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人胞浆型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒实验结果
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人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:cPLA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知cPLA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cPLA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cPLA2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400U/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗cPLA2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400U/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200U/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100U/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50U/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25U/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5U/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(U/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的cPLA2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的cPLA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400U/ml4、敏感度:1.0U/ml
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人胞浆型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒实验结果
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人 (Human) 胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2) ELISA 检测试剂盒说明书
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人 (Human) 血栓素A2ELISA 检测试剂盒
- 试验原理:TXA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TXA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TXA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TXA2的浓度呈比例关系。人(Human)血栓素A2(TXA2)ELISA检测试剂盒试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TXA2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型人(Human)血栓素A2(TXA2)ELISA检测试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人(Human)血栓素A2(TXA2)ELISA检测试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TXA2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TXA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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人血栓素A2ELISA 检测试剂盒说明书
- 试验原理:TXA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TXA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TXA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TXA2的浓度呈比例关系。人血栓素A2ELISA检测试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TXA2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人血栓素A2ELISA检测试剂盒说明书试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。人血栓素A2ELISA检测试剂盒说明书操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A8.08.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4.04.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2.02.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1.01.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E0.50.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F0.250.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TXA2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TXA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒实验使用说明书
- 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒实验使用说明书
【测试种属】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭elisa试剂盒等种属
【储存方式】:2-8℃
【检测目的】用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【用途】科研实验专用,不用于临床诊断。[详细]
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2024-03-07 14:28
应用文章
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人磷脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒
- 人磷脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒[详细]
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2024-09-27 23:57
其它
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胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书
- 胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书主要用途胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值,来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞(动物、人体等)或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexedcalcium)和离子钙(ionizedcalcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内,钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道,维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求,以及需要线粒体、细胞浆分离。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一种具有细胞膜通透性,与钙离子结合产生荧光的染料,通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比(散发波长510nm)来极ng确测定细胞浆内钙离子水平。产品内容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介导液(ReagentC)600微升饱和液(ReagentD)2毫升阴性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介导液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器细胞培养箱:用于染色孵育96孔培养板:用于样品操作的容器荧光酶标仪:用于荧光分析(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光染色观察实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪:激发波长340nm和380nm,散发波长510nm测定开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentB)室温下融化,然后分别移出30微升介导液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个96孔细胞培养板,标记为:细胞样品孔、空白对照孔(不含细胞)、Zda对照孔(含细胞)小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里加入100微升饱和液(ReagentD)到Zda对照孔里加入100微升阴性液(ReagentE)到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动酶标板,混匀放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relativefluorescenceunit;RFU)包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、Zda对照孔RFU340nm、Zda对照孔RFU380nm计算样品细胞浆钙离子浓度【(样品RFU340nm/样品RFU380nm)-(空白对照孔RFU340nm/空白对照孔RFU380nm)÷(Zda对照孔RFU340nm/Zda对照孔RFU380nm-样品RFU340nm/样品RFU380nm)】X(空白对照孔RFU380nm/Zda对照孔RFU380nm)X140(纳摩尔;解离常数)三、(共聚焦)或荧光显微镜检测1.准备1个待测的细胞爬片样品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去样品上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)四、冰冻切片检测准备1个待测的冰冻切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆盖切片样品表面小心移去样品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液,混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上,覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鲜的清理液(ReagentA)放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液(ReagentA)盖上盖玻片即刻在(共聚焦)荧光显微镜下进行观察:激发波长340至400nm,散发波长510nm(组织细胞浆钙离子呈现蓝色荧光)注意事项本产品为20次(显微镜)或60次(酶标板)操作操作时,须戴手套可以使用荧光分光光度仪检测如果细胞内酯酶缺失,则建议使用微注射(microinjection)技术避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒
- 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒[详细]
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2015-03-17 00:00
标准
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人分泌型磷脂酶A2试剂盒资料下载
- 人分泌型磷脂酶A2试剂盒资料下载[详细]
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2015-05-12 00:00
其它
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胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书
- 胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书[详细]
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2014-12-26 00:00
期刊论文
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人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)检测试剂盒
- 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 01:15
课件
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人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒
- 人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
课件
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大鼠磷脂酶C(PLC)检测试剂盒
- 大鼠磷脂酶C(PLC)检测试剂盒[详细]
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2014-09-29 00:00
其它
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脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒
- 脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒[详细]
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2015-07-17 00:00
期刊论文
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大鼠磷脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒
- 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒[详细]
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2024-09-20 13:34
选购指南
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人(Human)脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA 检测试剂盒说明书[详细]
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2015-01-22 00:00
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