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实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析
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实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析
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实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析
- 实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析[详细]
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2016-06-27 00:00
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RTCA iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪产品样册
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2024-09-18 18:07
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产品应用(11)独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对其进行成像分析
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2021-02-23 16:21
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2021-02-20 09:43
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2024-09-18 18:09
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自然杀伤细胞活性和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性的实时无标记检测
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2024-09-27 23:57
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RTCA技术简介
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2016-06-27 00:00
标准
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超声波清洗器常见问题解析
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2024-09-29 12:55
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CEMS系统常见问题解析
- 烟气气体分析系统随着使用时间的增加,免不了会出现一些故障问题。我们根据用户和现场服务人员所遇见的故障进行仔细分析,并针对所反应的问题提出了故障排除方法,给用户一个参考操作的办法,相信用户只要按照故障排除方法去处理问题,常见的系统故障都能迎刃而解。[详细]
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2018-09-20 10:00
产品样册
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免疫荧光技术常见问题及分析
- 免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展Z早的一种。主要是利用荧光标记的抗体与待测抗原间反应进行抗原或者半抗原物质定位的技术。本文总结了免疫荧光技术常见的问题及解析。1、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkeyanti-rabbit-FITC(绿)和donkeyanti-rat-Tex-Red(红)。(2)我的做法是两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。2、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?参考见解:(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;(2)封片**用甘油加0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?参考见解:**是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。免疫标记法可分为以下几类:荧光免疫法、放射免疫法、酶联免疫法(ELISA)、偶联生物素亲和素系统的酶免法、时间分辨荧光免疫分析、解离增强镧系元素荧光免疫分析。免疫荧光实验的主要步骤包括细胞涂片的制备、细胞的固定及通透(或称为透化)、细胞封闭、一抗和二抗抗体孵育及荧光检测等。[详细]
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2018-11-16 10:02
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RTCA技术与膜片钳技术比较
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2024-09-21 19:19
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自动化细胞成像分析技术评估CFP标记核蛋白的转导效率
- 荧光蛋白技术和自动显微镜技术的发展使研究人员能够更深入地研究活细胞中的基因功能和动态过程。荧光蛋白常被用作融合到感兴趣基因上的报告基因。[详细]
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2021-02-20 09:54
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自动化细胞成像分析技术评估 CFP 标记核蛋白的转导效率
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RTCA技术与MTT对比
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RTCA技术应用专辑二
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2016-06-27 00:00
专利
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RTCA技术应用专辑(一)
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2016-06-27 00:00
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SPR无标记多参数分析组合研究及操作平台
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2012-06-03 00:00
安装说明
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RTCA技术与cAMP方法对比
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2016-06-27 00:00
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血清操作中的常见问题解析
- 血清操作中的常见问题解析在血清操作中,常常会遇到各种问题,以下就一些常见问题进行解答。1.保存血清什么办法**?我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2.怎样避免出现沉淀物?我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭HX清及长时间的将血清置于高温环境中3.如何解冻血清才不会使产品质量受损?我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。4.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多原因,但Z普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的;而血纤维蛋白在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。5.什么事热灭活?有必要做热灭活吗? 一般以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活性,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。 实验显示,经过正确处理的热灭HX清,对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。 而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。 若非必须,可以不需要做热灭活这一步,更确保血清的质量!我公司售出产品提供售后服务,保证产品质量。凡够买我公司ELISA检测试剂盒可免费提供代测服务。[详细]
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2018-10-03 10:00
产品样册
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实时非标记的检测细胞对于上皮生长因子受体信号介导的反
- 实时非标记的检测细胞对于上皮生长因子受体信号介导的反[详细]
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2012-04-16 00:00
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