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赭曲霉素(Ochratoxin)试剂盒使用说明书
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本文由 上海恒远ELISA试剂盒供应商 整理汇编
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赭曲霉素(Ochratoxin)试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中赭曲霉素(Ochratoxin)残留的定量检测。实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在微孔板包被有赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原,加入赭曲霉素(Ochratoxin)标准品或样品,游离赭曲霉素(Ochratoxin)与微孔条上预包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原互相竞争抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中赭曲霉素(Ochratoxin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中赭曲霉素(Ochratoxin)的含量。试剂盒组成1预包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。2赭曲霉素(Ochratoxin)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0μg/ml,0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml3抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。4显色液A:1瓶(6ml)。5显色液B:1瓶(6ml)。6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。贮存1试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻2未用完的微孔板应该密封干燥保存注意事项1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。2不要使用过期试剂盒。3试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。4标准品中含有,使用时应特别注意,操作时应带手套。5终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。7不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果9混合试剂时应避免起泡。样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)1取10g粉碎的样品,加20ml70%甲醇溶液2QL振荡3分钟3用WhatmanNo1滤纸过滤4取25l处理后的样品,加入25l样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2)酶免分析步骤1实验须知2实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保证回温充分,否则影响检测的极ng确度和准确度。3使用后请立即将试剂放回2~8℃保存4请不要改变分析程序5请使用极ng确的微量移液器6操作一旦开始,请不要中断任何程序7ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作8为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面10分析步骤11预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测12取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存13样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(10×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)14在B0孔中加入50l0.0ng/ml标准品溶液15在各标准孔中加入50μl的标准品溶液16在各样品孔中加入50l样品溶液17在所有孔中加入50l的抗B1抗体酶结合物18轻轻晃动反应板几秒钟。1937℃温浴30min(温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)20甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。21反应22洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A,再加50l显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀2337℃温浴10min24每孔中加入50l终止液,混匀25在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。上海恒远生物科技有限公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主要销售ELISA试剂盒,标准品对照品,血清,抗体,生物试剂、培养基等科研试剂,保证质量,价格合理,欢迎您来电咨询(021-6051734813817140470)。公司网址:http://www.gbdelisa.com
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赭曲霉素(Ochratoxin)试剂盒使用说明书
- 赭曲霉素(Ochratoxin)试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中赭曲霉素(Ochratoxin)残留的定量检测。实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在微孔板包被有赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原,加入赭曲霉素(Ochratoxin)标准品或样品,游离赭曲霉素(Ochratoxin)与微孔条上预包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原互相竞争抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中赭曲霉素(Ochratoxin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中赭曲霉素(Ochratoxin)的含量。试剂盒组成1预包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。2赭曲霉素(Ochratoxin)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0μg/ml,0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml3抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。4显色液A:1瓶(6ml)。5显色液B:1瓶(6ml)。6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。贮存1试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻2未用完的微孔板应该密封干燥保存注意事项1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。2不要使用过期试剂盒。3试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。4标准品中含有,使用时应特别注意,操作时应带手套。5终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。7不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果9混合试剂时应避免起泡。样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)1取10g粉碎的样品,加20ml70%甲醇溶液2QL振荡3分钟3用WhatmanNo1滤纸过滤4取25l处理后的样品,加入25l样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2)酶免分析步骤1实验须知2实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保证回温充分,否则影响检测的极ng确度和准确度。3使用后请立即将试剂放回2~8℃保存4请不要改变分析程序5请使用极ng确的微量移液器6操作一旦开始,请不要中断任何程序7ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作8为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面10分析步骤11预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测12取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存13样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(10×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)14在B0孔中加入50l0.0ng/ml标准品溶液15在各标准孔中加入50μl的标准品溶液16在各样品孔中加入50l样品溶液17在所有孔中加入50l的抗B1抗体酶结合物18轻轻晃动反应板几秒钟。1937℃温浴30min(温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)20甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。21反应22洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A,再加50l显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀2337℃温浴10min24每孔中加入50l终止液,混匀25在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。上海恒远生物科技有限公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主要销售ELISA试剂盒,标准品对照品,血清,抗体,生物试剂、培养基等科研试剂,保证质量,价格合理,欢迎您来电咨询(021-6051734813817140470)。公司网址:http://www.gbdelisa.com[详细]
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2024-09-29 11:12
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2024-09-28 00:43
选购指南
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赭曲霉毒素免疫亲和柱说明书
- 资料名称:赭曲霉毒素免疫亲和柱说明书
适用产品:赭曲霉毒素免疫亲和柱
正文语言:中文
文件编号:BP012-2
文件版本:2.0
文件格式:PDF
文件大小:0.8MB
内容简介:赭曲霉毒素免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中赭曲霉毒素检测的净化。可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析,适用于谷物、食品和饲料等的样品净化。[详细]
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2018-05-18 10:49
其它
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赭曲霉毒素快速检测试剂盒
- 赭曲霉毒素快速检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
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甘蔗中3- 硝基丙酸的检测(曲霉素/青霉素)
- 甘蔗中3- 硝基丙酸的检测(曲霉素/青霉素)[详细]
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2015-07-08 00:00
实验操作
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人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶联 试剂盒使用说明书
- 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶联 试剂盒使用说明书[详细]
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2014-03-19 00:00
应用文章
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赭曲霉毒素ELISA快速检测试剂盒
- 赭曲霉毒素ELISA快速检测试剂盒[详细]
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2012-08-21 00:00
选购指南
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兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)elisa试剂盒使用说明书
- 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)elisa试剂盒使用说明书[详细]
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2024-10-08 05:24
安装说明
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试剂盒使用说明书
- 试剂盒使用说明书[详细]
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2015-01-23 00:00
操作手册
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人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子 (vWF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T20U/L-400U/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)水平。用纯化的人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF),再与HRP标记的血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(800U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月__[详细]
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2018-10-03 10:00
产品样册
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HGF-INElisa试剂盒使用说明书
- 人造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)水平。用纯化的人造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN),再与HRP标记的造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人造血生长因子诱导神经肽(HGF-IN)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:9pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为6pg/mL,4pg/mL,2pg/mL,1pg/mL,0.5pg/mL)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:0pg/mL-7pg/mL保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-23 10:31
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免疫组化试剂盒使用说明书
- 上海哈灵生物科技有限公司免疫组化试剂盒使用说明书保存方法:2-8℃保存。有效期:一年。生产日期:见封口。工作原理:辣根过氧化物酶(HRP)的分子量(40000),它不会遮盖抗原的结合部位,具有较高活性及特异性,可溶性佳,生成的产物不扩散,可作用于多种底物,产生不同颜色且HRP穿透力强,易进入细胞内。DAB在H2O2存在的情况下,可以作为HRP的电子供体,产生褐色的不溶颗粒,可作为显色的试剂。试剂盒内容:名称规格10.01mol/LpH6.0枸橼酸盐缓冲液0.5L2PBS缓冲液1L3广谱二抗1.5mL430%H2O25mL5DAB显色液I0.3mL6DAB显色液II0.3mL自备试剂:无水乙醇、苏木素。操作步骤:1.60℃常规脱蜡至水后,将石蜡切片先后浸入二甲苯Ⅰ,二甲苯Ⅱ各10min。然后逐级降浓度酒精入水,每次3-5min。①无水酒精3-5min②90%酒精3-5min③85%酒精3-5min④75%酒精3-5min⑤PBS洗涤3次每次5min2.热修复抗原:将切片置于0.01mol/LpH6.0枸橼钠缓冲液,微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10min后,反复1-2次,置于室温自然冷却。0.01mol/LpH7.0左右的PBS洗涤3次,每次5min3.消除内源性过氧化物酶:用3%H2O2室温孵育5-10min,以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗涤2-3次,每次5min;4.滴加一抗:滴加适当稀释的一抗到切片上,37℃孵育一定时间或者4℃隔天,pH7.4的PBS洗涤3次,每次5min。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)5.加入广谱二抗,37℃孵育一段时间,取出后PBS洗涤3次,每次5min。6.DAB显色:取DAB显色液I及II各50微升加至入1mL的水中,配成DAB工作液,滴加到切片上,室温显色,镜下控制反应时间。若无背景出现则可继续显色。蒸馏水充分洗涤以终止反应。7..观察显色后自来水冲,苏木精复染1-2min,,自来水冲10min,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,干燥,分析拍照[详细]
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2024-10-08 14:03
产品样册
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2024-09-28 00:19
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2012-08-23 00:00
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2015-04-21 00:00
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