小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

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更多资料

• 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

  小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  安装说明

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• 猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

  猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  应用文章

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• 人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

  人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  其它

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• 大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

  大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒[详细]

  2024-10-04 04:51

  专利

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• 小鼠热休克蛋白90（HSP-90）检测试剂盒说明

  小鼠热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒说明书该试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）为基础，可用于检测血液,细胞、组织内的特异性CD40抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的CD40一抗与相应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特异一抗生物素化二抗HRP-SA复合物，显微镜下观察成像。小鼠热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒所含试剂：试剂A通透液：0.1%Triton-X10010mL（选用）试剂B封闭缓冲液（封闭用）20mL试剂C（原装进口分装）已稀释的即用型CD40一抗（2.5ml）试剂D（原装进口分装）生物素化羊抗兔IgG1支（浓度1.5mg/mL，稀释比为1:300~1:500）50μL+抗体稀释液20ml试剂EHRP-SA复合物1支（浓度1μM，稀释比1:50~1:200）100μL试剂FDAB显色液5ml用户自备试剂：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羟基氨基甲烷1.21g氯化钠7.6g加蒸馏水800mL，浓盐酸调pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%体积比）2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）10mMpH6.0柠檬酸缓冲液檬酸0.38g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水900mL，浓盐酸调pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修复液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸馏水700mL，用10mMNaOH调pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.缓冲甘油封固剂10mL4.Tween205mL石蜡包埋组织切片免疫染色实验步骤（建议方案）：石蜡包埋组织切片3~4μm厚度1.烤片：将待做切片置于切片架上，于60℃恒温烤箱中至少烤1hr；2.脱蜡：切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片经下行酒精水化，无水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修复：根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗涤（2×2min）（具体修法见附1）*注：有些抗原勿需修复，直接进入第5步封闭。5.封闭：滴加试剂B，37℃湿盒孵育30min；6.加一抗：滴加用试剂C（即用型一抗），37℃湿盒孵育2hr7.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min）；8.封闭：滴加试剂B，37℃湿盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂D），37℃湿盒中孵育30min；10.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min）；11.封闭：滴加试剂Tween20，37℃湿盒孵育封闭20min；12.加HRP-SA：滴加用试剂C稀释的试剂E（1：50~200，终浓度5~20nM），37℃湿盒中孵育30min；13.洗涤：TBS-T洗涤（3×5min），TBS洗涤（2×5min）；14.显色：应用DAB溶液（试剂F）显色；15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；16.封片：待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；17.观察成像：显微镜下观察成像。原特异一抗生物素化二抗HRP-SA复合物，显微镜下观察成像。小鼠热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒注意事项：1.修复后缓冲液须自然冷却，自来水冲洗后方能把切片取出，骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。2.缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到，用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。3.若试剂为微量浓缩液，用前应低速离心，将内盖和管壁附着的溶液离到底部。4.封片前一定要换用TBS充分洗涤，以便洗去组织上残留的Tween20，否则会影响结果观察。5.如须复染细胞核，则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。附1：抗原修法常用抗原修复液：柠檬酸缓冲液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修复液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修复法酶消化修复切片脱蜡水化处理，TBS冲洗，在组织上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS冲洗即可。二、微波抗原修复法微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档或继续微波10~15min，取出微波盒冷却至室温后，自来水冲洗，取出切片。因不同微波炉微波处理时间存在差异，须自行调整。三、直接高压抗原修复法取修复液于不锈钢高压锅中加热至沸腾，将组织切片置于耐高温切片架上，修复液沸腾后放入切片架，盖上锅盖，待喷气后计时1.5~2.5min即可脱离热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。四、隔水式高压抗原修复法不锈钢高压锅中加自来水加热至沸腾，微波盒中加入修复液于微波炉中加热至沸腾，将切片放入微波盒中，再将微波盒放入高压锅中盖上锅盖，待喷气后计时4~8min即可关闭热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。[详细]

  2018-10-09 10:00

  产品样册

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• 人热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒

  人热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒[详细]

  2015-03-18 00:00

  实验操作

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• 人热休克蛋白90（HSP90）ELISA试剂盒说明书

  人热休克蛋白90（HSP90）ELISA试剂盒原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人HSP90单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的HSP90与单抗结合，加入生物素化的抗人HSP90，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，HSP90浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中HSP90浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA）、细胞培养上清液、组织匀浆等裂解产物尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成16000pg/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入16000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）标本激活方法1.将450ul标本稀释液加入到一支1.5ml进口聚丙烯管中,再加10ul血清或血浆标本。2.加20ul1NHCI,盖紧，上下混匀。2－8℃放置60±2分钟。3.加20ul1NNaOH,盖紧，上下混匀。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。计算结果时乘以稀释倍数50。（注意：不同的标本HSP90的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度）5.细胞培养上清或组织匀浆10倍稀释（410ul的标本稀释液＋50ul样本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品（已激活）100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应HSP90含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的HSP90检测浓度小于65pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人HSP90。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于12％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

  产品样册

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• 兔热休克蛋白90试剂盒使用说明

  【产品名称】：兔热休克蛋白90试剂盒【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)【产品性状】：96T/48T，盒装液体【贮藏】：2-8°C【产品有效期】：二年，我公司Elisa试剂盒均为Zxin批次，可放心购买。【产品主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。使用目的：本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中热休克蛋白90(Hsp-90)含量。兔热休克蛋白90试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔热休克蛋白90(Hsp-90)水平。用纯化的兔热休克蛋白90(Hsp-90)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入兔热休克蛋白90(Hsp-90)，再与HRP标记的热休克蛋白90(Hsp-90)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的热休克蛋白90(Hsp-90)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔热休克蛋白90(Hsp-90)浓度。[详细]

  2018-11-16 10:02

  产品样册

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• 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒

  小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  专利

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• 小鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)ELISA试剂盒

  小鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)ELISA试剂盒[详细]

  2016-08-18 00:00

  报价单

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• 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒

  小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-18 02:58

  期刊论文

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• 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

  小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 23:37

  实验操作

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• 小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒

  小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-29 13:41

  应用文章

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• 猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒

  猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  课件

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• 猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒

  猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  实验操作

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• 猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

  猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  实验操作

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• 大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒

  大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-10 00:00

  课件

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• 大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒

  大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-10 00:00

  期刊论文

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• 人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒

  人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  安装说明

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  人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

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