有机磷和氨基甲酸脂类酶联免疫分析（ELISA）

本文由 上海铭博生物科技有限公司 整理汇编

2018-11-08 10:00 899阅读次数

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• 有机磷和氨基甲酸脂类酶联免疫分析（ELISA）

  1使用目的：本试剂盒用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中有机磷和氨基甲酸脂类残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有有机磷和氨基甲酸脂类偶联抗原，加入有机磷和氨基甲酸脂类标准品或样品，游离有机磷和氨基甲酸脂类与微孔条上预包被的有机磷和氨基甲酸脂类偶联抗原互相竞争抗有机磷和氨基甲酸脂类抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中有机磷和氨基甲酸脂类含量成反比，通过标准曲线计算样品中有机磷和氨基甲酸脂类的含量。3试剂盒组成3.1预包被的有机磷和氨基甲酸脂类偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2有机磷和氨基甲酸脂类标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。3.3抗有机磷和氨基甲酸脂类抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 蔬菜和水果中有机磷有机氯拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农

  蔬菜和水果中有机磷有机氯拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农[详细]

  2011-04-09 00:00

  产品样册

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• TZ87-616检测果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类的含量

  TZ87-616检测果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类的含量TZ87-616农残留快速检测仪是对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类的含量进行快速准确的检测。该类仪器主要针对各级政府进行监督、管理、执法、保障部门以及蔬菜检测ZX、农贸市场、超市、环保、蔬菜种植基地、餐饮等单位对果蔬中农残留的测定。在一定条件下，有机磷（乐果、蝇毒磷等）和氨基甲酸酯（抗蚜威、速灭威、残杀威、叶蝉散、异丙威等）类药对胆碱酯酶正常功能有YZ作用，其YZ率与药的浓度呈正相关。TZ87-616农残留快速检测仪技术参数仪器参考JB／T9324-1999可见分光光度计专业标准开发生产。完备的数据库功能（实时显示，存储、分析、导出、上传、打印、处理检测数据），采用可靠队列和安全通道技术采用认证和加密手段，保证了数据的交互和传输安全。检测依据国家标准、行业标准，能够对内置的食品检测相关标准进行升级。金属外壳，结实耐用。通道数：两排通道，每排8个通道，共16个通道；波长示值误差：±3nm。波长重复性：≤5nm。透射比示值误差：±1.0%。杂散光：≤0.5%（360nm）。漂移：≤0.5%/30min（500nm）。YZ率检测范围：01**%。吸光度范围：0.000~4.000ABS。波长范围：412nm。灵敏度：0.0001Abs。数据储存100,000条。光源：进口光源系统。可以根据自身需要选择内置进口滤光片，保证纯净稳定度。样品检测时间：≤3分钟。比色皿：10×10标准样品池。波长校准：自动校准。专用光学探测器，快速感应光强变化，暗电流极小。显示：5.7寸大屏液晶显示。检测完成有蜂鸣提示。接口：带USB接口，可进行双向数据传输。内置微型热敏打印机。[详细]

  2018-10-07 10:00

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• GBT5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测标准

  本标准规定了由酶YZ法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。 本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。 原理： 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有YZ作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 [详细]

  2024-09-11 18:03

  标准

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• NY-T 448-2001 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法

  本标准规定了甲胺磷等有机磷和克百威等氨基甲酸醋类农药在蔬菜中的残毒快速检测方法。本标准适用于叶菜类（除韭菜）、果菜类、豆菜类、瓜菜类、根菜类（除胡萝卜、菱白等）中甲胺磷、氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、久效磷、倍硫磷、杀扑磷、敌敌畏、克百威、涕灭威、灭多威、抗蚜威、丁硫克百威、甲蔡威、丙硫克百威、速灭威、残杀威、异丙威等的农药残毒快速检测。欢迎索取详细资料！164267[详细]

  2018-09-26 10:00

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• GBT5009.199-2003 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

  本标准规定了由酶YZ法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测方法。本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。欢迎索取详细资料！164267[详细]

  2018-09-26 10:00

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• NYT761-2004蔬菜和水果中有机磷有机氯拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留

  NYT761-2004蔬菜和水果中有机磷有机氯拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测[详细]

  2018-11-13 15:46

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• GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

  本标准规定了由酶YZ法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。 本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。 [详细]

  2024-09-10 22:34

  标准

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• NY 761-2004-T 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留

  NY 761-2004-T 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留[详细]

  2012-08-01 00:00

  其它

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• 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定

  蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[详细]

  2024-09-14 19:13

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• 蔬菜中有机磷有机氯拟除虫菊酯氨基甲酸酯类等农药多

  蔬菜中有机磷有机氯拟除虫菊酯氨基甲酸酯类等农药多[详细]

  2024-09-18 02:54

  操作手册

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• 脂联素酶联免疫分析

  兔子脂联素（ADP）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定兔子血清，血浆及相关液体样本中脂联素（ADP）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子脂联素（ADP）水平。用纯化的兔子脂联素（ADP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂联素（ADP），再与HRP标记的脂联素（ADP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂联素（ADP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔子脂联素（ADP）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：135μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为90μg/L，60μg/L，30μg/L，15μg/L，7.5μg/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：3μg/L-100μg/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-10-23 10:31

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• 大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）酶联免疫分析（ELISA）

  大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中c-Jun氨基末端激酶（JNK）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）水平。用纯化的大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入c-Jun氨基末端激酶（JNK），再与HRP标记的c-Jun氨基末端激酶（JNK）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的c-Jun氨基末端激酶（JNK）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：22.5ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为15ng/ml，10ng/ml，5ng/ml，2.5ng/ml，1.25ng/ml）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批间应分别小于9%和15%检测范围：0.6ng/ml-20ng/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月www.biokanu.com[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 蔬菜和水果中的氨基甲酸酯类农残检测

  蔬菜和水果中的氨基甲酸酯类农残检测[详细]

  2015-01-07 00:00

  专利

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• 蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药测定

  蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药测定[详细]

  2024-09-20 13:34

  应用文章

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• 蔬菜和水果中的氨基甲酸酯类农残检测

  恒信仪器 蔬菜和水果中的氨基甲酸酯类农残检测[详细]

  2024-09-21 08:30

  应用文章

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• 动物性食品中青霉素类四环素类和氨基苷类多残留分析方

  动物性食品中青霉素类四环素类和氨基苷类多残留分析方[详细]

  2016-05-16 00:00

  期刊论文

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• NYT 761-2008 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定

  NYT761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[详细]

  2018-09-17 10:00

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• MA472_食品中的氨基甲酸酯类农药分析

  MA472_食品中的氨基甲酸酯类农药分析[详细]

  2016-07-21 00:00

  课件

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• 猪脂多糖 （LPS）酶联免疫分析

  猪ELISA试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪脂多糖(LPS)水平。用纯化的猪脂多糖(LPS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂多糖(LPS)，再与HRP标记的脂多糖(LPS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂多糖(LPS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪脂多糖(LPS)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（480g/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240g/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液120g/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液60g/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液30g/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液15g/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。猪ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。猪ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-27 10:00

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