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使用单细胞 -ICP-MS 法定量癌症细胞对金纳米粒子的摄取率
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本文由 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司 整理汇编
2019-03-19 16:11 1516阅读次数
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癌症指的是异常细胞不受控制地生长和扩散的一种疾病。根据美国癌症协会的数据,癌症在美国Z常见的死亡原因中排名第二。目前ZL癌症的方法包括手术、放射疗法、免疫疗法、化学疗法等。尽管这些传统ZL方法可能会提高患者的总体存活率和生活质量,但其还存在一些局限性。例如,在传统癌症化疗中,小分子癌症疗法以非特异性的方式将小分子药物分散至整个人体内。结果是,这些药物不仅杀死了癌细胞,还破坏了机体的健康细胞,给癌症患者带来严重的副作用,因此迫切需要能够针对病变细胞的新疗法。
纳米粒子(NP)在过去的20年里引起了极大的关注,原因在于,其为药物递送提供了具有吸引力的优势,从而解决了传统化疗的局限性。可将纳米粒子设计为同时携带药物和成像探针的模式,以便同时检测和ZL癌症。还可将其设计为专门针对机体病变组织和细胞的模式。很多基于纳米粒子的癌症疗法已获准在临床上使用和 / 或目前正在开发中。与传统小分子药物相比,合理设计的纳米粒子具备以下优势的可行性:(i)延长体内循环时间;(ii)减少非特异性细胞摄取、意外偏离目标和副作用;以及(iii)通过特定癌细胞靶向部分来提高细胞相互作用。
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使用单细胞 -ICP-MS 法定量癌症细胞对金纳米粒子的摄取率
- 癌症指的是异常细胞不受控制地生长和扩散的一种疾病。根据美国癌症协会的数据,癌症在美国Z常见的死亡原因中排名第二。目前ZL癌症的方法包括手术、放射疗法、免疫疗法、化学疗法等。尽管这些传统ZL方法可能会提高患者的总体存活率和生活质量,但其还存在一些局限性。例如,在传统癌症化疗中,小分子癌症疗法以非特异性的方式将小分子药物分散至整个人体内。结果是,这些药物不仅杀死了癌细胞,还破坏了机体的健康细胞,给癌症患者带来严重的副作用,因此迫切需要能够针对病变细胞的新疗法。
纳米粒子(NP)在过去的20年里引起了极大的关注,原因在于,其为药物递送提供了具有吸引力的优势,从而解决了传统化疗的局限性。可将纳米粒子设计为同时携带药物和成像探针的模式,以便同时检测和ZL癌症。还可将其设计为专门针对机体病变组织和细胞的模式。很多基于纳米粒子的癌症疗法已获准在临床上使用和 / 或目前正在开发中。与传统小分子药物相比,合理设计的纳米粒子具备以下优势的可行性:(i)延长体内循环时间;(ii)减少非特异性细胞摄取、意外偏离目标和副作用;以及(iii)通过特定癌细胞靶向部分来提高细胞相互作用。[详细]
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2019-03-19 16:11
应用文章
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单细胞ICP-MS 监测淡水藻类对金纳米颗粒的摄入行为
- 对于人类健康和环境安全来说,监测单细胞对于金属离子和纳米颗粒(NPs)的摄入都是非常重要的。目前,利用ICP-MS对于细胞内金属含量的常规测定方法为:通过离心或过滤将细胞从其天然培养介质中分离出来,再用新鲜介质进行清洗,然后用酸消解后上机检测。采用这种方法可以得到一定数量细胞中金属的总量,而无法获得单个细胞的相关数据,单个细胞内金属的含量只能通过假定所有细胞内含有的金属颗粒或离子浓度相同,通过计算获得。而通过透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)或荧光示踪法的辅助表征,证明利用这种方法获得的单细胞数据并不准确。如果利用上述显微方法对细胞摄入纳米颗粒进行表征,又存在耗时长、人为误差大的缺点。而且,TEM和SEM法只能定性,也容易由于纳米颗粒标示物化学性质不稳定而导致假阳性结果。相比于这些常规方法,全新的基于单颗粒ICP-MS(SP-ICP-MS)的单细胞ICP-MS(SC-ICP-MS)具有可以极ng确地对单个细胞中金属离子或纳米颗粒进行定量的优势,一次性检测的细胞数量也大于显微镜方法。与SP-ICP-MS类似,SC-ICP-MS是基于利用等离子体将单个细胞完全离子化后对离子含量进行测定来获得结果的。SC-ICP-MS的优势在于可以在更短的时间内分析更多的细胞数量;具有快速的数据采集速率,低于100μs的驻留时间保证数据具有更高的精密度。NexIONICP-MS独特的单细胞检测能力可用于研究细胞内部在其自然环境中固有的金属含量和对于金属的摄入行为,从而对生物曝露风险进行研究和评估。本文介绍了利用SC-ICP-MS技术监测单个淡水藻类(Cyptomonasovata)对金离子和纳米颗粒的摄入行为。[详细]
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2018-08-17 10:00
产品样册
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单细胞ICP-MS技术对细胞水平的金属元素定量分析
- 单细胞ICP-MS技术对细胞水平的金属元素定量分析[详细]
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2024-09-17 01:53
应用文章
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金的纳米粒子粒度分析
- 金的纳米粒子粒度分析[详细]
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2024-09-18 06:45
安装说明
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ICP-MS单细胞分析方法介绍
- ICP-MS单颗粒分析技术(SP-ICP-MS)的出现和发展使得不同基体和应用中的金属颗粒的快速检测和分析成为可能,并因此开创了一个全新的研究领域。SP-ICP-MS的特点是可以检测到带正电荷的离子产生的不连续的脉冲,并以微秒记的数据采集速率获得时间分辨信号。这种先进的数据采集能力使得开辟一系列新的研究领域成为可能。本文将SP-ICP-MS应用于SC-ICP-MS,介绍了ICP-MS单细胞分析技术(SC-ICP-MS),该技术可快速分析单个细胞中的金属含量。通过在细胞水平上监测细胞吸收顺铂的能力,我们探究了药物的有效性,加强了对细胞与含金属的物质之间交互作用的了解。SC-ICP-MS可以让用户检测单个细胞中本身含有的金属量以及离子或者纳米颗粒污染物,此方法可以减少实验中使用的细胞数量,并且无需复杂的样品前处理过程。[详细]
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2024-09-29 09:32
产品样册
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AN # 140使用MP-SPR测量自组装金纳米粒子
- AN # 140使用MP-SPR测量自组装金纳米粒子[详细]
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2016-09-06 00:00
期刊论文
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使用SPR显微镜定量抗体与单细胞膜蛋白的结合
- 单克隆抗体(mAb)疗法已成为治疗癌症、自身免疫性疾病、哮喘和许多其他疾病的既定方法。单克隆抗体药物约占所有生物制药产品总销售额的一半,其中超过60%靶向细胞表面的膜蛋白。然而,定量单细胞上的mAb-膜蛋白结合亲和力一直是一项艰巨的任务。传统的SPR通过将纯化的蛋白质固定在传感器表面上来测量蛋白质结合动力学。这种方法对于膜蛋白来说是有问题的,因为它们很难从细胞膜环境中提取,并且很难在脂质环境之外保持其天然构象完好无损。而SPRm 200是一种新的无标记技术,可以测量抗体与细胞膜蛋白的结合,无需从细胞膜中提取蛋白质。它还将SPR与高分辨率光学显微镜相结合,以分离和研究单个细胞。
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2024-09-21 14:06
应用文章
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QCM-D对纳米粒子的研究
- QCM-D对纳米粒子的研究[详细]
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2024-09-24 01:48
其它
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采用ICP-MS对营养补充剂中银纳米粒子单粒子的特性研究
- 使用珀金埃尔默NexION350ICP-MS上的Syngistix纳米应用模块以及超快速数据采集电子器件,对市售的3中营养补充剂中的纳米银颗粒进行了测定。单粒子的ICP-MS能实现分析物的溶解离子和颗粒形式之间的分离和定量。在一次分析中,颗粒成分,浓度,尺寸和尺寸分布,均可直接进行测定。SP-ICP-MS技术的使用已经扩展到其它元素-以及未来的消费产品-再进入视频分析,生物流体和环境中纳米颗粒机遇的研究。[详细]
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2018-08-17 10:00
产品样册
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ICP-MS 系统专用Syngistix 单细胞应用软件模块
- 在评估细胞对药物、环境污染物、营养物质和/或纳米粒子的摄入行为时,检测单细胞中的金属元素可以为了解细胞机理提供一种全新有效的方法。传统的做法是溶解大量的细胞,假定细胞群中的每一个细胞包含等量的金属,从而量化细胞中的金属含量,或者利用光学或电子显微镜为细胞中的金属成分定性。这些方法不仅耗费时间,而且只能表征细胞群中的一小部分细胞。珀金埃尔默公司的技术人员将实际检测数据和数学模拟相结合,开发出了一套ZL的单细胞进样系统和专用软件Syngistix细胞应用软件模块。该应用软件模块是实验室分析细胞金属含量的理想工具,包括分析细胞的金属摄入行为(金属离子或纳米颗粒)以及测量细胞的内在金属含量。这款独特的应用模块可以区分同一种待测元素在细胞外部和细胞内部的含量,并对其进行量化。我们无需进行后续数据处理就可以在单次分析中测定下列信息:每个细胞中金属的含量、细胞群落中的金属含量分布、含金属或纳米颗粒的细胞浓度和每个细胞的纳米颗粒数量。配合NexION系列ICP-MS仪器,Syngistix单细胞应用软件模块是世界上**款单细胞ICP-MS专用分析软件,在速度、功能、自动化和易用性等方面均首屈yi指。[详细]
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2018-08-17 10:00
产品样册
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使用 Agilent 7900 ICP-MS 在 scICP-MS 模式下进行单细胞分析
- 扩展对金属在细胞生物学中的作用的了解是一个新兴的研究领域。许多元素对细胞 健康至关重要,元素不平衡、缺乏或过量可能会破坏自然细胞过程。用于测量细胞 中金属的传统整体性分析方法依赖于样品溶解、提取或消解,然后利用原子光谱进 行分析。这些样品前处理步骤破坏了细胞结构,因此报告的金属浓度结果为数千个 细胞的平均值。 在单细胞 ICP-MS (scICP-MS) 中,样品溶液中包含的完整细胞被雾化,各个细胞悬 浮在气溶胶液滴中。使用与通过 ICP-MS (spICP-MS) 进行单纳米颗粒分析的成熟方 法类似的方法将各个细胞引入等离子体中。[详细]
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2020-05-08 14:19
应用文章
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单颗粒ICP-MS评价地表水中银纳米粒子的归宿
- 过去二十年中,随着工程纳米材料(ENMs)产量和使用量迅速增加,它们向环境中释放带来了潜在危害。因此,研究他们对环境影响至关重要。对环境中工程纳米材料进行合适的生态危害评价和管理,需要对工程纳米材料准确定量暴露和影响1,Z理想方式通过原位分析并给出物理化学特性。然而,由于环境介质中纳米粒子浓度非常低,大多数分析技术并非适合2。Z近出版了关于自然新鲜水和合成复杂水样中金属纳米粒子的持久性、聚合和溶解性的研究3-7。一直以来,颗粒尺寸采用色散光散射(DLS)和透射电子显微镜(TEM)测量颗粒尺寸,而溶解量采用超滤测定。这些常规技术对测定复杂水体中存在低浓度的胶体形态非常有限。另外,单颗粒ICP-MS(SP-ICP-MS)被公认为一种定量和定性低浓度的金属纳米粒子Z有前途的方法8-10。相对目前方法,SP-ICP-MS可快速有效并提供更多信息的技术。它能够测定颗粒尺寸分布、颗粒数量浓度、溶解金属比例等。而且,它能够区分不同元素粒子。SP-ICP-MS原理基于测量一个单粒子产生的信号强度。悬浮纳米粒子必须有效稀释,以确保一次只有一个单颗粒到达等离子体中,然后被原子化和离子化,产生相对高信号强度,在一个脉冲中被检测出。如果在颗粒悬浮物包含相同可溶性的元素,该元素将产生一个连续不变信号,形成均一分布的结果。Duegeldre11-15S次采用理论方法处理了自然金属胶体的信号强度与时间关系记录图,随后Laborda等16,17支持了该方法。本工作使用珀金埃尔默NexION350XICP-MS和纳米应用SyngistixTM模块软件测定和定性环境水体中金属纳米粒子。[详细]
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2018-08-17 10:00
产品样册
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流动合成系统成功用于金纳米粒子的合成
- 流动合成系统成功用于金纳米粒子的合成[详细]
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2024-09-21 00:31
标准
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采用单颗粒ICP-MS评价地表水中银纳米粒子的归宿
- 采用Syngisitx纳米应用模块研究地表水中银纳米颗粒的行为,无需使用任何手工数据处理过程。该技术允许有效选择性测定颗粒尺寸,团聚和一定时间内溶解低浓度范围。SP-ICP-MS可提供环境水体中低浓度的金属纳米颗粒归宿信息的**合适的技术。尽管这项研究只代表在特定情况下河水中纳米银颗粒测定技术的有效性,毫无疑问,也可应用于各种复杂基体中其它类型金属和金属氧化物纳米粒子。[详细]
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2018-08-17 10:00
产品样册
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细胞NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒
- 主要用途细胞NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂是一种旨在使用化学发光分子光泽精受到NADPH氧化酶催化产生的超氧阴离子O2-的还原,然后在其还原过程中释放能量,由此测定样品中特异性氧化还原酶(oxidoreductase)的活性,即采用发光探测仪(Luminometer)测定其相对冷光单位(RLU)的变化,以此进行测算酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞样品(动物或人体)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)的特异活性检测。用于免疫、血液研究、蛋白组学、病理生理学等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景NADPH氧化酶,通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphateoxidase;NADPHoxidase;EC1.6.3.1)或还原型辅酶II氧化酶,是机体防御机制中的重要元素。NADPH氧化酶由6个亚体构成:RhoGTP酶(Rhoguanosinetriphosphatase)和5个phox(吞噬细胞氧化酶;phagocyticoxidase)。其中主要包含细胞膜嵌合蛋白质分子(gp91phox、p22phox、flavocytochromeb558等),以及位在细胞质内的蛋白质分子(p47phox、p67phox、p40phox、Rac1、Rac2等)。其Z特征性的酶活性是超氧化物歧化酶敏感的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶。细胞膜上的NADPH氧化酶被激活,将还原型辅酶Ⅱ(NADPH)转变为氧化型辅酶Ⅱ(NADP),氧分子则获得电子形成超氧阴离子O2-,由O2-又可生成H2O2和OH-。其超氧阴离子产物具有杀死微生物的功能。NADPH氧化酶异常将导致慢性肉芽肿病(ChronicGranulomatousDisease;CGD)。基于底物NADPH,受到NADPH氧化酶的催化作用,产生超氧阴离子O2-,进而超氧阴离子将化学发光分子光泽精(lucigenin)还原,并释放能量,通过发光探测仪(Luminometer;470nm波长)检测,来测定NADPH氧化酶的活性。其反应方式为:[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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使用定量发光试验检测病毒诱导的细胞病变效应
- 使用定量发光试验检测病毒诱导的细胞病变效应[详细]
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2024-09-16 12:23
应用文章
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使用MM301对酵母细胞的低温破碎
- 使用MM301对酵母细胞的低温破碎[详细]
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2024-09-29 00:11
产品样册
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细胞CDK2/CYCLIN A激酶活性荧光共振能量转移法定量
- 主要用途细胞CDK2/CYCLINA激酶活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针EDANS供体和DABCYL受体双重标记的多肽底物,在CDK2/CYCLINEYZ剂的存在下,受到CDK2/CYCLINA的磷酸化后,不能被位点特异性氨基肽酶切离,而发生荧光峰值的降低,即采用荧光共振能量转移法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或完全纯化酶样品中CDK2/CYCLINA激酶的特异活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。技术背景细胞周期素依赖性激酶2(cyclindependentkinase2;CDK2;EC2.7.11.22),又称为细胞分裂周期蛋白1(celldivisioncycle1;CDC1)或p33,属于丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonineproteinkinase)家属成员之一。其与酵母细胞的cdc28和cdc2高度进化保留。细胞周期素依赖性激酶2的催化亚体,与细胞周期素E然后A结合,允许细胞由G1期进入DNA合成期,达到调节细胞生长、DNA复制、细胞分裂等。p21Cip1(CDKN1A)andp27Kip1(CDKN1B)是CDK2激酶的YZ剂。CDK2/CYCLINA激酶的磷酸化目标序列为HHASPRK。基于磷酸化多肽具有抗氨基肽酶切离的功能,通过荧光共振能量转移法(Fluorescenceresonanceenergytransfer;FRET),即传递激发状态的能量由处于较短波长的供体(donor)到覆盖供体波长的受体(acceptor),使得距离依赖性反应的供体的散发光子淬灭(quench),使用2个荧光探针EDANS供体和DABCYL受体作为FRET对,来标记的CDK2多肽底物的两端,在氨基肽酶(aminopeptidase)的作用下,释放出强烈荧光的EDANS;一旦在CDK2/CYCLINEYZ剂二氨基吡唑-1氢4-基偶氮酚【4-(3,5-diamino-1H-pyrazol-4-ylazo)-phenol】的存在下,底物受到CDK2/CYCLINA的磷酸化(由ATP的γ-磷酸根到多肽上单一丝氨酸残基分子上),底物将不能被位点特异性氨基肽酶切离,而无法释放出EDANS,由此根据产物荧光强度(激发波长340nm,散发波长490nm)的降低,来定量测定细胞周期素依赖性激酶2/细胞周期素A的特异活性。CDK2/CYCLINA反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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火试金法的基本原理
- 火试金法的基本原理[详细]
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2024-09-19 23:59
课件
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使用 Agilent 7800 ICP-MS 对强化食品进行常规分析
- 利用 Agilent 7800 ICP-MS 对通过微波消解制得的九种强化食品样品中的 28 种元素进行分析。使用仪器的标准化氦气碰撞模式和自动调谐功能,可简化方法开发。7800 系统的高灵敏度和高达 10 个数量级的分析动态范围使常量矿物元素(如Na、K、Ca、Mg)和痕量元素(包括 Cr、As、Cd、Pb、Hg)能够在同一次分析运行中得到测定。通过分析营养配方食品 SRM 中的 13 种营养元素,并对三种婴儿配方食品样品中的 7 种污染物元素进行加标回收率测试,对该方法的准确度进行评估。在所有情况下均获得了优异的回收率。7800 ICP-MS 在六小时运行过程中表现出优异的稳定性,并超出了ZG标准方法中规定的检测限要求。7800 ICP-MS 方法适用于对食品中的痕量元素和高浓度矿物元素进行常规的多元素筛查,确保实现对营养元素以及污染物的质量控制。
[详细]
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2024-09-27 07:39
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