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沉淀反应的特点

本文由 上海盈公生物技术有限公司 整理汇编

2018-09-27 10:00 1457阅读次数

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沉淀反应(precipitationreaction)是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象。早在1897年Kraus发现细菌培养液与相应抗血清混合时可出现沉淀现象。1905年Bechhold把抗体放在明胶中,再将抗原加于其上,发现沉淀反应可在凝胶中进行。1946年Ou出n报告了试管免疫扩散技术,到1965年Mancini建立了单向免疫扩散技术,这就使得定性免疫试验逐步向定量化发展。20世纪70年代免疫浊度法的出现使沉淀反应适应了现代测定快速、简便和自动化的要求,开创了免疫化学定量检测的新纪元。根据沉淀反应介质和检测方法的不同。将其分为液体内沉淀试验、凝胶内沉淀试验和凝胶免疫电泳试验三大基本类型。沉淀反应中抗原抗体结合的特性与经典的抗原抗体反应相同。沉淀反应分两个阶段,**阶段为抗原抗体特异性结合,在几秒钟到几十秒钟内可以完成并出现可溶性复合物,快速但不可见。此阶段主要受抗原抗体特异性和结合力的影响。免疫比浊法中的速率法就是利用此阶段测定免疫复合物形成的速率。第二阶段则形成可见的免疫复合物,约需几十分钟到数小时完成,经典的沉淀反应是观察此阶段形成的沉淀线或沉淀环来判断结果。此阶段受抗原抗体比例、分子大小、浓度、亲和力及电解质浓度和反应温度的影响。免疫比浊法中的终点法也是测定此阶段形成的复合物的量。关于抗原抗体结合后如何聚集形成复合物而沉淀,可用网络学说(1atticetheory)解释,即大多数抗体为两价,天然抗原为多价,二者可相互交联成具有立体结构的巨大网格状聚集体,出现肉眼可见的沉淀物。多克隆抗体可与抗原表面多表位结合,很容易交联成网状结构而发生沉淀,因此多克隆抗体非常适用于免疫沉淀反应,而单克隆抗体只与抗原的一种表位结合,不易形成交联,故一般不适用于免疫沉淀反应。

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