液相色谱串联质谱仪工作注意事项

液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）高稳态运行实战要点

在分析化学领域，液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）因其的选择性和灵敏度，已成为实验室应对复杂基质分析的核心武器。作为精密仪器的代表，其“高产出”往往伴随着“高敏感”。实验员深知，质谱的稳定性并非仅取决于仪器性能，更多在于日常操作中对细节的极致掌控。

溶剂质量与流动相的底层逻辑

质谱是精密的水质和溶剂监控器。任何进入质谱系统的杂质都会在电喷雾电离（ESI）过程中被放大，产生极高的背景噪音或形成加合物干扰。

1. 水质底线：必须使用电阻率达到18.2 MΩ·cm的超纯水。长期放置的水极易滋生微生物或吸收环境中的邻苯二甲酸酯，建议每24小时更换一次水相。
2. 有机溶剂等级：仅能使用“LC-MS级”溶剂。普通色谱级溶剂中的金属离子（如Na+、K+）在质谱中会产生严重的加合峰，抑制目标物信号。
3. 添加剂控制：常用的甲酸、乙酸或铵盐应尽量使用原装高纯试剂，浓度通常控制在0.1%或10mM以内。过高的盐浓度会引起离子源喷嘴堵塞，甚至导致四极杆污染。

进样前处理：基质效应的“防火墙”

基质效应是LC-MS/MS分析中的大变量。未经过滤或净化不彻底的样本，是造成压力波动和离子源污染的元凶。

• 过滤与离心：所有样本进样前需经过0.22μm微孔滤膜过滤，或在12000 rpm下离心10分钟。
• 溶剂效应规避：进样溶剂的洗脱强度应小于或等于初始流动相，否则会出现峰形畸变或保留时间漂移。
• 浓度上限：避免进入极高浓度的样本（如>10μg/mL），这会导致严重的残留（Carry-over）和探测器饱和。

离子源与真空系统的精细维护

离子源是质谱的心脏，直接决定了电离效率。

• 喷雾针位置：ESI针尖相对于离子传输孔（Orifice/Capillary）的位置需精确微调。过近易造成电弧放电，过远则降低灵敏度。
• 幕帘气（Curtain Gas）的作用：始终保持幕帘气开启，利用高纯氮气流防止溶剂液滴和中性粒子进入真空系统。
• 温度设定：脱溶剂气温度需根据流速动态调整。对于0.4mL/min的流速，温度通常设定在450℃-550℃之间，确保溶剂充分汽化。

核心运行参数监控表

系统关机与长期维护的策略

质谱不建议频繁开关机。长期停机后，真空腔体表面吸附的水分子和挥发性杂质需要较长时间才能抽除。

1. 冲洗机制：实验结束后，应先使用高比例有机相（不含酸碱盐）冲洗色谱柱和管路30分钟以上，随后切换至纯乙腈或甲醇保压。
2. 离子源清洁：定期使用异丙醇/水（50:50）清洗离子源腔体和锥孔，避免基质累积形成的碳化沉积。
3. 泵油管理：对于使用机械泵的系统，观察泵油颜色及油位。如颜色变深或变浑浊，必须立即更换，以防倒吸风险。

在LC-MS/MS的操作中，预防性维护的价值远高于事后维修。对每一个细节的严谨把控，不仅是为了获取一张漂亮的谱图，更是为了确保数据的真实性与实验室运行的长效稳健。