Clontech pBridge酵母三杂交系统说明书

Clontech pBridge酵母三杂交系统说明书

本文由上海起发实验试剂有限公司整理汇编

2018-09-29 10:03 2610阅读次数

扫码分享

文档仅可预览首页内容，请下载后查看全文信息！

收藏评价举报

立即下载

ClontechpBridge酵母三杂交系统说明书载体描述:pBridgeexpressestwoproteins:aDNA-bindingdomainfusion,andanadditionalprotein.pBridgethusallowsestablishmentofthree-hybridsystemswhenusedincombinationwithanactivationdomainfusionvectorandyeaststrainsfromanyofClontech'sGAL4-basedtwo-hybridsystems,includingMatchmakerGold.ThisvectorgeneratesahybridproteinthatcontainsthesequencesfortheGAL4DNA-bindingdomain（DNA-BD）andthesequenceclonedintoMCSI.ThefusionproteinisexpressedinyeasthostcellsfromtheconstitutiveADH1promoter;transcriptionisterminatedattheADH1transcriptionterminationsignal.Thehybridproteinistargetedtotheyeastnucleusbynuclearlocalizationsequences（NLS）thatareanintrinsicpartoftheGAL4DNA-BD.AnadditionalgeneofinterestcanbeclonedintoMCSIIwhichislocateddownstreamofanHAepitopeandasecondNLS.TheresultingfusionproteinisconditionallyexpressedfromtheMet25promoterinresponsetomethioninelevelsinthemedium;i.e.,itisrepressedinthepresenceof1mMmethionineandexpressedintheabsenceofmethionine.质粒图谱:

参与评论

登录后参与评论

全部评论(0条)

登录或新用户注册

微信登录
密码登录
短信登录

请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号

微信扫码，手机电脑联动

注册登录即表示同意《仪器网服务条款》和《隐私协议》

更多资料

Clontech pBridge酵母三杂交系统说明书

ClontechpBridge酵母三杂交系统说明书载体描述:pBridgeexpressestwoproteins:aDNA-bindingdomainfusion,andanadditionalprotein.pBridgethusallowsestablishmentofthree-hybridsystemswhenusedincombinationwithanactivationdomainfusionvectorandyeaststrainsfromanyofClontech'sGAL4-basedtwo-hybridsystems,includingMatchmakerGold.ThisvectorgeneratesahybridproteinthatcontainsthesequencesfortheGAL4DNA-bindingdomain（DNA-BD）andthesequenceclonedintoMCSI.ThefusionproteinisexpressedinyeasthostcellsfromtheconstitutiveADH1promoter;transcriptionisterminatedattheADH1transcriptionterminationsignal.Thehybridproteinistargetedtotheyeastnucleusbynuclearlocalizationsequences（NLS）thatareanintrinsicpartoftheGAL4DNA-BD.AnadditionalgeneofinterestcanbeclonedintoMCSIIwhichislocateddownstreamofanHAepitopeandasecondNLS.TheresultingfusionproteinisconditionallyexpressedfromtheMet25promoterinresponsetomethioninelevelsinthemedium;i.e.,itisrepressedinthepresenceof1mMmethionineandexpressedintheabsenceofmethionine.质粒图谱:[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
酵母单杂交系统Clontech pHis2说明书

酵母单杂交系统ClontechpHis2说明书DescriptionpHIS2isareportervectorthatcanbeusedinyeastone-hybridassaystoidentifyandcharacterizeDNA-bindingproteins.ThevectorwasspecificallydesignedforusewiththeBDMatchmakerOne-HybridLibraryConstruction&ScreeningKit（#K1617-1）.ItcontainsaHIS3nutritionalreportergene,locateddownstreamofamultiplecloningsite（MCS）andtheminimalpromoteroftheHIS3locus（PminHIS3）.Cis-actingDNAsequences,orDNAtargetelements,canbeinsertedintotheMCSandusedasbaitstoscreenGAL4AD/cDNAfusionlibrariesforproteinsthatinteractwiththetargetsequence.Aprotein-DNA（orone-hybrid）interactioncanbedetectedbyperformingtheassayinayeaststrainsuchasY187thatisauxotrophicforhistidine.Positiveone-hybridinteractionsdriveexpressionoftheHIS3reportergene,whichenablesthehostcelltogrowonhistidine-deficientmedia.Intheabsenceofactivation,theconstitutiveHIS3expressionfromPminHIS3isverylow.Duringlibraryscreening,theleakyexpressionofHIS3iscontrolledbyadding3-amino-1,2,4-triazole（3-AT）tothemedium.Theconcentrationof3-ATneededtofullysuppressleakyHIS3expressionmustbedeterminedempiricallyforeachDNAtargetelement.pHIS2canbemaintainedinbothyeastandbacteria.Itcontainsanautonomousreplicationsequence（ARS4）andTRP1nutritionalmarkerforreplicationandselectioninyeast（1,2）;itcontainsaColE1originandakanamycinresistancegene（Kanr）forpropagationandselectioninE.coli.ThecentromericsequenceCEN6ensurespropersegregationoftheplasmidduringcelldivisioninyeast（1,2）.UseTousepHIS2inaone-hybridassay,cloneoneormorecopiesofacis-actingDNAtargetsequenceintotheMCS.ThenintroducetheplasmidintocompetentyeastcellsusingthetransformationprotocolintheBDMatchmakerLibraryConstruction&ScreeningKitsUserManual（PT3529-1）.IncontrasttotheoriginalBDMatchmakerOne-HybridSystem,thisreportervectordoesnotneedtobeintegratedintotheyeastgenome.Instead,itismaintainedasanepisomethroughouttheassay.InsertingyourtargetelementmayalterthelevelofbackgroundHIS3expression.Therefore,constructs首ldbetestedforbackground（leaky）HIS3expressionbeforeyoustartaone-hybridanalysis.BackgroundgrowthduetoleakyHIS3expressioniscontrolledbyadding3-ATtotheselectionmedium,asdescribedintheUserManual（PT3529-1）.LocationofFeaturesMultiplecloningsites:141HIS3gene:152811FragmentcontainingtheHIS33'UTR&Terminationsequence:8121446TRP1gene:28553529FragmentcontainingtheColE1E.colioriginofreplication:41654615Kanamycin-resistancegene:56054811CEN6/ARS4sequences:62545737[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
Clontech酵母双杂交系统 pCL1说明书

MATCHMAKERGAL4Two-HybridVectorsHandbookpCL1型号载体名称出品公司载体用途VJC0484pCL1Clontech酵母双杂交系统产品参数:测序引物：CMV-F载体抗性:氨苄青霉素（Ampicillin）载体描述:pCL1isapositivecontrolplasmidthatencodesthefulllength,wild-typeGAL4protein.TheGAL4proteinactivatesreportergenesunderthecontrolofaGAL4-responsiveelement（UASG）.Thus,pCL1isusedasapositivecontrolforthetranscriptionassayinGAL4-basedMATCHMAKERTwo-HybridSystems.ThisvectorisaderivativeofYCp50referencedinFields&Song,1989.pCL1hasnotbeensequenced.质粒图谱:[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
Clontech 酵母双杂交系统 pGBKT7说明书

Clontech酵母双杂交系统pGBKT7，酵母双杂交系统pGBKT7，ClontechpGBKT7pGBKT7产品参数:MammalianSelection：TRP1（HIS3selection）载体抗性:卡那霉素（Kanamycin）说明书:质粒图谱:[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
Clontech AH109说明书

ClontechAH109说明书，AH109说明书，ClontechAH109AH109型号载体名称出品公司载体用途VNC0491AH109Clontech配套酿酒酵母hissectionprovidesdetailedphenotypesoftheyeaststrainsincludedwithMATCHMAKERSystem3andMATCHMAKERGAL4cDNAandGenomicLibraries.Foradditionalinformationonthegrowthandmaintenanceofyeast,seetheYPH,ChapterIII.WealsorecommendGuthrie&Fink’sGuidetoYeastGeneticsandMolecularBiology（1991）andHeslot&Gailardin’sMolecularBiologyandGeneticEngineeringofYeasts（1992）.A.YeastHostStrainsThecompletegenotypesofAH109,Y187,andCG-1945areprovidedinTableII.Allstrainsaregal4andgal80;thispreventsinterferenceofnativeregulatoryproteinswiththeregulatoryelementsinthetwo-hybridsystem.1.UseAH109asthehoststrainifyouplantoscreenanAD/libraryusingHIS3,ADE2,andMEL1.2.System3UsersOnly:UseY187asthehoststrainifyouplantotestforaninteractionbetweentwoknownproteinsusingthelacZreporteronly.Inaddition,useY187asamatingpartnertoverifyproteininteractions.3.LibraryUsersOnly:UseCG-1945asthehoststrainifyouplantoseparateDNA/baitandAD/libraryplasmidsbycycloheximidecounterselection.Alternatively,usepGBKT7toconstructyourbait.ThisDNA-BDvectorcontainsakanamycinresistancemarker;therefore,vectorscanbeseparatedinE.coliwithoutcycloheximidecounterselection.[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
Clontech pTK-hyg （VSC0467）说明书

pTK-hyg型号载体名称出品公司载体用途VSC0467pTK-hygClontech四环素调控系统DescriptionpTK-Hygisaselectionvectorthatconfershygromycinresistanceinmammaliancellsfortheselectionofstablytransformedcells.pTK-Hygisespeciallyusefulforselectionofdouble-stablecelllinesusingtheTet-OnorTet-OffGeneExpressionSystemsbecausetheabsenceofanenhancerelementonpTK-HygpreventstheunwantedactivationofpTRE-andpBI-derivedplasmidsuponcointegrationintothehostcell'sgenome.UsepTK-Hygcanbecotransfectedintothehostcelllinewithanexpressionplasmidthatcontainsageneofinterestusinganystandardtransfectiontechnique.Mostmammaliancelllinesrequire200g/mlofHygromycintoselectforstablytransformedcells.LocationofFeaturesHSVTKpolyAsignals:14731478&14861491（complementary）Hygr（hygromycinresistancegene）:15372574（complementary）PHSVTK（HSVTKpromoter）:25882835（complementary）pUCoriginofreplication:3152379mpr（ampicillinresistancegene;beta-lactamase）:39434803PropagationinE.coliSuitablehoststrains:DH5aandothergeneralpurposestrains.Selectablemarker:plasmidconfersresistancetoampicillin（50g/ml）onE.colihosts.E.colireplicationorigin:pUC质粒图谱:[详细]
2018-09-29 10:03
产品样册
|
毕赤酵母表达系统说明书

毕赤酵母表达系统说明书YoucanputthepowerofP.pastorisintoyourlaboratorywithacompletePichiaExpressionKitorwithindividualPichiaexpressionvectors.ThreePichiaExpressionKitsareavailable,eachofwhichincludesvectors,P.pastorisstrains,reagentsfortransformation,sequencingprimers,media,andacomprehensivemanual（Table3）.Inaddition,thepPICZ,pGAPZ,andpPIC6vectorsareavailableseparately（seeinsertfororderinginformation）.ChoosethekitorvectorthatbestmeetsyourresearchneedsandtakeadvantageoftheprovenstrengthofP.pastoris.Table3Pichiaexpressionkitcomponents.EasySelectPichiaExpressionKitMulti-CopyPichiaExpressionKitOriginalPichiaExpressionKitVectorspPICZA,B,C（20geach）pPICZαA,B,C（20geach）pPIC9K（20g）pPIC3.5K（20g）pAO815（20g）pPIC9（10g）pPIC3.5（10g）pHIL-D2（10g）pHIL-S1（10g）StrainsX-33（Mut+,His+）GS115（Mut+）KM71（MutS）GS115/pPICZ/lacZ（control）GS115（Mut+）KM71（MutS）GS115/β-gal（control）GS115/albumin（control）GS115（Mut+）KM71（MutS）GS115/β-gal（control）GS115/albumin（control）TransformationreagentsPichiaEasyCompKit（120transformations）SpheroplastModule（50transformations）SpheroplastModule（50transformations）SequencingprimersOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorMediaandsupplementsYPbasemedium（2pouches）*YPbaseagar（2pouches）*YeastNitrogenBase（1pouch）Zeocin（250mg）YPbasemedium（2pouches）*YPbaseagar（2pouches）*YeastNitrogenBase（1pouch）YPbasemedium（2pouches）*YPbaseagar（2pouches）*YeastNitrogenBase（1pouch）上海起福生物科技有限公司联系人：杨建辉400电话：4006551678办公电话：021-50724187传真：021-50724961*8006手机：15921799099企业QQ:4006551678网址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦东新区绣川路561号1102室[详细]
2018-09-29 10:02
产品样册
|
酵母双杂交系统的建立与发展

酵母双杂交系统的建立与发展[详细]
2015-04-01 00:00
其它
|
核糖核酸（酵母）

核糖核酸（酵母）[详细]
2024-09-28 21:49
选购指南
|
Northern杂交分析

Northern杂交分析[详细]
2015-11-17 00:00
操作手册
|
SI30H杂交振荡培养箱（分子杂交箱）产品样册

SI30H杂交振荡培养箱（分子杂交箱）产品样册[详细]
2016-10-18 14:41
实验操作
|
酵母质粒小量抽提试剂盒说明书

酵母质粒小量抽提试剂盒说明书[详细]
2014-12-12 00:00
标准
|
酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒使用说明书

酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中酵母过氧化氢酶（CAT）水平。用纯化的酵母过氧化氢酶（CAT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢酶（CAT），再与HRP标记的过氧化氢酶（CAT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶（CAT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中酵母过氧化氢酶（CAT）浓度。酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（16U/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。酵母过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-11-23 10:00
产品样册
|
三轴向加速度计说明书

三轴向加速度计说明书[详细]
2024-09-18 18:07
安装说明
|
系统里面隐藏称重模块三大问题

有很多朋友在使用称重模块的时候都只是看到了称重模块的大概，却没有看到称重模块的本质。当然，这些我们看不见也实属正常，毕竟我们大多数都不是称重模块的专业技术人员，但是称重模块的我们看不见的三大问题又是什么呢？对于我们使用称重模块的朋友又有什么样的影响呢？就用我们的包装秤举例，下面我们一起来看看：一.数据统计及管理无法进行由于采用RS232进行通信，包装袋数在给计算机传输过程中经常失真，特别是在几条线同时工作时，计算机根本无法同时接受和显示数据，更不能进行统计和管理。无法用计算机管理数据，就谈不上称重模块控制系统分析、处理包装超差质量事故，使称重模块控制系统的日常维护以及管理不能正常进行。二.称重模块控制系统包装精度低据2001年至2007年称重模块运行统计，4条包装线存在着同样的特性，即15袋/min的包装速度虽能满足使用要求，但随着使用时间的推延，离生产实际的要求还有差距，包装精度为（40!0.2）kg时的合格率为99.99%.其根本原因在于称重模块控制系统产品较老，芯片运算、存贮速度较慢，很难极ng确控制粗、细加料门的关闭时间。如果粗、细加料门的关闭控制得不好就会出现飞料,而飞料不能准确计算、自动跟踪补偿，从而无法极ng确地进行补差。从质量显示上看，每袋尿素的质量至少有50g的偏差，再加上细加料门在关闭时间无法实现准确关闭，每袋的称重值又是一个模糊值，零点跟踪校秤就无法正常进行，每袋尿素的质量偏差达!100g.近几年来，包装秤全部处于正偏差工作状态，以包装1000t/d尿素计，尿素产量为300kt/a时，损耗尿素为900t/a.三.称重模块控制系统仪表故障率高由于包装秤处容易产生尿素粉尘，对电子元件以及引线接点的腐蚀特别严重；另外，现场仪表控制箱在结构上存在缺陷，密封性不佳，使腐蚀现象加剧。曾多次出现由于接触不良而导致控制模块误动作，且发生此类情况不易迅速找出故障原因，从而影响成品装置的正常生产。同时由于粉尘的原因，导致控制准确度得不到满足，且控制模块中的电子元件容易损坏，而备件数量有限，给仪表维护人员的日常维护带来极大不便。以上就是我们称重模块系统的三个问题的全部内容，读到这里，相信大家在选择称重模块的时候也会适当的想想称重模块时不时适合我用，这些问题对我有影响，我们就可以根据自己的实际情况来选择称重模块！我司专业销售各类：电子吊钩秤，电子地磅称，钢瓶秤，地磅秤，数显测力仪，叉车电子称等产品哦！详情请关注实干。[详细]
2018-10-07 10:04
产品样册
|
岩石三轴测试系统AT-RTS

岩石三轴测试系统AT-RTS[详细]
2019-01-23 00:00
其它
|
核糖核酸钠盐（酵母）

核糖核酸钠盐（酵母）[详细]
2014-09-30 00:00
应用文章
|
转移核糖核酸（酵母）

转移核糖核酸（酵母）[详细]
2024-09-27 23:47
期刊论文
|
分子杂交探针种类

分子杂交探针种类[详细]
2024-10-02 01:51
选购指南
|
高压环境三轴实验系统 ETTS

高压环境三轴实验系统 ETTS[详细]
2019-01-24 00:00
其它
|

该会员其他资料: D12492说明书; CYGNUS F050说明书; HIV P24 ELISA KIT 说明书; research diets D12451说明书; research diets d12450b说明书; omicronbio产品; Smartox-biotech产品; phytotechlab产品; 美天旎macs代理; polysciences产品目录

Clontech pBridge酵母三杂交系统说明书

联系我们

关注我们