肺炎支原体致病性与免疫性

本文由 上海盈公生物技术有限公司 整理汇编

2018-09-27 10:00 1752阅读次数

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• 肺炎支原体致病性与免疫性

  肺炎支原体致病性与免疫性（一）致病性1、感染途径肺炎支原体主要引起呼吸道外源性感染，由口、鼻分泌物经空气传播。传染源为病人或带菌者。儿童和青少年为易感人群，但现在发现在成人中亦非少见，一年四季均可发病，但多发牛在夏末秋初。2、致病物质有以下几种：①黏附因子PI蛋白：能吸附于宿主呼吸道黏膜细胞受体神经氨酸酶上，继而在局部增殖，获取宿主细胞膜固醇等脂类，导致宿主细胞的损伤；②荚膜：具有抗吞噬作用，亦有毒性；③毒性代谢产物：如神经毒素、核酸酶、过氧化氢和超氧阴离子等引起宿主黏膜上皮细胞的病理性损害，出现肿胀、坏死和脱落，微纤毛运动减弱或停止。3、所致疾病为支原体肺炎，此病的病理变化以间质性肺炎为特征，故又称原发性非典型肺炎。潜伏期23周，起病缓慢，约1/3病例无症状。呼吸道感染有咽炎和支气管炎，少数累及肺。发病初有乏力、头痛、咽痛、发冷、发热、肌肉酸痛、食欲减退、恶心、呕吐等，头痛显著。发热高低不一，可高达39℃。23d后出现明显的呼吸道症状，如阵发性刺激性咳嗽，咳少量黏痰或黏液脓性痰，有时痰中带血。发热可持续23周。热度恢复正常后尚可遗有咳嗽，伴胸骨下疼痛。支原体肺炎临床症状轻重不一，婴幼儿病情较重，发病急，病程长，以呼吸困难为主，主要症状一般在10d后减轻。但由于局部炎症导致的咳嗽持续时间较长，常引起支气管壁肥厚。有些儿童合并其他系统病变，如循环系统、血液系统、泌尿系统和消化系统等。X线改变可有：①肺门阴影增浓；②支气管肺炎改变；③间质性肺炎改变；④均一的实变影像。支原体肺炎以115岁人群发病率较高，其中婴幼儿发病率占25%69%，病情严重。肺炎支原体引起的呼吸道感染每隔46年将有一次较大规模的流行，严重患者可死亡。（二）免疫性机体感染肺炎支原体后，血清中可检出多种抗支原体抗体，只有呼吸道slgA对再感染有一定防御作用，但仍可再感染。病人血清中还可诱发一种非特异冷凝集素，它可能是支原体作用于红细胞I型血型抗原，使其变性后产生的自身抗体，是某些病人由支原体感染引起的一种自身免疫现象。肺炎支原体感染者冷凝集素的阳性率为50%以上，常用于辅助诊断。[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 巨细胞病毒的致病性与免疫性介绍

  巨细胞病毒（Cytomegaoviyns，CMV）是一种疱疹病毒组DNA病毒。分布广泛，其他动物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系统，神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。巨细胞病毒（CytomegalovirusCMV）亦称细胞包涵体病毒，由于感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名。巨细胞病毒在人群中感染非常广泛，我国成人感染率达95%以上，通常呈隐性感染，多数感染者无临床症状，但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。病毒可侵入肺、肝、肾、唾液腺、乳腺其他腺体，以及多核白细胞和淋巴细胞，可长期或间隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。通常口腔，生殖道，胎盘，输血或器官移植等多途径传播。（一）先天性感染：妊娠母体CMV感染可通过胎盘侵袭胎儿引起先天性感染，少数造成早产、流产、死产或生后死亡。患儿可发生黄疸，肝脾肿大，血小板减少性紫斑及溶血性贫血。存活儿童常遗留必性智力低下，神经肌肉运动障碍，耳聋和脉络视网膜炎等。（二）围产期感染：产妇泌尿道和宫颈排出CMV，则分娩时婴儿经产道可被感染，多数和症状轻微或无临床症状的亚临床床感染，有的有轻微呼吸道障碍或肝功能损伤。（三）儿童及成人感染：通过吸乳、接吻、性接触、输血等感染、通常为亚临床型，有的也能导致嗜异性抗体阴性单核细胞增多症。由于妊娠，接受免疫YZZL，器官移植，肿瘤等因素激活潜伏在单核细胞、淋巴细胞中病毒，引起单核细胞增多症、肝炎、间质性肺炎、视网膜炎、脑炎等。（四）细胞转化和可能致癌作用：经紫外线灭活的CMV可转化啮齿类动物胚胎纤椎母细胞。在某些肿瘤如宫颈癌、结肠癌、前列腺癌、Kaposis肉瘤中CMVDNA检出率高，CMV抗体滴度亦高于正常人，在上述肿瘤建立的细胞株中还发现病毒颗粒，提示CMV与其疱疹病毒一样，具有潜在致癌的可能性。巨细胞病毒的免疫性：机体的细胞免疫功能对CMV感染的发生和发展起重要作用，细胞免疫缺陷者，可导致严重的和长期的CMV感染，并使机体的细胞免疫进一步受到YZ，如杀伤性T细胞活力下降，NK细胞功能减低等。机体原发感染CMV后能产生特异性抗体和杀伤性T淋巴细胞，激活NM细胞。抗体有限CMV复制能力，对相同毒株再感染有一定抵抗力，但不能抵抗内源性潜伏病毒的活化，及CMV其他不同毒株的外源性感染。而通过特异性杀性T淋巴细胞和抗体依赖细胞毒性细胞能发挥Zda的抗病毒作用。[详细]

  2024-09-28 07:01

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• 肺炎支原体IgG ELISA试剂盒说明书

  一.【产品名称】通用名称：肺炎支原体抗体IgGELISA试剂盒英文名称：MPIgGELISAKit二.MPELISA试剂盒【包装规格】96人份/盒三.MPELISA试剂盒【预期用途】MP试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA)，用于半定量测定人血清中肺炎支原体特异性IgG抗体。试剂盒用于肺炎支原体感染的辅助诊断，还可通过确定配对血清（2-4周分离）中IgG抗体升高来诊断现症感染。仅用于体外诊断。肺炎支原体是一种普遍的社区获得性肺炎，通常的表示特征是逐进的头痛发作、发烧、不舒服和Zda的特征是干咳。肺炎支原体在所有的年龄群都很普遍，然而，Z普遍的是在二十岁以下尤其是在四岁以下的儿童。已有报道指出由支原体引起的肺炎占所有的肺炎的近30%。肺炎支原体同样与非呼吸道疾病有关，如脑膜炎、脑炎、炎、感觉神经听力受损和急性脑干综合病症。由于发病普遍，在所有肺炎的病例中都应该考虑肺炎支原体，但是由于不同的疾病也有相同的病症，所以将血清学检测作为附加的诊断工具是必要的。ELISA技术是灵敏的、特异的，并且能区分测定特定的IgG、IgA和IgM抗体。[详细]

  2018-10-31 10:00

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• 肺炎支原体IgM ELISA试剂盒说明书

  一.【产品名称】通用名称：肺炎支原体抗体IgMELISA试剂盒英文名称：MPIgMELISAKit二.MPIgM试剂盒【包装规格】96人份/盒三.MPIgM试剂盒【预期用途】MP试剂盒采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)，用于半定量检测人血清中肺炎支原体特异性IgM抗体。本试剂盒通过确定IgM抗体来早期诊断现症感染。仅用于体外诊断。肺炎支原体是一种普遍的社区获得性肺炎，通常的表示特征是逐进的头痛发作、发烧、不舒服和Zda的特征是干咳。肺炎支原体在所有的年龄群都很普遍，然而，Z普遍的是在二十岁以下尤其是在四岁以下的儿童。已有报道指出由支原体引起的肺炎占所有的肺炎的近30%。肺炎支原体同样与非呼吸道疾病有关，如脑膜炎、脑炎、炎、感觉神经听力受损和急性脑干综合症。由于发病普遍，在所有肺炎的病例中都应该考虑肺炎支原体，但是由于不同的疾病也有相同的病症，所以将血清学检测作为附加的诊断工具是必要的。ELISA技术是灵敏的、特异的，并且能区分测定特定的IgG、IgA和IgM抗体。肺炎支原体特异性IgM抗体在疾病发作初期即升高，1至4周内达到Z高峰，然后在几个月之内衰退到非显著水平（诊断上）。由于IgM抗体早出现和相对较短的半衰期，因此允许可在急性感染期采用单个血清样本诊断。年轻患者与成年患者相比往往有较高的IgM水平。IgG水平比IgM水平升高较慢，但维持异常水平的时间较长，因此分开至少两周检测样本会有显著意义的，能在即使缺乏IgM的情况下指示现症感染或者再次感染。[详细]

  2018-10-31 10:00

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• 肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）

  肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）[详细]

  2024-09-15 03:23

  选购指南

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• 食物中毒多由致病性微生物污染食品引起

  食物中毒多由致病性微生物污染食品引起[详细]

  2013-11-18 00:00

  课件

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• 适用于进出境禽鸟及其产品高致病性

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  2020-04-26 17:54

  标准

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• 人肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒

  人肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  操作手册

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• 猪肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒

  猪肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒[详细]

  2015-09-21 00:00

  标准

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• 人肺炎支原体IgG（MP-IgG）酶联免疫分析

  人肺炎支原体IgG（MP-IgG）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T2.0ng/L-48ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肺炎支原体IgG（MP-IgG）含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎支原体IgG（MP-IgG）水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入肺炎支原体IgG（MP-IgG），再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标-抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体IgG（MP-IgG）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎支原体IgG（MP-IgG）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（96ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 应用SPR-测量系统检测植物致病性病毒

  应用SPR-测量系统检测植物致病性病毒[详细]

  2011-05-22 00:00

  实验操作

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• 猪肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA检测试剂盒

  猪肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-08-21 00:00

  其它

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• 人肺炎支原体抗体IgM （MP-IgM）酶联免疫分析

  人肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T1.5ng/L-40ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM）含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM）水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM），再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标-抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎支原体抗体IgM（MP-IgM）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5.0ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月__[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 人肺炎支原体抗体酶联免疫试剂盒检测方法

  人肺炎支原体抗体(MP-Ab)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书实验目的：用于测定人血清，血浆及相关液体样本中肺炎支原体抗体(MP-Ab)水平。实验原理：采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人肺炎支原体抗体(MP-Ab)。用纯化的人肺炎支原体抗体(MP-Ab)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中肺炎支原体抗体(MP-Ab)相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的肺炎支原体抗体(MP-Ab)抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人肺炎支原体抗体(MP-Ab)的存在与否。试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存[详细]

  2018-11-15 10:00

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• 本公司肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书

  【产品名称】肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】24人份/盒48人份/盒【预期用途】用于检测试验血清中的肺炎支原体抗体（IgG/IgM）【检验原理】用肺炎支原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎支原体抗体。【主要组成成份】反应板24份或48份试剂Ⅰ1瓶0.02mol/LPH7.4PBS试剂Ⅱ1瓶胶体金标记物【储存条件及有效期】产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期24个月。【样本要求】血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过一周。高脂血症血清不能使用。【检验方法】滴入二滴试剂Ⅰ于反应板ZY孔中，待完全渗入；滴入100l血清于反应板孔中，待完全渗入；滴加三滴试剂Ⅱ于反应板孔中，待完全渗入；渗入三滴试剂Ⅰ于反应板孔中，待完全渗入。【结果解释】阳性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端出现红色圆斑,为肺炎支原体抗体阳性；阴性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端不出现红色圆斑,为肺炎支原体抗体阴性。失效:反应板孔中C端不出现红色圆斑，或C端、T端均不出现红色圆斑，为试剂盒失效。【检验方法的局限性】本试剂试验仅用于检测肺炎支原体抗体而非直接检测肺炎支原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份肺炎支原体感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。此时，可能显示阴性结果。试验结果可疑时，应用培养基进行培养确诊。【产品性能指标】灵敏度：阳性血清效价比为1：16。批内精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%，反应斑点颜色深浅程度应接近。批间精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%。【注意事项】本产品仅用于体外检测用。试验一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。试剂盒从冰箱取出时，应使试剂恢复至室温。[详细]

  2024-09-29 00:12

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• 应用SPR 技术测量自身免疫性神经病的抗体水平

  应用SPR 技术测量自身免疫性神经病的抗体水平[详细]

  2005-04-05 00:00

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• 有关人肺炎支原体抗体（MP-Ab）ELISA试剂盒使用方法

  实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肺炎支原体抗体（MP-Ab）水平。用纯化的人肺炎支原体抗体（MP-Ab）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加肺炎支原体抗体（MP-Ab），再与HRP标记的肺炎支原体抗体（MP-Ab）抗体结合，人肺炎支原体抗体（MP-Ab）Elisa试剂盒形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体抗体（MP-Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎支原体抗体（MP-Ab）浓度。人肺炎支原体抗体ELISA试剂盒注意事项1．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。4．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。8．本试剂不同批号组分不得混用。我公司具有良好的市场信誉，专业的销售和技术服务团队，致力提供优质、价位合理的科研产品，全面提升科研试剂的质量，人肺炎支原体抗体（MP-Ab）ELISA试剂盒将有利于更好地保障科研结果，并且有利于完善我国体外诊断试剂行业的产业化链条。试剂盒性能：极ng确、高灵敏度，上海樊克生物，您的满意，是我们Zda的动力。[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 人肺炎支原体IgM（MP-IgM）ELISA试剂盒使用说明书

  本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中肺炎支原体IgM抗体（MP-IgM）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎支原体IgM抗体（MP-IgM）水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入肺炎支原体IgM抗体（MP-IgM），再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体IgM抗体（MP-IgM）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎支原体IgM抗体（MP-IgM）含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：72pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为48pg/ml,32pg/ml,16pg/ml,8pg/ml,4pg/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1.8pg/ml-70pg/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 特价销售人肺炎支原体抗体IgMELISA检测试剂盒说明书

  本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：MP-IgM试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知MP-IgM浓度的标准品、人肺炎支原体抗体IgMELISA检测试剂盒未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将MP-IgM和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中MP-IgM的浓度呈比例关系。自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，人肺炎支原体抗体IgMELISA检测试剂盒以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的MP-IgM标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的MP-IgM含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-40IU/L4、敏感度：0.1IU/LC6227-25gChlorhexidinediacetatesalthydrate醋酸洗必泰[56-95-1]25gCB0290-50g2-Chloroacetamide2-氯乙酰胺[79-07-2]50gC2026-500ml2-Chloroaniline2-氯苯胺人肺炎支原体抗体IgMELISA检测试剂盒[95-51-2]500mlC2033-100ml3-Chloroaniline间氯苯胺[108-42-9]100mlC1825-250g4-Chloroaniline对氯苯胺[106-47-8]250gC2578-100g2-Chlorobenzaldehyde2-氯苯甲醛[89-98-5]100gC6834-100g3-Chlorobenzaldehyde3-氯苯甲醛[587-04-2]100gCB0292-250mgChlorogenicacid绿原酸[327-97-9]250mgC4031-500gChlorobenzene氯化苯[108-90-7]500gC2576-100g2-Chlorobenzoicacid2-氯苯甲酸[118-91-2]100gC6833-25g3-Chlorobenzoicacid3-氯苯甲酸[535-80-8]25g[详细]

  2018-09-27 10:00

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