产品应用（27）核酸及蛋白质检测方法集锦（下）

本文由 美谷分子仪器（上海）有限公司 整理汇编

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• 产品应用（27）核酸及蛋白质检测方法集锦（下）

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  2021-02-19 14:03

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• 产品应用（27）核酸及蛋白质检测方法集锦（上）

  如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices®酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro® 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。[详细]

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• 蛋白质溶液浓度测定方法

  蛋白质溶液浓度测定方法蛋白质溶液浓度测定方法有多种，下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定，往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。一、双缩脲法双缩脲法是**个用比色法测定蛋白质浓度的方法，至令仍广泛采用。在需要快速，但不很准确的测定中，常用此法。硫铵不干扰显色，这对蛋白质提纯的早期价段是非常有利的。双缩脲法的原理是Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有Zda吸收。双缩脲法常用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白质溶液测定。干扰物有硫醇，以及具有肽性质缓冲液，如Tris、Good缓冲液等。可用沉淀法除去干扰物，即用等体积10%冷的三氯醋酸沉淀蛋白质，然后弃去上清液，再用已知体积的1mNaOH溶解沉淀的蛋白质进行定量测定。二、Lowry法此法是双缩脲法的进一步发展。他的**步就是双缩脲反应，即Cu++与蛋白质在碱性溶液中形成络合物，然后这个络合物还原磷钼磷-磷钨酸试剂（福林-酚试剂），结果得到深蓝色物。此法比双缩脲法灵敏得多，适合于测定20mg/L～400mg/L含量的蛋白质溶液。其干扰物质与双缩脲法相同，而且受他们的影响更大，硫醇和许多其他物质的存在会使结果严重偏差。另外要注意的是，加入福林试剂时要特别小心，试剂只在酸性pH环境中才稳定，上述提到的还原反应只有在pH10时才发生，因此，福林试剂加入到碱性的Cu2+-蛋白质溶液中时，必须立刻搅拌，以使磷钼酸-磷钨酸试剂在未被破坏之前能有效地被Cu2+-蛋白质络合物所还原。三、紫外吸收法大多数蛋白质在280nm波长处有特征的Zda吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在的缘故，因此，利用这个特异性吸收，可以计算蛋白质的含量。如果没有干扰物质的存在，在280nm处的吸收可用于测定0.1～0.5mg/ml含量的蛋白质溶液。部分纯化的蛋白质常含有核酸，核酸在260nm波长处有Zda吸收。有核酸时，所测得的蛋白质浓度必须作适当校正，一般按下述公式粗略计算：是蛋白质溶液在280nm波长处（光程1厘米）测得的光密度值。是蛋白质溶液在260nm小波长处（光程1厘米）处所测得的光密度值。此方程是从烯醇酶（在酵母核酸存在时）得出来的。因此，对其他蛋白质和其他核酸不一定适用。由于各种蛋白质所含芳香族氨基酸的量不同，因此，浓度为0.1%的各种蛋白质在280nm处的消光系数（）在0.5～2.5之间变化。所有的蛋白质在230nm以下都有强吸收。例如，牛血清白蛋白的α0.1%在225nm和215nm处分别为5.0和11.7，而在280nm处测为0.58。在230nm以下的强吸收是由于肽键的存在，因此，此值对所有的蛋白质都是一样的。从215nm和225nm处的光密度之差可用于测定浓度为10μl/ml～100μl/ml的蛋白质。蛋白质浓度可以近似地由下式得到：光密度之差求得，这一公式是减去溶液中非蛋白质成分产生的误差。但是，蛋白质之间的分子量差异比较大，因此，在比较几种蛋白质含量时，必须作适当的校正。由于蛋白质的吸收峰常因pH改变而变化，所以在制作标准曲线时，必须与样品条件一致。相关产品如下：联系方式上海索莱宝生物科技有限公司电话：021-6485566518018609966传真：021-54261506邮编：200233地址：上海市钦江路15号14层邮箱：solarbio@126.com网址：www.shsolarbio.com优质试剂质量放心价格Zdi为ZG生物产业做贡献蛋白浓度测定相关产品特价促销索宝特价另有其他常用生化试剂欢迎询问【021-54100800】[详细]

  2018-09-02 10:00

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• 提取蛋白质的方法

  植物组织蛋白质提取方法：1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！三氯醋酸丙酮沉淀法1、在液氮中研磨叶片2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。[详细]

  2018-09-27 10:00

  产品样册

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• E+H电磁流量计产品应用及优点

  E+H电磁流量计产品应用及优点德国E+H电磁流量测量系统提供经济GX的流量测量，测量精度高，测量范围广。Proline变送器包括：模块化的结构和操作理念提高工作效率电极清洗软件可选统一的操作方式Promag传感器：无压损对振动不敏感安装和调试简单可以和多种过程控制系统相连的通信接口：标准HART接口Promag50：PROFIBUS-PAPromag53：PROFIBUS-PA/-DP,FF流量可达110000m3/h流体温度可达180℃过程压力可达40bar装配长度符合DVGW/ISO标准专用内衬材料聚胺酯衬里适用于测量冷水和有轻微磨损的流体硬橡胶衬里适用于所有水的测量场合（特别适用于饮用水）防爆认证：ATEX,FM,CSA,NEPSI饮用水行业认证：KTW,WRAS,NSF,ACSE+H电磁流量计产品应用及优点E+H电磁流量计的应用可用于测量电导率≥5μS/cm的流体测量饮用水污水废水污泥一体型电磁流量计是根据法拉第电磁感应定律制定，用来测量导电流体的体积流量。由于独特的特点已广泛地应用于工业上各种导电液体的测量。主要用于化工、造纸、食品、纺织、冶金、环保、给排水等行业，与计算机配套可实现系统控制。1．电磁流量计没有可动部件，也没有阻流件，不会引起压力损失，同时也不会引起磨损，阻塞等问题。2．电磁流量计是一体积流量测量仪表，在测量过程中不受被测介质的温度、粘度、密度以及导电率（在一定范围内）的影响。3．电磁流量计的量程范围宽，可达1：100。此外，电磁流量计只与被测介质的平均流速成正比，而与轴对称的流动状态（层流或紊流）无关。4．电磁流量计无机械惯性，反应灵敏，可以测量瞬时脉动流量，而且线性好，因此可以将测量信号直接用转换器线性的转换成标准信号输出。LD-T型可就地指示，LD型可远距离传送。E+H电磁流量计产品应用及优点[详细]

  2018-09-21 10:01

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