PCR仪的控温方法及应用

聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，通过高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应形成一个周期，目的DNA迅速扩增，其具有节约时间，操作简单，高灵敏度，强特异性等特点。其又被叫做无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。其不但在核酸序列分析和基因分离、克隆被使用，其还在任何有DNA,RNA的地方被使用或者被用来对疾病进行诊断。

PCR的三种控温方法

1.计算控制

在运行多数程序中，Z好的温度控制方法就是计算控制，温度的一致性以及可靠性都比较的好。使用计算控制的时候，模块的温度通过对样品的管子或玻片热传导的速度和样品的体积进行估算（当程序运行的时候，会显示这些样品的信息）。由于这种估算遵循已知的容量和热力学的规律，因此和模块控制以及探针控制相比，计算控制更极ng准。运行计算控制能够使得实验时间缩短，简单的程序操作能够使得酶的活性得到保护，使得引物的损失减少。

2.模块控制

和计算控制相比，模块控制的精确度要更加低些。在模块控制下，样品温度达到设置温度的时间一般在模块之后。之所以会有这段延迟，是样品体积和管子类型的缘故。

3.探针控制

探针控制一般能够在不同的环境中使用，然而其需要被小心的使用。微信版和玻片就可以。

应用：

1.血液检验漏检率

由于实时荧光定量PCR方法比Elisa灵敏很多，因此，血站或血液研究所一般用来研究Elisa方法的漏检率，即分析Elisa方法测定为阴性的血样，再用实时荧光定量PCR方法来复检。复检时，一般24个Elisa阴性的血样混合成一个样本进行检测。

2.新诊断及检验试剂的开发

现有的很多诊断及检验方法都不能同时满足快速、灵敏、定量的要求如现有培养法、Elisa法等等，而荧光定量PCR方法以则可以做到这一点，从而可为临床疾病、商检、粮油检验、食品检验、血液检验等等开发新的试剂，从而提高检验的灵敏度、速度及准确性等；这类试剂的种类是非常多的，所开发的试剂的社会效益及经济效益都是很巨大的。

3.新药开发研究，人用药物及其他药物

针对一些感染性疾病的药物，如各种病毒病、细菌病等，在新药的开发过程中，快速了解药物对疾病进程的影响可以为新药开发节约大量的人力、时间和资金，与以前所用的Elisa等方法相比，实时荧光定量PCR技术可以快速、准确、定量、灵敏地测定血液或组织中病原体的含量，因此有利用分析药物的作用效果，为比较不同的配方的LX、用药量、用药时间等等提供快速、定量的评价。