-29 10:02
产品样册
-
毕氏酵母电转化法
- 毕氏酵母电转化法[详细]
-
2013-11-01 00:00
专利
-
Clontech酵母双杂交系统 pCL1说明书
- MATCHMAKERGAL4Two-HybridVectorsHandbookpCL1型号载体名称出品公司载体用途VJC0484pCL1Clontech酵母双杂交系统产品参数:测序引物:CMV-F载体抗性:氨苄青霉素(Ampicillin)载体描述:pCL1isapositivecontrolplasmidthatencodesthefulllength,wild-typeGAL4protein.TheGAL4proteinactivatesreportergenesunderthecontrolofaGAL4-responsiveelement(UASG).Thus,pCL1isusedasapositivecontrolforthetranscriptionassayinGAL4-basedMATCHMAKERTwo-HybridSystems.ThisvectorisaderivativeofYCp50referencedinFields&Song,1989.pCL1hasnotbeensequenced.质粒图谱:[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
Clontech 酵母双杂交系统 pGBKT7说明书
- Clontech酵母双杂交系统pGBKT7,酵母双杂交系统pGBKT7,ClontechpGBKT7pGBKT7产品参数:MammalianSelection:TRP1(HIS3selection)载体抗性:卡那霉素(Kanamycin)说明书:质粒图谱:[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
Clontech pBridge酵母三杂交系统说明书
- ClontechpBridge酵母三杂交系统说明书载体描述:pBridgeexpressestwoproteins:aDNA-bindingdomainfusion,andanadditionalprotein.pBridgethusallowsestablishmentofthree-hybridsystemswhenusedincombinationwithanactivationdomainfusionvectorandyeaststrainsfromanyofClontech'sGAL4-basedtwo-hybridsystems,includingMatchmakerGold.ThisvectorgeneratesahybridproteinthatcontainsthesequencesfortheGAL4DNA-bindingdomain(DNA-BD)andthesequenceclonedintoMCSI.ThefusionproteinisexpressedinyeasthostcellsfromtheconstitutiveADH1promoter;transcriptionisterminatedattheADH1transcriptionterminationsignal.Thehybridproteinistargetedtotheyeastnucleusbynuclearlocalizationsequences(NLS)thatareanintrinsicpartoftheGAL4DNA-BD.AnadditionalgeneofinterestcanbeclonedintoMCSIIwhichislocateddownstreamofanHAepitopeandasecondNLS.TheresultingfusionproteinisconditionallyexpressedfromtheMet25promoterinresponsetomethioninelevelsinthemedium;i.e.,itisrepressedinthepresenceof1mMmethionineandexpressedintheabsenceofmethionine.质粒图谱:[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
酵母单杂交系统Clontech pHis2说明书
- 酵母单杂交系统ClontechpHis2说明书DescriptionpHIS2isareportervectorthatcanbeusedinyeastone-hybridassaystoidentifyandcharacterizeDNA-bindingproteins.ThevectorwasspecificallydesignedforusewiththeBDMatchmakerOne-HybridLibraryConstruction&ScreeningKit(#K1617-1).ItcontainsaHIS3nutritionalreportergene,locateddownstreamofamultiplecloningsite(MCS)andtheminimalpromoteroftheHIS3locus(PminHIS3).Cis-actingDNAsequences,orDNAtargetelements,canbeinsertedintotheMCSandusedasbaitstoscreenGAL4AD/cDNAfusionlibrariesforproteinsthatinteractwiththetargetsequence.Aprotein-DNA(orone-hybrid)interactioncanbedetectedbyperformingtheassayinayeaststrainsuchasY187thatisauxotrophicforhistidine.Positiveone-hybridinteractionsdriveexpressionoftheHIS3reportergene,whichenablesthehostcelltogrowonhistidine-deficientmedia.Intheabsenceofactivation,theconstitutiveHIS3expressionfromPminHIS3isverylow.Duringlibraryscreening,theleakyexpressionofHIS3iscontrolledbyadding3-amino-1,2,4-triazole(3-AT)tothemedium.Theconcentrationof3-ATneededtofullysuppressleakyHIS3expressionmustbedeterminedempiricallyforeachDNAtargetelement.pHIS2canbemaintainedinbothyeastandbacteria.Itcontainsanautonomousreplicationsequence(ARS4)andTRP1nutritionalmarkerforreplicationandselectioninyeast(1,2);itcontainsaColE1originandakanamycinresistancegene(Kanr)forpropagationandselectioninE.coli.ThecentromericsequenceCEN6ensurespropersegregationoftheplasmidduringcelldivisioninyeast(1,2).UseTousepHIS2inaone-hybridassay,cloneoneormorecopiesofacis-actingDNAtargetsequenceintotheMCS.ThenintroducetheplasmidintocompetentyeastcellsusingthetransformationprotocolintheBDMatchmakerLibraryConstruction&ScreeningKitsUserManual(PT3529-1).IncontrasttotheoriginalBDMatchmakerOne-HybridSystem,thisreportervectordoesnotneedtobeintegratedintotheyeastgenome.Instead,itismaintainedasanepisomethroughouttheassay.InsertingyourtargetelementmayalterthelevelofbackgroundHIS3expression.Therefore,constructs首ldbetestedforbackground(leaky)HIS3expressionbeforeyoustartaone-hybridanalysis.BackgroundgrowthduetoleakyHIS3expressioniscontrolledbyadding3-ATtotheselectionmedium,asdescribedintheUserManual(PT3529-1).LocationofFeaturesMultiplecloningsites:141HIS3gene:152811FragmentcontainingtheHIS33'UTR&Terminationsequence:8121446TRP1gene:28553529FragmentcontainingtheColE1E.colioriginofreplication:41654615Kanamycin-resistancegene:56054811CEN6/ARS4sequences:62545737[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
Invitrogen Vectors:pIND,pVgRxR 蜕皮激素诱导表达系统说明书
- 蜕皮激素诱导表达系统InvitrogenVectors:pIND,pVgRxR产品参数:MammalianSelection:Zeocin载体抗性:博莱霉素(Zeocin)载体描述:蜕皮激素诱导系统(Ecdysone-InducibleSystem)蜕皮激素诱导系统是用来在哺乳动物细胞中对目的基因进行依赖剂量的可调控表达,该系统和其它表达系统相比Zda的区别是它的极ng确调控表达机制,使它能够在哺乳动物细胞中进行检测不到的基础表达和超过200倍的诱导表达。蜕皮激素诱导系统包含两个载体:pVgRXR和一个基于plND的诱导表达载体,pVgRXR可组成型表达人视黄酸受体(retenoldXreceptor,RXR)和一个修饰过的果蝇蜕皮激素受体(DrosophiaEcdysoneReceptor,VgEcR),这两种受体亚单位互相作用形成有功能的蜕皮激素受体。蜕皮激素诱导系统具有下述特点:可调节性表达:ponasteroneA(松甾酮A)或murlsteroneA(幕黎甾酮A)剂量依赖性的诱导,使表达具有弹性。Z小限度的基础表达:经过特别优化的pVgRXR和plND系列诱导表达载体,消除了与哺乳动物调控分子的非特异性相互作用。高诱导能力:pVgRXR和plND系列诱导表达载体使用了特别设计,以使基因诱导达到Zda。pVgRXR包含有Zeocin抗性基因,可以快速筛选能够稳定表达异源二聚体受体分子的细胞系。每个基于plND的诱导表达载体都包含有第二个药物抗性基因,以得到双倍稳定的细胞系。诱导试剂不影响哺乳动物的正常生理活动,所以不会产生多效性影响。质粒图谱:质粒图谱:[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
Simon全自动蛋白质表达分析系统
- Simon全自动蛋白质表达分析系统[详细]
-
2024-09-28 02:06
专利
-
LacSwith II哺乳动物诱导表达系统 (pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI)说明书
- StratageneLacSwithII哺乳动物诱导表达系统StratageneLacSwitchIIInducibleMammalianExpressionSystemStratageneVectors:pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI产品参数:MammalianSelection:G418,neo载体抗性:氨苄青霉素(Ampicillin)载体描述:ImprovedSystemTheimprovedLacSwitch?IIinduciblemammalianexpressionsystemconsistsof3vectors:pOPI3CATvectorfromtheoriginalLacSwitchsystemandtwonewvectors,pCMVLacIandpOPRSVI/MCS,thatdramaticallyimprovethesystem’sperformanceandversatility.Lacrepressorprotein,producedfromthepCMVLacIvector,blockstranscriptionbybindingtheLacrepressorproteintoaspecificDNAsequence(theoperator)inthepOPI3CATandpOPRSVI/MCSvectors.IPTG,whichhasnoadverseeffectineukaryoticcells,decreasesthebindingaffinityoftheLacrepressorproteintotheoperatorsequences,triggeringtranscriptionandexpressionoftheinsertedgene.TheLacSwitchIIsystemallowsinductionofthegeneofinterestwithin4-8hours.TightRepressionThenewpCMVLacIvectorreplacesthep3’SSvectorfromtheoriginalsystem.ThepCMVLacIvectorprovidesgreaterrepressionofthegeneofinterestduetotheincreasedstrengthoftheCMVpromoter.HighexpressionofthelacIgeneprovides2-to10-foldtighterrepressionofthegeneofinterestthantheoriginalp3’SSvector.Anuclearlocalizationsequence(NLS)directsexpressionofLacrepressortothenucleus.DirectionalInsertionoftheGeneofInterestTofacilitatedirectionalcloning,themultiplecloningsitefrompBluescript?IISKwasinsertedintopOPRSVI.TheresultingpOPRSVI/MCSvectorpermitsdirectionalinsertionofthegeneofinterest,decreasingthetimerequiredforscreening.ThepresenceofT3andT7promotersoneitherendoftheMCSinthepOPRSVI/MCSvectorallowseasysequencingandverificationofpositiveinsertsusingT3andT7primers.RemovaloftheRSVPromoterThepOPI3CAToperatorvectorisincludedintheLacSwitchIIsystemforreplacingtheRSV-LTRpromoterwithapromoterofinterest.ThisvectorcontainsthreeoperatorsintheintronanduniquerestrictionsitesforremovaloftheRSVpromoter.[详细]
-
2018-09-29 10:03
产品样册
-
赤羽病试剂盒检测说明书
- 赤羽病试剂盒检测说明书试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中赤羽病(AD)表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛赤羽病(AD)表达。用纯化的牛赤羽病(AD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中赤羽病(AD)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的赤羽病(AD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中牛赤羽病(AD)的存在与否。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50l。然后在待测样品孔先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算和结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为牛赤羽病(AD)阴性阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为牛赤羽病(AD)阳性。注意事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-10-09 10:00
产品样册
-
义翘讲堂《选对系统,高效表达:蛋白表达系统特性分析 × 高频问题一站式解答》
- 义翘讲堂《选对系统,高效表达:蛋白表达系统特性分析 × 高频问题一站式解答》——包含蛋白表达系统特性分析、各类蛋白表达平台技术路线、蛋白表达系统的选择策略、重组蛋白表达优化案例……[详细]
-
2026-01-22 10:39
课件
-
酵母双杂交系统的建立与发展
- 酵母双杂交系统的建立与发展[详细]
-
2015-04-01 00:00
其它
-
Milo单细胞蛋白质表达定量分析系统产品样册
- Milo单细胞蛋白质表达定量分析系统产品样册[详细]
-
2024-09-19 11:18
报价单
-
核糖核酸(酵母)
- 核糖核酸(酵母)[详细]
-
2024-09-28 21:49
选购指南
-
玉米赤霉烯酮免疫亲和柱说明书
- 资料名称:玉米赤霉烯酮免疫亲和柱说明书
适用产品:玉米赤霉烯酮免疫亲和柱
正文语言:中文
文件编号:BP017-2
文件版本:2.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:玉米赤霉烯酮免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中玉米赤霉烯酮检测的净化。可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析,适合谷物、食品和饲料等样品。[详细]
-
2018-05-18 10:53
其它
-
玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒说明书
- 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶联抗原,加入玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)标准品或样品,游离玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)与微孔条上预包被的玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶联抗原互相竞争抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)含量成反比,通过标准曲线计算样品中玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的含量。试剂盒组成1预包被的玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。2玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ng/ml,0.5ng/ml,2ng/ml,20ng/ml,200ng/ml,400ng/ml。3抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。4显色液A:1瓶(6ml)。5显色液B:1瓶(6ml)。6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。9说明书一份。注意事项1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。2不要使用过期试剂盒。3试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。4标准品中含有玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN),使用时应特别注意,操作时应带手套。5终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。7不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果9混合试剂时应避免起泡。[详细]
-
2019-01-02 10:00
产品样册
-
酵母质粒小量抽提试剂盒说明书
- 酵母质粒小量抽提试剂盒说明书[详细]
-
2014-12-12 00:00
标准
-
酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒使用说明书
- 酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中酵母过氧化氢酶(CAT)水平。用纯化的酵母过氧化氢酶(CAT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢酶(CAT),再与HRP标记的过氧化氢酶(CAT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶(CAT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中酵母过氧化氢酶(CAT)浓度。酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(16U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。酵母过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-11-23 10:00
产品样册
-
核糖核酸钠盐(酵母)
- 核糖核酸钠盐(酵母)[详细]
-
2014-09-30 00:00
应用文章
-
转移核糖核酸(酵母)
- 转移核糖核酸(酵母)[详细]
-
2024-09-27 23:47
期刊论文
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未经书面授权 , 页面内容不得以任何形式进行复制
参与评论
登录后参与评论