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β内酰胺酶检测试剂盒
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2011-02-09 00:00 323阅读次数
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β内酰胺酶检测试剂盒
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β内酰胺酶检测试剂盒
- β内酰胺酶检测试剂盒[详细]
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2011-02-09 00:00
期刊论文
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-内酰胺酶检测试剂盒
- -内酰胺酶检测试剂盒[详细]
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2024-09-15 01:56
应用文章
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β内酰胺酶试剂盒
- β内酰胺酶试剂盒[详细]
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2024-09-30 16:42
操作手册
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β内酰胺酶酶联免疫试剂盒使用方法
- 检测范围:96T5U/L-150U/L使用目的:本试剂盒用于测定牛奶样本中β内酰胺酶(β-lactamase)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中β内酰胺酶(β-lactamase)水平。用纯化的β内酰胺酶(β-lactamase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β内酰胺酶(β-lactamase),再与HRP标记的β内酰胺酶(β-lactamase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的β内酰胺酶(β-lactamase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中β内酰胺酶(β-lactamase)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(240U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]
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2018-10-08 10:01
产品样册
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-内酰胺酶的检测应用之迅数-内酰胺酶检测仪
- -内酰胺酶的检测应用之迅数-内酰胺酶检测仪[详细]
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2024-09-16 06:23
产品样册
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牛奶中β-内酰胺酶检测法
- “无抗奶”,顾名思义,即不含抗生素的牛奶。早在2002年,这一概念便被提出,“无抗生素”的字样也登上了乳品包装。为何牛奶含抗生素?牛奶中的抗生素来自乳牛,乳牛被注射抗生素,主要是ZL乳腺发炎。乳腺炎是奶牛常见病,抗生素的使用是业内“公开的秘密”。牛奶中的抗生素可能导致饮用者过敏,或因长期接触抗生素而耐药。如何做到“无抗”? 药品合理间隔期后才挤奶,可以生产无抗奶,可以通过检验抗生素的方式验证。1、间接法方法原理:利用β-内酰胺酶能够酶解青霉素的原理,向牛奶中添加一定量的青霉素,如果牛奶中存在一定浓度的β-内酰胺酶,那么青霉素经β-内酰胺酶酶解后浓度会减少,从而判断牛奶中是否存在β-内酰胺酶。实验步骤:称取20g试样,在4℃、16000rpm条件下离心10min。取下层清液10g于50mL塑料离心管,并将塑料离心管置于37℃水浴锅中振荡孵育30min。向孵育后的离心管中加入无水乙醇15mL。振荡提取30min后离心,将上层清液过滤纸后收集于梨形瓶中。减压浓缩蒸发掉乙醇。向旋蒸后的梨形瓶中加入10mL磷酸盐缓冲液(pH=8.5),涡旋1min后调节pH为8.5。以1mL/min的速度将提取液通过经过预处理的OasisHLB固相萃取柱,用2mL磷酸缓冲液(pH=8.5)淋洗萃取柱,再用2mL水淋洗。Z后用3mL乙腈洗脱。将洗脱液在40℃下氮气吹干,用0.025M磷酸盐缓冲液(pH=7.0)定容残渣至1mL,待上机测定。色谱条件:LabAlliancePC-2000GX液相色谱配2000型紫外检测器;lanbo色谱柱:C18(4.6mm×150mm×5μm);流动相:甲醇/0.004M磷酸二氢钾(pH=4.5)=40/60;检测波长:268nm2、直接法方法原理:牛乳中的青霉素钾在β-内酰胺酶的作用下,主要生成青霉噻唑酸钾,并伴随生成少量的青霉胺、青霉醛等物质。经去脂肪、蛋白等前处理后,可以将青霉噻唑酸钾提取出来,经GX液相色谱仪检测确认其是否存在,从而判定该牛乳是否为人造“无抗奶”。实验步骤:称取20g试样,在4℃、16000rpm条件下离心10min。取下层清液10g于50mL塑料离心管,加入无水乙醇15mL,振荡提取30min后离心,取清液经0.45μm的滤膜过滤,用GX液相色谱仪检测。标准溶液配制:称取0.01g(极ng确至0.001g)青霉素钾于100ml容量瓶中,加入1ml市售抗生素分解剂,室温放置2h使青霉素钾酶解完全后用去离子水定容,得到青霉噻唑酸钾标准溶液,浓度100μg/mL。根据实际情况稀释后使用。色谱条件:LabAlliancePC-2000GX液相色谱配2000型紫外检测器;lanbo色谱柱:C18(4.6mm×150mm×5μm);流动相:甲醇/0.004M磷酸二氢钾(pH=4.5)=40/60;检测波长:230nm[详细]
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2018-08-14 10:00
产品样册
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人内酰胺酶(-lactamase)ELISA试剂盒
- 人内酰胺酶(-lactamase)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 10:42
标准
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小鼠内酰胺酶YZ剂(BLI)ELISA试剂盒
- 小鼠内酰胺酶YZ剂(BLI)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
其它
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猪β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 猪β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T6.5U/L-200U/L使用目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中β内酰胺酶(β-lactamase)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪β内酰胺酶(β-lactamase)水平。用纯化的猪β内酰胺酶(β-lactamase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β内酰胺酶(β-lactamase),再与HRP标记的β内酰胺酶(β-lactamase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的β内酰胺酶(β-lactamase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪β内酰胺酶(β-lactamase)浓度。猪β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。猪β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。猪β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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超快速液相检测牛奶中的青霉素分解剂-内酰胺酶
- 超快速液相检测牛奶中的青霉素分解剂-内酰胺酶[详细]
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2024-09-17 10:48
其它
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耐氨苄西林流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶机制研究
- 耐氨苄西林流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶机制研究[详细]
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2013-10-28 00:00
操作手册
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热点食品检测标准品--三聚氰胺、蜂蜜、β-内酰胺酶、氯丙醇等
- 热点食品检测标准品--三聚氰胺、蜂蜜、β-内酰胺酶、氯丙醇等[详细]
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2010-10-15 00:00
专利
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三聚氰胺检测试剂盒
- 三聚氰胺检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
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四环素检测试剂盒
- 四环素检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
期刊论文
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呋喃西林检测试剂盒
- 呋喃西林检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
安装说明
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淀粉检测试剂盒
- 订货号:10207748035产品名称:淀粉(Starch)产品英文名称:Starch包装:Ca.27tests产品介绍:请下载产品说明:Starch(用于检测食品中的淀粉)[详细]
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2018-09-15 10:00
产品样册
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胆固醇检测试剂盒
- 订货号:10139050035产品名称:胆固醇(Cholesterol)产品英文名称:Cholesterol包装:Ca.31tests产品介绍:请下载详细资料产品说明:Cholesterol(用于检测食品中的胆固醇)[详细]
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2018-09-15 10:00
产品样册
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(Digoxin) 检测试剂盒
- www.biokanu.com(Digoxin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的:本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中(Digoxin)残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有(Digoxin)偶联抗原,加入(Digoxin)标准品或样品,游离(Digoxin)与微孔条上预包被的(Digoxin)偶联抗原互相竞争(Digoxin)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中(Digoxin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中(Digoxin)的含量。3试剂盒组成3.1预包被的(Digoxin)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。3.2(Digoxin)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L3.3抗(Digoxin)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。3.4显色液A:1瓶(6ml)。3.5显色液B:1瓶(6ml)。3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。6.4标准品中含有(Digoxin),使用时应特别注意,操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1(Digoxin)标准品溶液:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L7.2浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3样本稀释液:备用7.3显色剂:已备用,避免光线直照7.4反应终止液:已备用8样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)8.1取10g粉碎的样品,加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100l处理后的样品,加入400l样本稀释液8.5取50μl稀释液进行分析(稀释倍数10)动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中;加入3ml乙腈--丙酮提取溶液,2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中;加入4ml乙腈,1ml丙酮,2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s,取出100ml加到900ml1×样品稀释液Ⅰ,混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到2ml离心管中;用1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍,混匀后取100ml用于分析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中;加入2ml1×样品稀释液Ⅲ,2ml正己烷,震荡混匀8.154000r/min以上离心5min,去除有机层和中间层,取下层溶液100ml到300ml1×样品稀释液Ⅲ8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保证回温充分,否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始,请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ug/L标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50l样品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗(Digoxin)抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min(温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)9.3.1甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A,再加50l显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50l终止液,混匀9.4.4在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以**个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ug/L标准溶液的平均吸光度值10.1.2以(Digoxin)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为(Digoxin)浓度的对数值,求得反对数即为测定液中(Digoxin)浓度C(ug/L)10.1.3由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应(Digoxin)1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.01ug/LB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。13标准曲线模式(仅供参考)试剂盒提供的标准曲线范围为0.01ug/L~1.35ug/L。14分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]
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2018-09-22 10:00
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膳食纤维检测试剂盒
- 膳食纤维检测试剂盒[详细]
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2024-09-29 05:31
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乙醇检测试剂盒
- 订货号:10176290035产品名称:乙醇检测试剂盒(Ethanol)产品英文名称:Ethanol包装:Ca.33tests产品介绍:欢迎下载产品说明:Ethanol(用于检测食品中的乙醇)[详细]
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2024-10-02 18:27
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