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胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书
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胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书主要用途胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值,来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要线粒体、细胞浆分离。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一种具有细胞膜通透性,与钙离子结合产生荧光的染料,通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比(散发波长510nm)来极ng确测定细胞浆内钙离子水平。产品内容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介导液(ReagentC)600微升饱和液(ReagentD)2毫升阴性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介导液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器细胞培养箱:用于染色孵育96孔培养板:用于样品操作的容器荧光酶标仪:用于荧光分析(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光染色观察实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪:激发波长340nm和380nm,散发波长510nm测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentB)室温下融化,然后分别移出30微升介导液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个96孔细胞培养板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、Zda对照孔(含细胞)小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里加入100微升饱和液(ReagentD)到Zda对照孔里加入100微升阴性液(ReagentE)到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动酶标板,混匀放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relativefluorescenceunit;RFU)包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、Zda对照孔RFU340nm、Zda对照孔RFU380nm计算样品细胞浆钙离子浓度【(样品RFU340nm/样品RFU380nm)-(空白对照孔RFU340nm/空白对照孔RFU380nm)÷(Zda对照孔RFU340nm/Zda对照孔RFU380nm-样品RFU340nm/样品RFU380nm)】X(空白对照孔RFU380nm/Zda对照孔RFU380nm)X140(纳摩尔;解离常数)三、(共聚焦)或荧光显微镜检测1.准备1个待测的细胞爬片样品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去样品上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)四、冰冻切片检测准备1个待测的冰冻切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖切片样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(组织细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)注意事项本产品为20次(显微镜)或60次(酶标板)操作操作时,须戴手套可以使用荧光分光光度仪检测如果细胞内酯酶缺失,则建议使用微注射(microinjection)技术避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感
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胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书
- 胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书主要用途胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值,来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要线粒体、细胞浆分离。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一种具有细胞膜通透性,与钙离子结合产生荧光的染料,通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比(散发波长510nm)来极ng确测定细胞浆内钙离子水平。产品内容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介导液(ReagentC)600微升饱和液(ReagentD)2毫升阴性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介导液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器细胞培养箱:用于染色孵育96孔培养板:用于样品操作的容器荧光酶标仪:用于荧光分析(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光染色观察实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪:激发波长340nm和380nm,散发波长510nm测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentB)室温下融化,然后分别移出30微升介导液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个96孔细胞培养板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、Zda对照孔(含细胞)小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里加入100微升饱和液(ReagentD)到Zda对照孔里加入100微升阴性液(ReagentE)到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动酶标板,混匀放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relativefluorescenceunit;RFU)包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、Zda对照孔RFU340nm、Zda对照孔RFU380nm计算样品细胞浆钙离子浓度【(样品RFU340nm/样品RFU380nm)-(空白对照孔RFU340nm/空白对照孔RFU380nm)÷(Zda对照孔RFU340nm/Zda对照孔RFU380nm-样品RFU340nm/样品RFU380nm)】X(空白对照孔RFU380nm/Zda对照孔RFU380nm)X140(纳摩尔;解离常数)三、(共聚焦)或荧光显微镜检测1.准备1个待测的细胞爬片样品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去样品上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)四、冰冻切片检测准备1个待测的冰冻切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖切片样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(组织细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)注意事项本产品为20次(显微镜)或60次(酶标板)操作操作时,须戴手套可以使用荧光分光光度仪检测如果细胞内酯酶缺失,则建议使用微注射(microinjection)技术避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书
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2014-12-26 00:00
期刊论文
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细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书
- 细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化,来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要线粒体纯化。Rhod-2-AM,罗丹明123(rhodamine123)的衍生产物,一种与钙离子结合产生荧光,Rhod-2-AM,进入细胞受到酯酶解离,同时其正电荷特性,特异性地聚集在线粒体里,由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下,激发波长550nm,散发波长590nm,来定量测定线粒体的钙浓度。产品内容清理液(ReagentA)10毫升染色液(ReagentB)30微升介导液(ReagentC)600微升饱和液(ReagentD)2毫升阴性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介导液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器细胞培养箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于样品操作的容器荧光酶标仪:用于荧光分析实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪(22℃):激发波长550nm,散发波长590nm测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentB)室温下融化,然后分别移出30微升介导液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个黑色96孔板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、Zda对照孔(含细胞)小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里加入100微升饱和液(ReagentD)到Zda对照孔里加入100微升阴性液(ReagentE)到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动黑色96孔板,混匀放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟,避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relativefluorescenceunit;RFU)计算样品线粒体钙离子浓度【(样品RFU-空白对照孔RFU)÷(Zda对照孔RFU-样品RFU)】X570(纳摩尔;解离常数)注意事项本产品为20次操作操作时,须戴手套避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围可以使用荧光分光光度仪检测本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-19 10:00
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组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书
- 组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化,来测定组织线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织(动物、人体等)内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要线粒体纯化。Rhod-2,罗丹明123(rhodamine123)的衍生产物,一种与钙离子结合产生荧光,同时其正电荷特性,特异性地聚集在线粒体里,由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下,激发波长550nm,散发波长590nm,来定量测定线粒体的钙浓度。产品内容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介导液(ReagentC)600微升饱和液(ReagentD)2毫升阴性液(ReagentE)2毫升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介导液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器细胞培养箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于样品操作的容器荧光酶标仪:用于荧光分析实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪(22℃):激发波长550nm,散发波长590nm准备好纯化的线粒体样品,置于冰槽里融化测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentB)室温下融化,然后分别移出30微升介导液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个黑色96孔板,标记为:线粒体样品孔、空白对照孔(不含线粒体)、Zda对照孔(不含线粒体)移取100微升纯化线粒体样品(100微克)到线粒体样品孔里加入100微升饱和液(ReagentD)到Zda对照孔里加入100微升阴性液(ReagentE)到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动黑色96孔板,混匀室温下(22℃),孵育30分钟,避免光照放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟,避免光照即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relativefluorescenceunit;RFU)计算样品线粒体钙离子浓度【(样品RFU-空白对照孔RFU)÷(Zda对照孔RFU-样品RFU)】X570(纳摩尔;解离常数)=纳摩尔/100微克线粒体注意事项本产品为20次操作操作时,须戴手套避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围可以使用荧光分光光度仪检测本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过内质网钙离子特异性荧光探针Mag-Fluo--AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化,来测定内质网中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织(动物、人体等)内内质网钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中内质网钙离子储存在控制细胞活化、调控信号通路、蛋白分子转录后修饰,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。内质网钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要内质网纯化。Mag-Fluo--AM染料是一种钙离子低亲和性的荧光标记染料,特异性地由内质网捕获,可以检测内质网内的游离钙离子浓度的变化。在荧光分光光度仪下,激发波长490nm,散发波长525nm,来定量测定内质网的钙浓度。[详细]
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2018-11-08 10:00
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人 (Human) 胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2) ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:cPLA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知cPLA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cPLA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cPLA2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400U/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗cPLA2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400U/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200U/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100U/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50U/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25U/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5U/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(U/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的cPLA2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的cPLA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400U/ml4、敏感度:1.0U/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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人胞浆型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒实验结果
- 人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:cPLA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知cPLA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cPLA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cPLA2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400U/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗cPLA2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400U/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200U/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100U/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50U/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25U/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5U/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(U/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的cPLA2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的cPLA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400U/ml4、敏感度:1.0U/ml[详细]
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2018-09-19 10:00
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人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒
- 人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒[详细]
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2024-09-23 22:25
课件
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细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒
- 主要用途细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过内质网钙离子特异性荧光探针Mag-Fluo-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化,来测定内质网中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)内内质网钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中内质网钙离子储存在控制细胞活化、调控信号通路、蛋白分子转录后修饰,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。内质网钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要内质网纯化。Mag-Fluo-AM染料是一种钙离子低亲和性的荧光标记染料,特异性地由内质网捕获,可以检测内质网内的游离钙离子浓度的变化。在荧光分光光度仪下,激发波长490nm,散发波长525nm,来定量测定内质网的钙浓度。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒
- 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 14:56
选购指南
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FLIPR产品应用(3)Fura-2 QBT试剂盒— — 新型均相Fura-2钙流检测实验
- Fura-2 染料一直以来被认为是在细胞成像、GPCR 介导的细胞内钙流、以及离子通道激活等实验中检测钙动员的重要工具。[详细]
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2021-02-22 13:38
应用文章
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大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit
- 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit[详细]
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2015-10-10 00:00
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猪钙离子(Ca2+)ELISA试剂盒使用说明书
- 南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中猪钙离子(Ca2+)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪钙离子(Ca2+)水平。用纯化的猪钙离子(Ca2+)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙离子(Ca2+),再与HRP标记的钙离子(Ca2+)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的钙离子(Ca2+)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪钙离子(Ca2+)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:36umol/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为24umol/ml,16umol/ml,8umol/ml,4umol/ml,2umol/ml)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:0.8umol/ml-30umol/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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钙离子复合电极说明书
- 复合离子电极使用说明书由上海恒磁电子科技有限公司提供,仅供参考地址:上海杨浦区延吉东路390号联系人:郝先生电话:021-35304675手机:1391684770218019187435传真:021-35300952网址:www.hengci1718.com邮箱:www.hengci17@163.com公司QQ:1976289431[详细]
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2018-10-02 10:03
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肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书
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肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。肌浆球蛋白(Myo)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlABAb人抗脑组织抗体规格:48T/96TABAb人抗脑组织抗体规格:48T/96TIFA人抗内因子抗体规格:48T/96TAECA人抗内皮细胞抗体规格:48T/96TAGA人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体规格:48T/96TAGA人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体规格:48T/96TAOAb人抗卵巢抗体规格:48T/96TEHF人抗流行性出血热病毒抗体IgM规格:48T/96TEHF人抗流行性出血热病毒抗体IgM规格:48T/96TEHF人抗流行性出血热病毒抗体IgG规格:48T/96TAPSA人抗磷脂酰丝氨酸抗体规格:48T/96TAPSA人抗磷脂酰丝氨酸抗体规格:48T/96TApl/APA人抗磷脂抗体规格:48T/96TTA人抗磷壁酸抗体规格:48T/96TTA人抗磷壁酸抗体规格:48T/96TALG人抗淋巴细胞球蛋白规格:48T/96TALA人抗淋巴细胞抗体规格:48T/96TASO人抗链球菌溶血素O/抗O规格:48T/96TADH/VP/AVP人抗利尿激素/精氨酸加压素规格:48T/96TSCA人抗类固醇细胞抗体规格:48T/96TRANA人抗类风湿关节炎核抗原抗体规格:48T/96TRANA人抗类风湿关节炎核抗原抗体规格:48T/96Tanti-RV人抗狂犬病毒抗体规格:48T/96Tanti-RV人抗狂犬病毒抗体规格:48T/96TENA-Ab人抗可提取核抗原抗体规格:48T/96TSLA人抗可溶性肝抗原抗体规格:48T/96TAttacin人KJ肽规格:48T/96Tanti-CMVIgM人抗巨细胞病毒抗体IgM规格:48T/96Tanti-CMVIgM人抗巨细胞病毒抗体IgM规格:48T/96Tanti-CMVIgG人抗巨细胞病毒抗体IgG规格:48T/96Tanti-macrophageAb人抗巨噬细胞抗体规格:48T/96TTRACP-5b人抗酒石酸酸性磷酸酶5b规格:48T/96TAsAb人抗精子抗体规格:48T/96TAFA人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体规格:48T/96TAKA人抗角蛋白抗体规格:48T/96TCLA人抗胶原蛋白抗体规格:48T/96TATMA/TMAB人抗甲状腺微粒体抗体规格:48T/96TATGA/TGAB人抗甲状腺球蛋白抗体规格:48T/96TTPO-Ab人抗甲状腺过氧化物酶抗体规格:48T/96Tanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgM抗体规格:48T/96Tanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗体规格:48T/96TEMAIgA人抗肌内膜抗体IgA规格:48T/96TTTN人抗肌联蛋白抗体规格:48T/96TAAA人抗肌动蛋白抗体规格:48T/96TCCP人抗环胍氨酸肽抗体规格:48T/96TRSV人抗呼吸道合胞病毒抗体规格:48T/96TRBC人抗红细胞抗体规格:48T/96TAPF人抗核周因子抗体规格:48T/96TANF人抗核因子抗体规格:48T/96TAnuA-IgG人抗核小体抗体IgG规格:48T/96TARPA/Rib-P人抗核糖体P蛋白抗体规格:48T/96TRNP-Ab人抗核糖核蛋白抗体规格:48T/96TAFA/snoRNP/U3RNP人抗核仁纤维蛋白抗体规格:48T/96TANA人抗核仁抗体规格:48T/96Tgp210人抗核膜糖蛋白210抗体规格:48T/96TANA人抗核抗体规格:48T/96TASA人抗骨骼肌抗体规格:48T/96Tanti-toxIgM人抗弓形体IgM抗体规格:48T/96Tanti-toxIgG人抗弓形体IgG抗体规格:48T/96TAGAA人抗高尔基体抗体规格:48T/96TLMA人抗肝细胞膜抗体规格:48T/96TLC1人抗肝细胞胞质1型抗体规格:48T/96TLSP人抗肝特异性脂蛋白抗体规格:48T/96TLSP人抗肝特异性脂蛋白抗体规格:48T/96TLKM人抗肝肾微粒体抗体规格:48T/96TCAM-ab人抗钙调素特异抗体规格:48T/96TACAST-DⅣ人抗钙蛋白酶抑素抗体规格:48T/96Tanti-PIVIgM人抗副流感病毒IgM抗体规格:48T/96Tanti-RVIgG人抗风疹病毒IgG抗体规格:48T/96TABM-Ab人抗肺泡基底膜抗体规格:48T/96TMSA人抗纺锤体抗体规格:48T/96TPM-Scl/PM-1人抗多发性肌炎硬皮病抗体规格:48T/96Tanti-HDV人抗丁型肝炎病毒抗体规格:48T/96TPR3Ab-IgG人抗蛋白酶3抗体IgG规格:48T/96TssDNA人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体规格:48T/96TAMA人抗单核细胞抗体规格:48T/96TTRAb人抗促甲状腺素受体抗体规格:48T/96TC1q人抗补体1q抗体规格:48T/96Tanti-HCV人抗丙型肝炎病毒抗体规格:48T/96TEBMZ人抗表皮细胞基底膜抗体规格:48T/96Tanti-typhus-Ab人抗斑疹伤寒抗体规格:48T/96TAAA人抗白蛋白抗体规格:48T/96TIFNα-Ab人抗α干扰素抗体规格:48T/96Tα-FodrinIgG/IgA人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA规格:48T/96T人抗SS-B/La抗体ELISAKit,48T/96T人抗SS-B/La抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96T人抗SS-A/Ro抗体ELISAKit,48T/96T人抗SS-A/Ro抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96Tsp100人抗sp100抗体规格:48T/96TSc1-70-Ab人抗Sc1-70抗体规格:48T/96Tanti-Sa-Ab人抗Sa抗体规格:48T/96Tanti-Q-Ab人抗Q热抗体规格:48T/96Tanti-Mi2-Ab人抗Mi2抗体规格:48T/96Tanti-Ku-Ab人抗Ku抗体规格:48T/96T人抗IVIgG抗体ELISAKit,48T/96T人抗IVIgG抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96T人抗IgE受体抗体ELISAKit,48T/96T人抗IgE受体抗体ELISAKit,48T/96T规格:48T/96Tanti-IgA-Ab人抗IgA抗体规格:48T/96TEBV人抗EB病毒抗体规格:48T/96Tanti-DNaseB人抗DNA酶B抗体规格:48T/96TBP180-Ab人抗BP180抗体规格:48T/96TBB-Ab人抗BB抗体规格:48T/96TLPAg人军团菌抗原规格:48T/96TAgrin人聚集蛋白规格:48T/96TAgrin人聚集蛋白规格:48T/96TMIF人巨噬细胞移动YZ因子规格:48T/96TMIP-5人巨噬细胞炎性蛋白5规格:48T/96TMIP-3β/ELC人巨噬细胞炎性蛋白3β规格:48T/96TMIP-3α/CCL20人巨噬细胞炎性蛋白3α规格:48T/96TMIP-2人巨噬细胞炎性蛋白2规格:48T/96TMIP-1β/CCL4人巨噬细胞炎性蛋白1β规格:48T/96TMIP-1α/CCL3人巨噬细胞炎性蛋白1α规格:48T/96TAmAC-1人巨噬细胞替代激活相关化学因子1规格:48T/96TMCF人巨噬细胞趋化因子规格:48T/96TMDC/CCL22人巨噬细胞来源的趋化因子规格:48T/96TM-CSFR人巨噬细胞集落刺激因子受体规格:48T/96TM-CSF人巨噬细胞集落刺激因子规格:48T/96TMAF人巨噬细胞活化因子规格:48T/96TMSP人巨噬细胞刺激蛋白规格:48T/96TArg人精氨酸酶规格:48T/96TAVP人精氨酸加压素规格:48T/96TMT人金属硫蛋白规格:48T/96TSE人金葡菌肠毒素规格:48T/96TADAM8人解整合素样金属蛋白酶8规格:48T/96TUU-Ab人解脲脲原体抗体规格:48T/96TCNTF人睫状神经营养因子规格:48T/96TTB-AbIgG人结核菌杆抗体IgG规格:48T/96THpt/HP人结合珠蛋白/触珠蛋白规格:48T/96TCTGF人结缔组织生长因子规格:48T/96TCTAPⅢ人结缔组织活化肽Ⅲ规格:48T/96TDes人结蛋白规格:48T/96TCCA人结肠癌抗原规格:48T/96TCav-1人窖蛋白Caveolin1规格:48T/96TKGF人角化细胞生长因子规格:48T/96TKAF人角化细胞内分泌因子规格:48T/96TGDNF人胶质细胞系来源的神经营养因子规格:48T/96TCollectin人胶原凝集素规格:48T/96TCollagenaseII人胶原酶II规格:48T/96TCollagenaseI人胶原酶I规格:48T/96THCBⅡ人胶原蛋白Ⅱ规格:48T/96TPYD人胶原吡啶交联规格:48T/96TPCP人胶原C端肽酶规格:48T/96TDAF人降解加速因子规格:48T/96TPCT人降钙素原规格:48T/96TCGRP人降钙素基因相关肽规格:48T/96TCT人降钙素规格:48T/96TBFP人碱性胎儿蛋白规格:48T/96TALP人碱性磷酸酶规格:48T/96TbFGF-9人碱性成纤维细胞生长因子9规格:48T/96TbFGF-6人碱性成纤维细胞生长因子6规格:48T/96TbFGF-4人碱性成纤维细胞生长因子4规格:48T/96TbFGF人碱性成纤维细胞生长因子规格:48T/96TCx人间隙连接蛋白规格:48T/96TALK人间变性淋巴瘤激酶规格:48T/96TTAb人甲状腺素抗体规格:48T/96TT4人甲状腺素规格:48T/96TTG人甲状腺球蛋白规格:48T/96TTAb人甲状腺抗体规格:48T/96TTBG人甲状腺结合球蛋白规格:48T/96TTPO人甲状腺过氧化物酶规格:48T/96TTHAA人甲状腺非肽激素抗体规格:48T/96TTSI人甲状腺刺激免疫球蛋白规格:48T/96TPTHrP人甲状旁腺激素相关蛋白规格:48T/96TPTH人甲状旁腺激素规格:48T/96TAFP人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白规格:48T/96TfMet人甲酰甲硫氨酸规格:48T/96TPGD2-MOX人甲肟前列腺素D2规格:48T/96TMethylase人甲基化酶规格:48T/96TMTX人甲胺喋呤规格:48T/96TPV-IgG人脊髓灰质炎病毒IgG规格:48T/96TCSF人集落刺激因子规格:48T/96TVLDLR人极低密度脂蛋白受体规格:48T/96TKLK8人激肽释放酶8规格:48T/96TKLK6人激肽释放酶6规格:48T/96TKLK11人激肽释放酶11规格:48T/96TKLK10人激肽释放酶10规格:48T/96TKLK1人激肽释放酶1规格:48T/96TCKMB人激动异构酶/细胞分裂素MB规格:48T/96TSDF-1β/CXCL12人基质细胞衍生因子1β规格:48T/96TSDF-1a/CXCL12人基质细胞衍生因子1a规格:48T/96TST3人基质裂解素规格:48T/96TST2人基质裂解素规格:48T/96TST1人基质裂解素规格:48T/96TMAT人基质裂解蛋白规格:48T/96TTIMP-1人基质金属蛋白酶组织YZ因子1规格:48T/96TTIMP-4人基质金属蛋白酶YZ因子4规格:48T/96TTIMP-3人基质金属蛋白酶YZ因子3规格:48T/96TTIMP-2人基质金属蛋白酶YZ因子2规格:48T/96TTIMP-1人基质金属蛋白酶YZ因子1规格:48T/96TMMP-9/GelatinaseB人基质金属蛋白酶9/明胶酶B规格:48T/96TMMP-8人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶规格:48T/96TMMP-7人基质金属蛋白酶7规格:48T/96T[详细]
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2018-10-09 10:00
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