克隆心得:帮助新手快速做出克隆

本文由 上海士锋生物科技有限公司 整理汇编

2015-12-30 00:00 336阅读次数

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更多资料

• 克隆心得:帮助新手快速做出克隆

  克隆心得:帮助新手快速做出克隆[详细]

  2015-12-30 00:00

  标准

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• 不经显微操作进行体细胞克隆(徒手克隆)

  不经显微操作进行体细胞克隆(徒手克隆)[详细]

  2024-09-21 23:40

  专利

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• 植物的克隆

  植物的克隆[详细]

  2011-04-14 00:00

  选购指南

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• 分子克隆常用技术

  分子克隆常用技术[详细]

  2016-01-07 00:00

  应用文章

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• TY-4069阿克隆磨耗机

  TY-4069阿克隆磨耗机[详细]

  2014-09-05 00:00

  专利

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• BT产品应用（22）使用QPix400系统自动筛选颜色克隆：如红白克隆筛选

  通过颜色来筛选重组细菌是一个简单且GX的方法。比如常用的蓝白克隆筛选，通过B-半乳糖苷酶和X-gal之间的反应，通过颜色的变化区分克隆是否成功插入外源基因。我们QPix400系统通过使用QPix颜色克隆筛选软件模块和红色QPix颜色滤光片成功实现自动化的蓝白克隆筛选，大大增加实验室重组克隆的筛选效率。通过功能扩展，现在QPix400系统通过QPix颜色克隆筛选软件模块和新的蓝色QPix滤光片（Figure1）可以实现红白克隆的筛选。可以应用于筛选天然红色的微生物克隆如酒红色酵母以及和X-gal反应变成红色的克隆。本文描述了如何使用QPix400系统进行红白克隆的筛选。[详细]

  2024-09-11 17:48

  应用文章

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• 巨噬细胞克隆刺激因子 M-CSF单抗

  应用巨噬细胞克隆刺激因子M-CSF单抗实验：试验验证过适用于Westernblotting实验、免疫组化实验（Immunohistochemistry）、ELISA实验。M-CSF单抗说明书，请打电话询要。巨噬细胞克隆刺激因子包装规格：0.1ml、0.2mlAnti-M-CSF：鼠源单抗、兔源多抗重要提示：巨噬细胞克隆刺激因子M-CSF单抗避免重复冻融，专为科研实验使用。欢迎打电话咨询详情！6600-40-4L-正缬氨酸9075-68-7普鲁兰酶大鼠神经胶质纤维酸性蛋白elisa代测,GFAP试剂盒22838-58-0BOC-D-缬氨酸6212-33-5对氯苯甘氨酸9004-54-0葡聚糖T40人衣原体蛋白酶样活性因子elisa代测,CPAF试剂盒830-96-63-吲哚丙酸人基质金属蛋白酶组织YZ因子1elisa代测,TIMP-1试剂盒119-90-4邻联茴香胺[详细]

  2018-11-05 10:00

  产品样册

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• 美科学家成功克隆人类胚胎干细胞

  美科学家成功克隆人类胚胎干细胞[详细]

  2024-09-17 04:42

  标准

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• 阿克隆磨耗机技术条件

  信任达仪器有限公司是长期从事实验仪器研制，开发，生产的企业。经过多年来的研发，现已开发适合鞋业，皮革业，五金电镀业，包装纸业，电线电缆业，自行车业，金属塑料业纺信织等行业的品管检测设备有三百余种。如力学试验机，wan能材料试验机，拉力试验机，压力试验机，环境试验机，恒温恒湿，恒温恒湿试验机，恒温恒湿试验箱，低温耐寒实验机，盐水喷雾试验机，盐雾试验机，标准光源箱，老化试验机，耐黄边试验机，震动，光学仪器，投影仪，影像测量仪，检针机，涂层测厚仪/等。并可定制各种非标物性检测设备，产品符合STM，JIS，GB，DIN，CNS等多国标准。在产品性价比上力求wan美，以达到适合不同规模的企业选用。并在上海，广东，北京设有服务处。为用户提供即使周到的售后服务。本公司国内销售的产品均可出具国家科技，监督部门有效鉴定证书。拥有强大的销售队伍和经营网络，海内外市场广阔，企业综合实力跻身国内同行前列。在全国有很高的声誉。产品遍布全国。信任达的目标：yi流的产品，yi流的服务经营方针：以产品促市场，以服务促市场企业精神：积极进取，勇于开拓创新理念：持续创新，不断超越协作理念：先做朋友再成事业市场理念：肩负责任，大步向前联系方式詹任民电话：021-32513188传真：021-52958755www.shxrd168.comwww.shxrd.com[详细]

  2024-09-28 00:37

  产品样册

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• BT产品应用（17）使用QPix400系统自动筛选颜色克隆：如蓝白克隆筛选

  在分子克隆过程中，筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法，但是，在克隆挑取过程中，过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。 Molecular Devices QPix400系列微生物克隆筛选系统提供了一个自动化的解决方案，尤其针对蓝白克隆筛选，通过白光成像提供了准确GX的克隆转化检测方法。这个解决方案整合了QPix Software2.0蓝白筛选模块、QPix颜色滤片以及可调平板适配器。[详细]

  2021-02-18 17:12

  应用文章

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• 细胞琼脂克隆斑形成实验方法

  细胞琼脂克隆斑形成实验方法1.取MDA-435-OL-Sec23a-GFP和MDA-435-OLLV3NC-GFP对数生长期的细胞制成单细胞悬液,使用血细胞计数板计数后备用。2.使用梯度稀释法适当稀释细胞悬液后,向6孔板的每个孔内分别加入含50个细胞的2mL细胞悬液,细胞悬液使用含10%FBS的DMEM培养液配制。每种细胞均设置3个6孔板复孔。3.12h后镜下可观察到6孔板内细胞已经全部贴壁,此时将皿中培养液换成琼脂浓度为0.2%的含10%FBS的DMEM培养液,置于37°C培养箱内培养。4.10d后镜下可观察到6孔板内出现集落生长的细胞克隆斑。此时弃去含琼脂的培养液,用PBS轻轻润洗2次,然后6孔板内每孔加入2mL冰甲醇固定30min,固定结束后使用PBS轻轻润洗2次,然后使用结晶紫染色5min,再用PBS轻轻润洗后室温干燥。5.干燥完成后将6孔板移至显微镜下观察计数每个孔内细胞克隆斑数量,超过50个细胞的克隆斑即可计数。根据细胞克隆斑形成率=(克隆数/接种细胞数)×1**%来计算细胞体外克隆率。[详细]

  2024-10-03 20:15

  产品样册

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• PCR分子克隆实验引物溶解稀释方法

  PCR分子克隆实验引物溶解稀释方法[详细]

  2011-11-22 00:00

  操作手册

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• 美科学家成功克隆人体胚胎 造人梦想成真

  美科学家成功克隆人体胚胎造人梦想成真美国加州的科学家表示已采用2名志愿者的皮肤细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有科学价值的干细胞。　　美国加州的科学家表示，他们已经采用2名志愿者的皮肤细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有科学价值的干细胞。不过，有批评家认为这是造人梦想变成了现实。此成果发表在17日出版的《干细胞》杂志上。　　不过，其他研究人员对美国的这一成果表示怀疑。如果此成果属实，那么美国加州小组将证明能通过人体成熟细胞克隆出人来。这些科学家供职于美国加州的干细胞代理公司，他们表示，他们用试管婴儿ZX工作的2名志愿者的皮肤细胞，克隆出了5个人体胚胎。他们表示，他们艰苦地验证了可以从这2人体细胞中克隆出胚胎来。负责此项研究的安德鲁弗兰其说：“我们希望它能促进更多的研究。”　　据悉，他们使用了一种名为SCNT的体细胞核移植技术，就是掏空卵细胞，再在此卵子中注入捐赠者细胞核，加以复制。在此案例中，是采用了捐赠者的皮肤细胞。此同样技术也于1996年用在了多莉羊的克隆上，这是从成年体细胞克隆出的哺乳动物。美国科学家希望使用此技术来制造特制的可用于移植的细胞、组织和器官，并能用此办法来ZL伤害和疾病。　　科学家表示，来自克隆胚胎的干细胞为研究疾病的ZL。药物的筛选和服用提供有价值的工具，比如糖尿病和帕金森氏症。[详细]

  2018-10-18 10:00

  产品样册

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• FH1210-人胚肾细胞F-克隆；Expi293F

  FH1210-人胚肾细胞F-克隆；Expi293F[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

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• FH0822-人胚肾细胞-F克隆； 293F

  FH0822-人胚肾细胞-F克隆； 293F[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

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• FH0534-小鼠结缔组织L细胞株929克隆；L-929

  FH0534-小鼠结缔组织L细胞株929克隆；L-929[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

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• 大鼠粒细胞克隆刺激因子(G-CSF)检测试剂盒

  大鼠粒细胞克隆刺激因子(G-CSF)检测试剂盒[详细]

  2024-09-23 22:02

  报价单

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• BT产品应用（36）快速筛选高表达细胞膜蛋白的哺乳动物细胞克隆

  ClonePix 2 技术使细胞在半固体培养基中生长形成悬浮的细胞克隆，然后利用荧光检测和标志物对这些克隆成像。此篇应用文章将介绍该技术的一个新应用，即基于细胞表面蛋白表达量的细胞克隆筛选。[详细]

  2024-10-09 10:19

  应用文章

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• 人寡克隆区带 （OCB） ELISA 检测试剂盒

  人寡克隆区带(OCB)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：OCB试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知OCB浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将OCB和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中OCB的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗OCB抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：400pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（pg/ml）A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的OCB标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的OCB含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[详细]

  2018-09-14 10:00

  产品样册

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• 人 （Human） 寡克隆区带 ELISA 检测试剂盒

  人(Human)寡克隆区带(OCB)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：OCB试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知OCB浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将OCB和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中OCB的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗OCB抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：400pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（pg/ml）A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的OCB标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的OCB含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[详细]

  2018-09-14 10:00

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