小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒

本文由 上海信裕生物科技有限公司 整理汇编

2015-08-05 00:00 262阅读次数

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• 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒

  小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)检测试剂盒[详细]

  2015-08-05 00:00

  专利

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• 人可溶性CD105(sCD105)检测试剂盒

  人可溶性CD105(sCD105)检测试剂盒[详细]

  2014-09-29 00:00

  报价单

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• 大鼠可溶性CD105(sCD105)检测试剂盒

  大鼠可溶性CD105(sCD105)检测试剂盒[详细]

  2014-09-29 00:00

  期刊论文

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• 人 （Human） 可溶性Endoglin （sENG） ELISA 检测试剂盒

  人（Human）可溶性Endoglin（sENG）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用试验原理：sENG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知sENG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将sENG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中sENG的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：160ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素标记的抗sENG抗体1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。人可溶性EndoglinELISA检测试剂盒2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。人可溶性EndoglinELISA检测试剂盒8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：160ng/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。80ng/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液40ng/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液20ng/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液10ng/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0ng/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。人可溶性EndoglinELISA检测试剂盒2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（ng/ml）A160160样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的sENG标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的sENG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-160ng/ml人可溶性EndoglinELISA检测试剂盒4、敏感度：1.0ng/ml[详细]

  2018-09-28 10:00

  产品样册

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• 小鼠ENG/sCD105elisa试剂盒生产

  产品质量好，灵敏度高，价格实惠，免费技术代测，欢迎来电咨询订购：小鼠ENG/sCD105elisa试剂盒生产髓样细胞白血病-1抗体鸡白介素18(IL-18)ELISA试剂盒Anti-βcatenin/β-cats人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)ELISA试剂盒大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒Anti-GB2人STAT3蛋白YZ分子(PIAS3)ELISA试剂盒Anti-AnkyrinG/ANK-3/ankyrin3Elisa试剂盒质量稳定，操作简便，充分发挥了elisa方法学的优点,已广泛应用在各大院校的免疫学检验的各领域中。1、elisa规格：96孔/48孔2、货期：库存现货。3、产品订购以订货当日Zxin价格为准。4、Elisa试剂盒技术服务要求：专业，规范，GX。5、种属多，产品质量好，灵敏度高，免费技术代测。6、人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、鸡、马、猴、羊、猪、牛、各类植物等种属标本。小鼠ENG/sCD105elisa试剂盒生产1.库存均有现货。2.产品订购以订货当日Zxin价格为准。3.所有产品为确保质量，出库均复检。小鼠ENG/sCD105elisa试剂盒生产elisa实验方法操作标准，用于elisa测定的临床标本Z为常用的是血清(浆)，有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性原体的抗原和抗体、肿liu标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和ZL药物等。对用于激素和ZL药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素(lh)和促卵泡激素(fsh)均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显。[详细]

  2018-10-23 10:30

  产品样册

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• 人可溶性Endoglin（sEndoglin）ELISA试剂盒说明书

  人可溶性Endoglin（sEndoglin）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人sEndoglin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的sEndoglin与单抗结合，加入生物素化的抗人sEndoglin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，sEndoglin浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中sEndoglin浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：200ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入2ml蒸馏水混匀，配成100ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入100ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sEndoglin含量即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的sEndoglin检测浓度小于0.1ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人sEndoglin。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

  产品样册

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• 人内皮糖蛋白(ENG/CD105)检测试剂盒

  人内皮糖蛋白(ENG/CD105)检测试剂盒[详细]

  2014-09-29 00:00

  操作手册

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• 小鼠可溶性瘦素受体(sLR)检测试剂盒

  小鼠可溶性瘦素受体(sLR)检测试剂盒[详细]

  2015-07-31 00:00

  期刊论文

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• 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA试剂盒

  小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-29 13:07

  课件

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• 小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)检测试剂盒

  小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)检测试剂盒[详细]

  2024-09-18 19:05

  安装说明

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• 小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒

  小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  选购指南

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• 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体(TNFsR-)ELISA试剂盒

  小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体(TNFsR-)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  应用文章

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• 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体(TNFsR-)ELISA试剂盒

  小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体(TNFsR-)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  其它

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• 小鼠可溶性血管内皮（sVEGFR-1）ELISA试剂盒

  小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)水平。用纯化的小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)，再与HRP标记的可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：4500ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为3000ng/L,2000ng/L,1000ng/L,500ng/L,250ng/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：120ng/L-4000ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒

  小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 14:00

  课件

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• 小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒

  小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 10:10

  标准

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• 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基检测试剂盒说明

  小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒说明书该试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）为基础，可用于检测血液,细胞、组织内的特异性CD40抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的CD40一抗与相应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特异一抗生物素化二抗HRP-SA复合物，显微镜下观察成像。小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒所含试剂：试剂A通透液：0.1%Triton-X10010mL（选用）试剂B封闭缓冲液（封闭用）20mL试剂C（原装进口分装）已稀释的即用型CD40一抗（2.5ml）试剂D（原装进口分装）生物素化羊抗兔IgG1支（浓度1.5mg/mL，稀释比为1:300~1:500）50μL+抗体稀释液20ml试剂EHRP-SA复合物1支（浓度1μM，稀释比1:50~1:200）100μL试剂FDAB显色液5ml用户自备试剂：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羟基氨基甲烷1.21g氯化钠7.6g加蒸馏水800mL，浓盐酸调pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%体积比）2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）10mMpH6.0柠檬酸缓冲液檬酸0.38g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水900mL，浓盐酸调pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修复液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸馏水700mL，用10mMNaOH调pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.缓冲甘油封固剂10mL4.Tween205mL石蜡包埋组织切片免疫染色实验步骤（建议方案）：石蜡包埋组织切片3~4μm厚度1.烤片：将待做切片置于切片架上，于60℃恒温烤箱中至少烤1hr；2.脱蜡：切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片经下行酒精水化，无水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修复：根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗涤（2×2min）（具体修法见附1）*注：有些抗原勿需修复，直接进入第5步封闭。5.封闭：滴加试剂B，37℃湿盒孵育30min；6.加一抗：滴加用试剂C（即用型一抗），37℃湿盒孵育2hr7.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min）；8.封闭：滴加试剂B，37℃湿盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂D），37℃湿盒中孵育30min；10.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min）；11.封闭：滴加试剂Tween20，37℃湿盒孵育封闭20min；12.加HRP-SA：滴加用试剂C稀释的试剂E（1：50~200，终浓度5~20nM），37℃湿盒中孵育30min；13.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min），TBS洗涤（2×5min）；14.显色：应用DAB溶液（试剂F）显色；15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；16.封片：待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；17.观察成像：显微镜下观察成像。原特异一抗生物素化二抗HRP-SA复合物，显微镜下观察成像。小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒注意事项：1.修复后缓冲液须自然冷却，自来水冲洗后方能把切片取出，骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。2.缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到，用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。3.若试剂为微量浓缩液，用前应低速离心，将内盖和管壁附着的溶液离到底部。4.封片前一定要换用TBS充分洗涤，以便洗去组织上残留的Tween20，否则会影响结果观察。5.如须复染细胞核，则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。附1：抗原修法常用抗原修复液：柠檬酸缓冲液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修复液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修复法酶消化修复切片脱蜡水化处理，TBS冲洗，在组织上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS冲洗即可。二、微波抗原修复法微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档或继续微波10~15min，取出微波盒冷却至室温后，自来水冲洗，取出切片。因不同微波炉微波处理时间存在差异，须自行调整。三、直接高压抗原修复法取修复液于不锈钢高压锅中加热至沸腾，将组织切片置于耐高温切片架上，修复液沸腾后放入切片架，盖上锅盖，待喷气后计时1.5~2.5min即可脱离热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。四、隔水式高压抗原修复法不锈钢高压锅中加自来水加热至沸腾，微波盒中加入修复液于微波炉中加热至沸腾，将切片放入微波盒中，再将微波盒放入高压锅中盖上锅盖，待喷气后计时4~8min即可关闭热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。[详细]

  2018-10-09 10:00

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• 小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒

  小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

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• 小鼠可溶性CD36分子（sCD36）ELISA试剂盒说明书

  小鼠可溶性CD36分子（sCD36）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sCD36单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的sCD36与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠sCD36，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，sCD36浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中sCD36浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：1000ng/ml1瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：设标准管7管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第六管中吸出300ul弃去。第七管为空白对照。加上原液管总共八管。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sCD36含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的sCD36检测浓度小于10ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的小鼠sCD36。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 小鼠可溶性血管内皮生长（sVEGFR-2）ELISA试剂盒

  小鼠可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)水平。用纯化的小鼠可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)，再与HRP标记的可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR-2)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：3600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为2400ng/L,1600ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：100ng/L-3200ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-29 05:33

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