猪瘟病毒抗原ELISA试剂盒实验方法

本文由 上海华壹生物科技有限公司 整理汇编

2018-11-15 10:00 1004阅读次数

收藏 评价 举报

• 分享

立即下载

参与评论

评论

登录后参与评论

登录或新用户注册

• 微信登录
• 密码登录
• 短信登录

请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号

微信扫码，手机电脑联动

注册登录即表示同意《仪器网服务条款》和《隐私协议》

账  号：

密  码：

图片码： 看不清？
换一张？

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

手机号：

图片码： 看不清？
换一张？

短信码： 获取短信码

手机和邮箱号注册新账号>> 忘记密码？

更多资料

• 猪瘟病毒抗原ELISA试剂盒实验方法

  猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）酶联免疫分析试剂盒仅供研究使用实验原理采用双抗体夹心法测定血清或血浆中猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）。用纯化的猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中瘟病毒抗原（CSFV-Ag）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的瘟病毒抗原（CSFV-Ag）k抗体结合，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪瘟病毒抗原（CSFV-Ag）的存在与否。实验注意事项1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。5．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm6．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月注：以上信息仅供参考，具体参考步骤以随货说明书为准。上海华壹生物科技有限公司ShanghaiHuaYiBioTechnologyCo.,Ltd网址：http://www.huayi-bio.com电话：021-24209195,13661674336[详细]

  2018-11-15 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人EB病毒抗原elisa试剂盒使用方法

  本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中EB病毒抗原（EBV）表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人EB病毒抗原（EBV）表达。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中EB病毒抗原（EBV）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人EB病毒抗原（EBV）的存在与否。[详细]

  2018-10-08 10:01

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪瘟抗体ELISA试剂盒

  猪瘟抗体ELISA试剂盒[详细]

  2015-06-08 00:00

  标准

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪传染性胃肠炎病毒抗原（TGEV-Ag）ELISA试剂盒

  猪传染性胃肠炎病毒抗原（TGEV-Ag）ELISA试剂盒[详细]

  2015-03-26 00:00

  操作手册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒

  人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 01:15

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T7pg/ml-200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中猪瘟病毒（CSFV）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪瘟病毒（CSFV）水平。用纯化的猪瘟病毒（CSFV）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入猪瘟病毒（CSFV），再与HRP标记的猪瘟病毒（CSFV）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪瘟病毒（CSFV）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪瘟病毒（CSFV）浓度。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。猪瘟病毒（CSFV）酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-14 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪瘟抗体(IgG)ELISA试剂盒

  猪瘟抗体(IgG)ELISA试剂盒[详细]

  2015-06-09 00:00

  课件

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 非洲猪瘟病毒检测整体方案

  非洲猪的实验室诊断主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）、PCR、荧光定量PCR、DNA原位杂交、免疫组织化学检测、病毒分离、动物接种等多种方法，另外，一些新的方法正在被开发和评估，比如检测抗原的侧流实验，胶体金免疫层析试纸条，检测抗体的免疫化学发光实验等等。但到目前为止，生产实际中，应用较多的还是PCR、荧光定量PCR、ELISA等常用方法。[详细]

  2019-03-04 13:44

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人EB病毒衣壳抗原IgA试剂盒（ELISA）说明书

  人EB病毒衣壳抗原IgA（EB.VCAIgA）试剂盒（ELISA）使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人EB病毒衣壳抗原IgA（EB.VCAIgA）的含量。l有效期：6个月l保存条件：2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人EB病毒衣壳抗原IgA（EB.VCAIgA）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人EB病毒衣壳抗原IgA（EB.VCAIgA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样本处理及要求1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响Z后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7.建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注：1.标准品浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0ng/mL2.经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围：0.25ng/mL8ng/mL。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料：问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器，极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本，使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本，重复实验[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠乙型肝炎e抗原elisa试剂盒实验原理

  实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙型肝炎e抗原(HBeAg)，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙型肝炎e抗原(HBeAg)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160IU/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-10-08 10:01

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪瘟抗体（CSF-Ab）ELISA试剂盒说明书

  猪瘟抗体（CSF-Ab）ELISA试剂盒说明书[详细]

  2015-05-22 00:00

  标准

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 鸡脑脊髓炎病毒elisa试剂盒实验原理

  使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中脑脊髓炎病毒（AEV）表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡脑脊髓炎病毒（AEV）表达。用纯化的鸡脑脊髓炎病毒（AEV）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中脑脊髓炎病毒（AEV）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的脑脊髓炎病毒（AEV）抗体结合，形成抗体-抗原-抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中鸡脑脊髓炎病毒（AEV）的存在与否。[详细]

  2018-10-01 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 犬瘟热病毒抗体（CDVAb）ELISA试剂盒实验说明书

  犬瘟热病毒抗体(CDVAb)ELISA试剂盒实验说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中犬瘟热病毒抗体(CDVAb)表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中瘟热病毒抗体(CDVAb)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，与CUTOFF值相比较，从而判定标本中犬瘟热病毒抗体(CDVAb)的存在与否。犬瘟热病毒抗体(CDVAb)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。犬瘟热病毒抗体(CDVAb)ELISA试剂盒操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50l。然后在待测样品孔先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值(CUTOFF)者为瘟热病毒抗体(CDVAb)阴性阳性判定：样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为瘟热病毒抗体(CDVAb)阳性。注意事项1．操作严格按照犬瘟热病毒抗体(CDVAb)ELISA试剂盒说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物请避光保存。6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 犬瘟热病毒抗原（CDV-AG）ELISA检测试剂盒全国代测

  检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被瘟热病毒（CDV）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘟热病毒抗原（CDV-AG）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。[详细]

  2018-09-03 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人诺如病毒抗原ELISA检测试剂盒的说明书

  人诺如病毒抗原ELISA检测试剂盒NoV-Ag试剂盒是夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知NoV-Ag浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将NoV-Ag和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中NoV-Ag的浓度呈比例关系。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人诺如病毒抗原ELISA检测试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与人其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。人诺如病毒抗原ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的NoV-Ag标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的NoV-Ag含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-8.0IU/ml4、敏感度：0.01IU/ml[详细]

  2018-11-04 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒

  人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-29 09:33

  标准

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• Elisa试剂盒抗原对整个实验的操作影响

  在Elisa实验过程中，关键步骤的操作要领需要熟练掌握。在实验的影响因素中，使用仪器要求、试验的重复性、样品的稀释等，在后面的技术内容中，上海恒远生物公司会为大家逐一介绍。今天我们来看一看，论Elisa试剂盒抗原对整个实验的操作影响：Elisa中，包被于固相载体表面的抗原或抗体的来源和制备方法对试验结果都有影响。包被所用的抗原必须是可溶性的，而且要求是优质和稳定的制剂，纯度和免疫原性要高。如果不纯，由于抗原中所含杂质就会竞争固相载体上的有限位置，降低敏感性和特异性。此外还应考虑到制备包被抗原不应破坏其免疫学活性。经试验证明，适用于其他血清学试验的抗原并非均适合用于Elisa法。因此，对某一疾病的诊断，必须通过实践，才能选出适用的优质抗原。对大多数传染病和寄生虫病的血清学诊断中所用的抗原并非要求十分严格，一般能用于补体结合试验的可溶性抗原均可用于Elisa，例如超声波抗原、冻融抗原、细菌的外膜抗原、脂多糖(LPS)、细菌的外毒素以及用表面活性剂(如SDS)所提取的抗原等，在作Elisa时，必须要有1-2种试剂、要求纯化，但用表面活性剂提取的抗原在包被前必须透析除去表面活性剂，否则就不易吸附到固相载体上去。此外，对某些抗原必须进行提纯，如病毒的组织培养和鸡胚培养物以及病毒接种动物的脏器等，它们当中存在着许多非抗原的蛋白质，必须设法除去，常用梯度超速离心或亲和层析法提纯，不经提纯是不能使用的。在用特异性抗体包被固相载体时也要提纯。用抗原或抗体蛋白包被固相载体时选择的浓度要适当。如浓度太高，则低效价抗体可能测不出来，或包被过量形成多层抗原吸附，故在操作过程中可能脱落从而降低敏感性和可重复性。用Z适稀释度抗原，包被固相载体不仅经济，而且可以克服前带现象。那么用多大浓度抗原进行包被Z为合适呢？可通过棋盘滴定法进行测定，但用单项滴定法更为简便，其方法是将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加酶结合物进行反应，经孵育洗涤后，加底物溶液显色，终止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为Z适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。抗原包被固相载体除浓度外，对时间、温度、PH均有关系。温度高(如37℃、45℃、或56℃)，包被时间可缩短，温度低可延长包被时间。但为了方便起见，通常采用4℃包被过一夜，可使抗原吸附得更加完全且均匀。在用聚苯乙烯或聚乙烯微量反应板或塑料管作固相载体时，在碱性条件下(如0.1mol/L、PH9.6碳酸盐缓冲液稀释抗原)4℃包被过一夜较为合适。但在某些试验中，如用LPS或毒素蛋白包被时，用PH7.2-7.4PBS稀释才是满意的。包被特异蛋白质的浓度为1-10ug/ml，而对某些病原微生物抗原以5-20ug/ml较为合适，但均应通过滴定。血清、血浆或其他体液，均可作为Elisa试验样品(标本)。但应注意分离血清时，血液要求放置室温中凝固收缩，不宜置冰箱(4℃)中凝固，否则会使大部分IgM和少量IgG丧失活性。关于人血清在保存过程中抗体的稳定性报导尚不多。但一般认为作Elisa血清**要新鲜，若要贮藏，必须少量分装保存于低温冰箱，并防止反复冻融。血浆可用肝素毛细管法采血，而血清可用滤纸片法采血。我公司Elisa试剂盒仅供科研使用。产品质量过硬，价格优惠，欢迎广大客户电询我司业务员。[详细]

  2018-11-16 10:02

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA试剂盒实验原理

  人类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA试剂盒实验原理本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-08-07 17:21

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒实验原理

  小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒[详细]

  2023-09-07 10:50

  应用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 猪瘟抗体（CSF-Ab）ELISA检测试剂盒说明书

  猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪瘟抗体（CSF-Ab）表达。用纯化的猪瘟抗原包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中猪瘟抗体（CSF-Ab）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的猪瘟抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪瘟抗体（CSF-Ab）的存在与否。猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。猪瘟抗体(CSF-Ab)ELISA检测试剂盒计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值（CUTOFF）者为猪瘟抗体（CSF-Ab）阴性阳性判定：样品OD值≥临界值（CUTOFF）者为猪瘟抗体（CSF-Ab）阳性[详细]

  2019-01-02 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  •