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酶组织化学对组织处理的基本要求
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酶组织化学对组织处理的基本要求
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酶组织化学对组织处理的基本要求
- 酶组织化学对组织处理的基本要求[详细]
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2015-03-03 00:00
报价单
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免疫酶组织化学技术的常用酶及其底物
- 免疫酶组织化学技术的常用酶及其底物(一)辣根过氧化物酶在免疫酶技术中,辣根过氧化物酶(HRP)是Z理想、应用Z多的标记酶,是从一种称为辣根的植物根部分离、纯化获得。HRP分子中含有含铁血红素基团(高铁血红素),是HRP的活性基团,在溶液中呈棕黄色,HRP中的高铁血红素与H202形成一种复合物,然后脱水,氧原子形成。几种底物可使HRP氧化,Z常用的有二种,即多酚和硝基盐。HRP的优点有以下几个方面。(1)体积小(分子质量40kDa),不会遮盖抗原的结合部位,且穿透力强,易与细胞内抗原结合。(2)稳定且易获得高纯度酶制品。(3)具有较高活性及特异性。(4)不溶性好,终产物不向周边扩散。(5)组织中内源性酶较少,YZ方法较多。(6)价格相对较便宜。(7)特异性底物是过氧化氢(H202),可选用不同电子供体(发色基团),使终产物呈不同颜色。例如3,3’二氨基联苯胺(DAB)为棕褐色,3氨基9乙基卡巴唑(AEC)为红色,4氯1苯酚(CN)为蓝色。AEC室温下较稳定,产物不溶于水,但溶于有机溶剂,所以不能进行脱水等处理;又因其需用水溶性封固剂,时间长易褪色,限制了其应用。DAB是广泛应用的电子供体,产物既不溶于水,又不溶于有机溶液,可长期保存。其终产物具有嗜锇性,经锇酸处理后电子密度增加,适用于电镜下观察。但DAB的缺点是具有潜在的致癌性,所以应尽量减少吸人和接触次数,并严格管理废液。尽管有人反对应用DAB,但目前还未找到一种比它更好的替代品,所以应用依然Z为广泛。HRP与底物H202呈色反应原理见图4l。HRP的特异底物为H202,在分解Hz02过程中,与H202形成初级复合物,无电子供体时,反应不再继续进行,当电子供体存在时,反应以一定的速度形成第二种复合物。HRP催化H202已形成的中间型产物,迅速生成水,酶被还原,电子供体被氧化、聚合,再经氧化环化?Z后形成吲哚胺多聚体,此多聚体进一步氧化、环化,形成苯乙肼聚合体,如供氢体是DAB,产物为棕褐色;如是AEC,产物为红色。(二)碱性磷酸酶目前商品化的AKP均来源于牛小肠,称为牛肠碱性磷酸酶(calfintestinalkalinephosphatase),其分子质量为100kDa,故而穿透细胞组织的能力较弱。某些组织细胞内含有较高的内源性碱性和酸性磷酸酶,例如人体和鼠类、狗等动物组织的肝、肾、肠,对IHC染色会产生一定的干扰,因此限制了它的应用。AKP主要用于血涂片或涂片的白细胞抗原检测。但是由于AKP的呈色反应的敏感性要比HRP高23倍,显色时间可从30min到48h,可与HRP组合进行IHC的双重或多重标记。另外,内源性碱性磷酸酶可以在底物缓冲液中加入左旋咪唑(1evamisole)和镁离子(氯化镁),或提高底物缓冲液的pH值,可以有效地消除内源性碱性磷酸酶,使该酶应用比例日趋增多。目前该酶已广泛应用于原位杂交检测的显色和双重酶标染色。(三)葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶(glucoseoxdase,GOD)以葡萄糖为底物,生成蓝色不溶性沉淀。该终产物较稳定,不溶于有机溶剂,故易保存,但因其分子质量为150kDa,不能穿人细胞,影响了其应用。另外,该酶的敏感性较低,主要是酶与底物反应敏感性低。目前主要用于IHC的多重标记。免疫酶组织化学技术的常用酶及其底物[详细]
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2018-09-14 10:01
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2013-11-11 00:00
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2024-09-30 15:33
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超高压处理对草莓汁品质酶和杀菌效果的影响
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2024-09-28 00:01
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2024-09-27 23:57
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拉曼光谱仪对组织肌体的测试
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2024-09-17 10:27
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2024-09-27 23:46
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高通量组织研磨仪对动物器官组织的研磨
- 高通量组织研磨仪对动物器官组织的研磨[详细]
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2016-09-19 00:00
标准
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组织对氧磷酶1(PON1)有机磷酸酶活性定量试剂盒说明书
- 主要用途组织对氧磷酶1(PON1)有机磷酸酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过对氧磷酶1反应系统中,水解有机磷酸,释放出对硝基苯产物,出现吸光峰值的变化,即采用光度法来测定组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体组织裂解悬液样品对氧磷酶1的有机磷酸酶活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景对氧磷酶(parapxonase;PON;EC3.1.8.1)是一种水解酯类(esters)、有机磷酸酯(organophosphate)和内酯(lactone)的多态性酶,分成三个亚型:PON1、PON2、PON3。结构同源性在基因层面上达70%,在氨基酸层面上达65%。其中PON1,为钙离子依赖性和高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein;HDL)相关性糖蛋白,含有354氨基酸,43Kd分子量,分布在肝脏、肾脏、小肠和血清(50毫克/升)中。具有有机磷酸酶(organophosphtase)、磷酸三酯酶(phosphotriesterase)、芳香酯酶(arylesterase)和硫内酯酶(thiolactonase)等多重活性:PON1与HDL结合,水解各种LDL和HDL上的氧化性磷酯,以及芳香族羧酸酯、芳香族和脂肪族内酯等,例如杀虫剂对硫磷(parathion)降解产物对氧磷(paraoxon)、毒死蜱(chlorpyriphos)、神经毒因子*(sarin)和*(soman)、同型半胱氨酸(homocysteine)硫内酯、二氢香豆素(dihydrocourmarin;DHC)、γ-丁内酯(γ-butyrolactone)等,延缓和YZ低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein;LDL)氧化作用,阻止脂质过氧化物产生,保护脂蛋白以及质膜受到氧化损伤,达到抗粥样硬化(antiatherogenic)、、抗氧化的功能。PON1活性降低与慢性肾衰、糖尿病、外周神经病变、家属性高胆固醇血症、心血管疾病、肝纤维化等有关。PON2为44Kd分子量,分布在脑、肝脏、肺、肾脏、睾丸等大多数组织中,但血清中测不到。PON2具有水解芳香酯和内酯酶的功能,但不能水解有机磷酸。具有细胞内抗氧化作用,预防粥样硬化等功能。PON3为40Kd分子量,主要分布在肝脏中,少量在肾脏中。主要水解各种内酯和环状羧酸酯,具有抗氧化功能。基于人工合成底物对硝基苯磷酸二乙酯(diethyl-p-nitrophenylphosphate),在对氧磷酶1的作用下,水解产生对硝基苯(p-nitrophenol)和磷酸二乙酯(diethylphosphate),通过对硝基苯产物吸收峰值的变化(405nm波长),来定量分析对氧磷酶1的有机磷酸酶活性。其反应系统为:[详细]
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2018-11-08 10:00
产品样册
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组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒
- 组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒[详细]
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2016-07-05 00:00
其它
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ZM200对茶叶的前处理
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2008-01-11 00:00
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GM200对苹果的前处理
- GM200对苹果的前处理[详细]
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2008-01-08 00:00
选购指南
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样品处理对水分活度的影响
- 样品前处理有可能影响水分活度的测量结果。消除或者减少这个前处理带来的可能变化会得到更加一致和准确的水分活度测量结果。减少由于样品前处理带来的结果变化会确保研究人员和技术人员更好的分析其他因素影响对样品水分活度带来的变化。了解样品前处理对水分活度结果的影响,以及建立可靠的前处理方法来减少结果的变化是非常重要的。因此,非常有必要了解不同的前处理方法是怎样影响不同样品的水分活度结果。Decagon的研究人员对许多多组分食品、药物和化妆品进行了3种不同前处理方法的水分活度结果进行了分析和研究。[详细]
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2019-01-02 10:00
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SM2000对纺织品的前处理
- SM2000对纺织品的前处理[详细]
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2024-09-13 23:04
应用文章
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测量中对水质分析的基本要求及如何提高分析结果的准确性
- 测量中对水质分析的基本要求及如何提高分析结果的准确性[详细]
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2024-09-28 21:14
标准
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奶粉对包装与材料基本要求及质量控制解决方案
- 奶粉对包装与材料基本要求及质量控制解决方案[详细]
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2015-07-09 00:00
其它
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显微组织对2530铸钢件力学性能的影响
- 显微组织对2530铸钢件力学性能的影响[详细]
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2015-12-14 00:00
应用文章
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组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒
- 组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒[详细]
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2016-07-11 00:00
选购指南
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