FH-H132-人椎间盘终板软骨细胞说明书

本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理汇编

2024-05-30 09:33 74阅读次数

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  人软骨寡聚基质蛋白（COMP）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人COMP单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的COMP与单抗结合，加入生物素化的抗人COMP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，COMP浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中COMP浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：10000ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。血清、血浆作1：2稀释（取100ul，加标本稀释液100ul,稀释2倍）。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成10000ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10000ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应COMP含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的COMP检测浓度小于8ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人COMP。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10.6％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 人软骨糖蛋白3（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒说明书

  人软骨糖蛋白3(YKL-40)酶联免疫分析试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人软骨糖蛋白39（YKL-40）水平。用纯化的人软骨糖蛋白39（YKL-40）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入软骨糖蛋白39（YKL-40），再与HRP标记的软骨糖蛋白39（YKL-40）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的软骨糖蛋白39（YKL-40）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人软骨糖蛋白39（YKL-40）浓度。人软骨糖蛋白3(YKL-40)酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（640pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人软骨糖蛋白3(YKL-40)酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320pg/ml5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液160pg/ml4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液80pg/ml3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液40pg/ml2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液20pg/ml1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。人软骨糖蛋白3(YKL-40)酶联免疫分析试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照人软骨糖蛋白3(YKL-40)酶联免疫分析试剂盒说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• 人软骨糖蛋白39（HC gp-39）ELISA试剂盒说明书

  1.试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。2.加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，**个孔与Z后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括标准品及所有样品）**控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。3.孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。4.洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响Z后的酶标仪读数。5.试剂配制：DetectionA及DetectionB在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请极ng确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl），以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。6.反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。7.底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请Z后乘以稀释倍数。洗板方法1.手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。2.自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curveexpert1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。代检测服务购买本公司目录任何一种检测试剂盒，都可提供代检测服务，您只需将需要检测的动物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey,Pig……）种类和检测指标（介素类、因子类）及标本数量（48T/96T）通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品一周内将检测报告交到客户手中！◇注意事项：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。◇液体类标本标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。◇血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。◇血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％（v/v）抗凝剂（0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2）混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。◇尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。◇细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。◇组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶YZ剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。[详细]

  2024-09-28 07:05

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• 人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人软骨糖蛋白39（YKL-40）水平。用纯化的人软骨糖蛋白39（YKL-40）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入软骨糖蛋白39（YKL-40），再与HRP标记的软骨糖蛋白39（YKL-40）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的软骨糖蛋白39（YKL-40）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人软骨糖蛋白39（YKL-40）浓度。人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（640pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320pg/ml5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液160pg/ml4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液80pg/ml3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液40pg/ml2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液20pg/ml1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照人软骨糖蛋白39（YKL-40）酶联免疫分析试剂盒说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• 人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)检测试剂盒

  人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)检测试剂盒[详细]

  2024-09-15 01:00

  其它

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• 人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒

  人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-23 21:59

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• 人细胞角蛋白片段试剂盒说明书

  人细胞角蛋白片段试剂盒说明书[详细]

  2016-02-24 00:00

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• 人（human）细胞色素C 说明书

  人（human）细胞色素C本试剂仅供研究使用标本：血清一、试剂组成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶标偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、标准品Standard　5x1.0ml4、呈色剂A、SubstrateA6.0ml5、呈色剂B、SubstrateB6.0ml6、终止液StopSolution6.0ml7、浓缩洗涤液（1：20）RinsingBuffer60.0ml8、5倍样品稀释液dilution15.0m二、注意事项此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。保存于2-8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟三、操作步骤每孔分别加入已稀释的样品、标准品各100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体，用应用洗涤液进行洗涤，每次停留30秒，在纸上拍干。重复操作5次。每孔加入酶标偶合液100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体，用应用洗涤液进行洗涤，每次停留30秒，在纸上拍干。重复操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒温箱反应15分钟。8．每孔加终止液50ul，于450nm波长读O.D.值。四、结果判断仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。检测值范围：040ng/ml敏感度：0.1ng/ml[详细]

  2018-09-14 10:01

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• FH-H117-人表皮黑色素细胞说明书

  FH-H117-人表皮黑色素细胞说明书[详细]

  2024-05-30 09:33

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• FH-H083-人滑膜细胞说明书

  FH-H083-人滑膜细胞说明书[详细]

  2024-05-30 09:33

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