非洲猪瘟病毒检测整体方案

非洲猪瘟病毒检测整体方案

本文由无锡百泰克生物技术有限公司整理汇编

2019-03-04 13:44 3507阅读次数

扫码分享

文档仅可预览首页内容，请下载后查看全文信息！

收藏评价举报

立即下载

非洲猪的实验室诊断主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）、PCR、荧光定量PCR、DNA原位杂交、免疫组织化学检测、病毒分离、动物接种等多种方法，另外，一些新的方法正在被开发和评估，比如检测抗原的侧流实验，胶体金免疫层析试纸条，检测抗体的免疫化学发光实验等等。但到目前为止，生产实际中，应用较多的还是PCR、荧光定量PCR、ELISA等常用方法。

参与评论

登录后参与评论

全部评论(0条)

更多资料

非洲猪瘟病毒检测整体方案

非洲猪的实验室诊断主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）、PCR、荧光定量PCR、DNA原位杂交、免疫组织化学检测、病毒分离、动物接种等多种方法，另外，一些新的方法正在被开发和评估，比如检测抗原的侧流实验，胶体金免疫层析试纸条，检测抗体的免疫化学发光实验等等。但到目前为止，生产实际中，应用较多的还是PCR、荧光定量PCR、ELISA等常用方法。[详细]
2019-03-04 13:44
应用文章
|
非洲猪瘟检测仪操作说明

非洲猪瘟检测仪操作说明[详细]
2024-09-29 05:53
实验操作
|
防冻液整体检测方案

防冻液整体检测方案[详细]
2024-09-16 03:00
产品样册
|
非洲猪瘟（ASF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

96T使用目的：本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中非洲猪瘟（ASF）表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中非洲猪瘟（ASF）表达。用纯化的非洲猪瘟（ASF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中非洲猪瘟（ASF）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的非洲猪瘟（ASF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中非洲猪瘟（ASF）的存在与否。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值（CUTOFF）者为非洲猪瘟（ASF）阴性阳性判定：样品OD值≥临界值（CUTOFF）者为非洲猪瘟（ASF）阳性。注意事项1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物请避光保存。6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月__[详细]
2018-10-03 10:00
产品样册
|
非洲猪瘟抗体（ASF Ab）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

非洲猪瘟抗体（ASF Ab）酶联免疫分析试剂盒使用说明书[详细]
2015-04-03 00:00
应用文章
|
猪瘟病毒抗原ELISA试剂盒实验方法

猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）酶联免疫分析试剂盒仅供研究使用实验原理采用双抗体夹心法测定血清或血浆中猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）。用纯化的猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中瘟病毒抗原（CSFV-Ag）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的瘟病毒抗原（CSFV-Ag）k抗体结合，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）的存在与否。实验注意事项1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。5．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm6．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月注：以上信息仅供参考，具体参考步骤以随货说明书为准。上海华壹生物科技有限公司ShanghaiHuaYiBioTechnologyCo.,Ltd网址：http://www.huayi-bio.com电话：021-24209195,13661674336[详细]
2018-11-15 10:00
产品样册
|
猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T7pg/ml-200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中猪瘟病毒（CSFV）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪瘟病毒（CSFV）水平。用纯化的猪瘟病毒（CSFV）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入猪瘟病毒（CSFV），再与HRP标记的猪瘟病毒（CSFV）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪瘟病毒（CSFV）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪瘟病毒（CSFV）浓度。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-09-14 10:00
产品样册
|
猪瘟抗体（CSF-Ab）ELISA检测试剂盒说明书

猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪瘟抗体（CSF-Ab）表达。用纯化的猪瘟抗原包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中猪瘟抗体（CSF-Ab）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的猪瘟抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪瘟抗体（CSF-Ab）的存在与否。猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值（CUTOFF）者为猪瘟抗体（CSF-Ab）阴性阳性判定：样品OD值≥临界值（CUTOFF）者为猪瘟抗体（CSF-Ab）阳性[详细]
2019-01-02 10:00
产品样册
|
PET饮料瓶整体密封性能的监测方案

饮料目前多以使用塑料材质的瓶体形式进行灌装，而瓶体自身及瓶口的密封性对饮料保质期及整体质量至关重要。本文利用 Labthink 兰光 MFY-01 密封试验仪测试饮料 PET 瓶整体密封性能，并介绍了试验的基本过程及试验设备的适用范围、试验过程等内容，帮助食品企业有效解决产品泄露等问题。[详细]
2024-09-16 12:37
应用文章
|
猪瘟抗体ELISA试剂盒

猪瘟抗体ELISA试剂盒[详细]
2015-06-08 00:00
标准
|
赛默飞检测多环芳烃的整体解决方案以及方法包介绍

方法包是赛默飞世尔科技色谱质谱部应用部门针对客户需求提出的简易仪器使用流程，方法包内所涉及的化合物均为常见的能在GC/MS上检测的化合物，如农药残留、多环芳烃、多氯联苯、多溴联苯和多溴联苯醚、邻苯二甲酸酯等。方法包的作用就是能使客户更快更简便得使用仪器，尽快上手。方法包包括进样方法、数据处理方法（TraceFinder方法文件夹）、相关应用文章、相关标准、色谱柱信息、前处理方法、数据文件等，客户可以直接调用进样方法和数据处理方法完成化合物的定性定量分析。由于TSQ8000Evo采用T-SRM进样方法而不是分时间段的扫描方法，原来的进样的方法可以直接调用，即使保留时间会有微小的偏差，也不会影响Z终的结果。另外，TraceFinder软件自带的数据库可以直接编辑数据处理方法，数据库里包括化合物的名称、离子对、碰撞能量、定量离子、定性离子、CAS号等信息。同时，TraceFinder软件可以根据数据处理方法自动关联生成TSQ8000Evo的方法文件。这样应用TraceFinder就可以直接生成数据处理方法和部分进样方法。整个过程都是自动化的，几乎不需要操作者手动输入任何操作信息。有需要请下载，谢谢。[详细]
2018-08-10 10:58
产品样册
|
速冻水饺塑料包装整体密封性能的监控方案

速冻水饺塑料包装整体密封性能的监控方案[详细]
2015-09-25 00:00
实验操作
|
肉松软塑包装整体密封性的监测方案

肉松软塑包装整体密封性的监测方案[详细]
2024-09-28 00:47
安装说明
|
2015 年版《ZG药典》Zxin方法与应用方案 — 安捷伦一体化整体方案

本文集针对 2015 年版《ZG药典》新增现代技术应用方法与检测手段、增修订通则与指导原则、针对中药、化药、生物制品、YY包材及辅料四部药典的安全性与有效性控制项目的大幅提升，分别列举了安捷伦相对应的系统解决方案，供广大制药与药检系统用户参考。 [详细]
2015-11-11 00:00
期刊论文
|
猪瘟抗体(IgG)ELISA试剂盒

猪瘟抗体(IgG)ELISA试剂盒[详细]
2015-06-09 00:00
课件
|
整体电极

整体电极[详细]
2024-09-23 02:31
产品样册
|
包装袋整体密封性能的检测方法

包装袋广泛应用于食品包装以及药品包装的各个领域，以其包装成本经济、易于加工、易于控制、易于生产等优势而成为了日前市场上极为普遍的一种包装形式，包装袋的密封性能、封口强度是包装袋质量的重要指标，其关乎着包装内容物的产品质量、保质期，同时也是产品流通环节的必要保障，本文将围绕包装袋的检测方法，对检测操作及要求进行较为详细的描述。[详细]
2018-07-05 15:00
应用文章
|

该会员其他资料: 自测阳性居家隔离，如何防止气溶胶传染家人; 病毒采样管的科技含量; 非洲猪瘟病毒检测整体方案

非洲猪瘟病毒检测整体方案

联系我们

关注我们