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组织蛋白酶K试剂盒说明书
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本文由 北京科瑞美科技有限公司 整理汇编
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组织蛋白酶KCathepsinK试剂盒背景介绍:定量测定人血清或细胞培养上清液中由破骨细胞分泌出的组织蛋白酶K。组织蛋白酶K降解骨胶原基质,是Z丰富的活化和吸收破骨细胞的合成蛋白,也是Z具吸收活性的特异性标志物。蛋白酶K在组织溶解、重建和骨胶原降解中具有重要作用。组织蛋白酶K在不同物种间的高同源性(小鼠86%,大鼠88%,猪97%,兔96%),因此试剂盒也能用于动物模型的研究。临床应用:骨转换研究恶性骨疾病应用于肿瘤学监测骨吸收药物的LX预防糖皮质激素诱导的骨质疏松预防原发性和继发性骨质疏松监测作用于骨骼多个区域的炎症疾病监控ZL如激素替代ZL,双膦酸盐ZL监测风湿性骨关节炎和骨关节炎的ZLLX蛋白酶k与骨关节炎软骨退变关系密切,特别在早期发病中有重要作用参考文献:“CathepsinK,osteoclasticresorption,andosteoporosistherapy”.ZaidiM.etal.;JBoneMinerRes2001Oct;16(10):1747-9“NewinsightsintotheregulationofcathepsinKgeneexpressionbyosteoprotegerinligand”CorisdeoS.etal.;BiochemBiophysResCommun2001Jul13;285(2):335-9“Linkingosteopetrosisandpycnodysostosis:regulationofcathepsinKexpressionbythemicrophthalmiatranscriptionfactorfamily”MotyckovaG.etal.;ProcNatlAcadSciUSA2001May;98(10):5798-803
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组织蛋白酶K试剂盒说明书
- 组织蛋白酶KCathepsinK试剂盒背景介绍:定量测定人血清或细胞培养上清液中由破骨细胞分泌出的组织蛋白酶K。组织蛋白酶K降解骨胶原基质,是Z丰富的活化和吸收破骨细胞的合成蛋白,也是Z具吸收活性的特异性标志物。蛋白酶K在组织溶解、重建和骨胶原降解中具有重要作用。组织蛋白酶K在不同物种间的高同源性(小鼠86%,大鼠88%,猪97%,兔96%),因此试剂盒也能用于动物模型的研究。临床应用:骨转换研究恶性骨疾病应用于肿瘤学监测骨吸收药物的LX预防糖皮质激素诱导的骨质疏松预防原发性和继发性骨质疏松监测作用于骨骼多个区域的炎症疾病监控ZL如激素替代ZL,双膦酸盐ZL监测风湿性骨关节炎和骨关节炎的ZLLX蛋白酶k与骨关节炎软骨退变关系密切,特别在早期发病中有重要作用参考文献:“CathepsinK,osteoclasticresorption,andosteoporosistherapy”.ZaidiM.etal.;JBoneMinerRes2001Oct;16(10):1747-9“NewinsightsintotheregulationofcathepsinKgeneexpressionbyosteoprotegerinligand”CorisdeoS.etal.;BiochemBiophysResCommun2001Jul13;285(2):335-9“Linkingosteopetrosisandpycnodysostosis:regulationofcathepsinKexpressionbythemicrophthalmiatranscriptionfactorfamily”MotyckovaG.etal.;ProcNatlAcadSciUSA2001May;98(10):5798-803[详细]
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2018-10-31 10:00
产品样册
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人组织蛋白酶K(Cathepsin K)ELISA试剂盒说明书
- 人组织蛋白酶K(CathepsinK)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CathepsinK单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CathepsinK与单抗结合,加入生物素化的抗人CathepsinK,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CathepsinK浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CathepsinK浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液、尿液、唾液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清或血浆测定前用标本稀释液至少作1:50稀释(取20ul,加标本稀释液980ul,稀释50倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成4000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入4000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CathepsinK含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CathepsinK检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CathepsinK。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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猴组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒
- 猴组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒[详细]
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2015-10-12 00:00
其它
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大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
- 大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 21:14
课件
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人组织蛋白酶K(cath-K)检测试剂盒
- 人组织蛋白酶K(cath-K)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 01:21
操作手册
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人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
- 人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-16 07:20
报价单
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仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
- 仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-17 12:01
安装说明
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蛋白酶K
- ProteinaseK(蛋白酶K)是一种以丝氨酸为活性ZX的枯草类蛋白酶,具有广泛的底物特异性,特别优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸的C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性,主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。[详细]
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2018-09-04 10:00
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大鼠组织因子试剂盒使用说明书
- 大鼠组织因子联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中组织因子(TF)含量。实验原理大鼠组织因子试剂盒使用说明书应用双抗体夹心法测定标本中大鼠组织因子(TF)水平。用纯化的大鼠组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织因子(TF),再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠组织因子(TF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液120ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液60ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液30ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液15ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算大鼠组织因子试剂盒使用说明书以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
产品样册
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组织因子Elisa试剂盒使用说明书
- 人组织因子(TF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中组织因子(TF)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织因子(TF)水平。用纯化的人组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入组织因子(TF),再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组织因子(TF)的浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:10ng/L-200ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-23 10:31
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蛋白酶K(Proteinase K)
- ProteinaseK(蛋白酶K)是一种以丝氨酸为活性ZX的枯草类蛋白酶,具有广泛的底物特异性,特别优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸的C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性,主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。[详细]
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2018-10-08 10:00
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小鼠脏器组织细胞分离液试剂盒说明书
- 小鼠脏器组织细胞分离液试剂盒说明书[详细]
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2016-02-29 00:00
其它
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人组织因子(TF)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人组织因子(TF)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TF单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TF与单抗结合,加入生物素化的抗人TF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,TF浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TF浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清作1:2稀释(取50ul,加标本稀释液50ul,稀释2倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应TF含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的TF检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人TF。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒说明书
- 组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlAChRab猪乙酰胆碱受体抗体规格:48T/96TACh猪乙酰胆碱规格:48T/96TIGFBP-3猪胰岛素样生长因子结合蛋白3规格:48T/96TIGF-2猪胰岛素样生长因子2规格:48T/96TIGF-1猪胰岛素样生长因子1规格:48T/96TINS猪胰岛素规格:48T/96TOxLDL猪氧化低密度脂蛋白规格:48T/96TPDGF猪血小板衍生生长因子规格:48T/96TPAF猪血小板活化因子规格:48T/96TFDP猪血纤蛋白原降解产物规格:48T/96TFbg猪血纤蛋白原规格:48T/96TTM猪血栓调节蛋白规格:48T/96TNO猪血清一氧化氮规格:48T/96TVWF猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子规格:48T/96TANG-R-Tie2猪血管生成素受体Tie2规格:48T/96T[详细]
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2018-10-09 10:00
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组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书(中文版)
- 组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书(中文版)[详细]
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2014-12-29 00:00
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组织因子(TF)Elisa试剂盒人使用说明书
- 人组织因子(TF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中组织因子(TF)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织因子(TF)水平。用纯化的人组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入组织因子(TF),再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组织因子(TF)的浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:10ng/L-200ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-23 10:31
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人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒说明书
- 人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中组织蛋白抗原(TPA)的活性。上海乔羽生物科技有限公司ELISA试剂盒说明书关键词:ELISA试剂盒说明书、酶联免疫试剂盒、分析检测试剂盒实验原理:人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织多肽抗原(TPA)水平。用纯化的人组织多肽抗原(TPA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织多肽抗原(TPA),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织多肽抗原(TPA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组织多肽抗原(TPA)浓度。【试剂盒组成】人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒[详细]
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2018-11-09 10:00
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动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒产品说明书
- 动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒产品说明书主要用途动物细胞/组织活性线粒体分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的活性线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适合于动物软组织(肝或脑组织)和培养细胞的活性线粒体的制备。其制备物产量高,活性保证,可以被用于线粒体酶活性、细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称同类产品**。技术背景线粒体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的Z常用的手段之一。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升净化液(ReagentC)毫升强化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升产品说明书1份保存方式保存净化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备HANK平衡盐缓冲溶液(12028)或PBS缓冲溶液(12033):用于清理细胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于细胞脱离完全细胞培养液(12052):用于中和胰蛋白酶的细胞培养基15毫升锥形离心管:用于线粒体初步制备物的存放50毫升锥形离心管:用于细胞或组织收集后离心或清洗1.5毫升离心管:用于保存线粒体4℃台式离心机:用于沉淀细胞4℃超速离心机:用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞实验步骤一、动物软组织线粒体分离(组织匀浆法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量(注意:实验前**使动物空腹12至24小时)2.(选择步骤)放进预冷的50毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入适量的(1克组织需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎组织5.放进一个预冷的15毫升锥形离心管6.加入预冷的xx毫升裂解工作液7.涡旋震荡5秒,充分混匀8.即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用研磨棒匀化组织(约80下)(注意:参见注意事项8)9.将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管,10.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g11.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞12.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物14.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g16.(选择步骤)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀18.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里二、动物软组织线粒体分离(化学处理法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量(注意:实验前**使动物空腹12至24小时)2.(选择步骤)放进预冷的50毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入适量的(1克组织需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一个液氮冻存管5.即刻放进液氮罐过夜6.次日从液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎组织(注意:切莫使组织冻融)7.放进一个15毫升锥形离心管8.加入预冷的xx毫升裂解工作液9.涡旋震荡5秒,充分混匀10.在冰槽里孵育2分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒11.加入预冷的xx微升强化液(ReagentD)12.涡旋震荡5秒,充分混匀13.在冰槽里孵育5分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒(注意:参见注意事项9)14.加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混匀15.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g16.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞17.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物19.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g21.(选择步骤)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀23.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里三、动物细胞线粒体分离(细胞匀浆法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞(5X107),直至细胞生长铺满整个培养表面2.分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重复实验步骤2至3一次5.加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个培养平面6.放进37℃培养箱孵育3分种7.手击震动培养瓶,使细胞脱落8.分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液9.全部移入到一个50毫升锥形离心管10.放进台式离心机离心10分钟,速度为200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞13.放进台式离心机离心10分钟,速度为300g14.小心抽去上清液15.加入预冷的xx毫升裂解工作液16.涡旋震荡5秒,充分混匀细胞颗粒群17.即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用研磨棒匀化细胞(约80下)(注意:参见注意事项8)18.将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管19.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g20.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞21.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物23.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g25.(选择步骤)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀27.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里四、动物细胞线粒体分离(化学处理法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞(5X107),直至细胞生长铺满整个培养表面2.分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐溶液或PBS溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面28.小心抽去清洗液3.重复实验步骤2至3一次4.加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个培养平面5.放进37℃培养箱孵育3分种6.手击震动培养瓶,使细胞脱落7.分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液8.全部移入到一个50毫升锥形离心管9.放进台式离心机离心10分钟,速度为200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升预冷的清理液(ReagentA)12.放进台式离心机离心10分钟,速度为300g13.小心抽去上清液14.加入预冷的xx毫升裂解工作液15.涡旋震荡5秒,充分混匀16.在冰槽里孵育2分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒17.加入预冷的xx微升强化液(ReagentD)18.涡旋震荡5秒,充分混匀19.在冰槽里孵育5分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒(注意:参见注意事项9)20.加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混匀21.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g22.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞23.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物25.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g27.(选择步骤)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀29.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里注意事项1.本产品为10次(1克动物组织或5X107细胞)或50次(200毫克动物组织或1X107细胞)操作2.实际操作的动物组织重量或细胞量与试剂使用量按比例调整:例如200毫克动物组织:试剂用量是标准用量的五分之一3.所有操作均须在4℃或以下状态进行4.操作时,须戴手套5.操作时,须无菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建议使用足够的样品量7.建议严格控制操作时间8.通常匀化次数为80下达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数9.通常孵育5分钟达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升裂解物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加孵育时间和涡旋震荡次数10.对于难以裂解的细胞,例如HeLa细胞,采用物理匀浆法是优先推荐的技术处理11.通常5X107细胞或1克动物组织的线粒体含量为50微克以上线粒体蛋白12.如果需要计量线粒体,稀释后数分钟内完成,否则线粒体将分解13.本产品所获得的线粒体纯度和产量Z为理想。通过调整10000g离心速度到3000至8000g,可以提高粗提的线粒体纯化程度,但线粒体产量相应减少14.如果需要获得99%以上纯度的线粒体,使用动物细胞/组织高质纯化线粒体分离试剂盒-10006.315.线粒体正常活性测定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、细胞色素吸收峰谱等16.线粒体内外膜完整测定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和荧光JC染色17.本公司提供线粒体套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、线粒体溶解等18.本公司提供系列线粒体分析试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能长期稳定2.本产品经鉴定分离的线粒体内外膜完整3.本产品经鉴定分离的线粒体维持正常活性4.本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶[详细]
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2018-11-18 10:00
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组织因子(TF)说明书
- 组织因子(TF)说明书人组织因子(TF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中组织因子(TF)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织因子(TF)水平。用纯化的人组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入组织因子(TF),再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组织因子(TF)的浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书组织因子(TF)说明书[详细]
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2018-10-23 10:30
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细胞/组织高尔基体粗提分离试剂盒产品说明书
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2015-08-25 00:00
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