多肽合成酰基叠氮物法

在肽化学中，TheodorCurtius早在1902年就已经引入了酰基叠氮物法，所以，酰基叠氮物法为Z古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中，氨基酸酯能够在有机溶剂中使用，与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽除外。不同于其他许多缩合方法，它不需要对另一等当量的氨基组分和辅助碱进行增加来对腙酸进行捕获。

很长时间内，人们一直认为，叠氮物法是唯yi不发生消旋的缩合方法，随着引入了可选择性裂解的氨基酸保护基，该方法得到了大规模的复兴。晶体状的氨基酸酰肼或肽酰肼64为该方法的起始原料。在－10℃的盐酸中，叠氮化物65是利用等当量的亚硝酸钠亚硝化酰肼而成，洗涤、干燥，之后和相应的氨基组分反应。能够使用冰水稀释从而沉淀出某些叠氮化物。合成酰基叠氮化物亦能够使用二苯磷酰基叠氮化物（DPPA）。亚硝化试剂词用亚硝酸叔丁，并且在有机溶剂中进行叠氮缩合反应是指Honzl-Rudinger方法。由于酰基叠氮化物的热不稳定，应当在低温下进行叠氮缩合反应。若温度较高，会产生副反应，Z终导致副产物脲生成。

如果N端保护的肽链比较长，那么肼解酯基通常不会简单。所以可以选择使用正交的N保护肼衍生物。在完成选择性脱除肼基以后，叠氮缩合可以使用根据倒接（backing-off）策略组合的肽片段。

综上所述，尽管人们一直认为消旋化倾向Z小的缩合方法是叠氮法。然而，在反应中，如果碱的量偏多的话，则会有相当大的消旋被诱发出来。所以，在缩合反应期间，和碱的接触应当尽量避免。比如三乙胺由N，N－二异丙胺或N－烷基吗啉来代替中和。尽管有一定的局限性，然而该方法依然是非常重要的方法，特别对于片段缩合来说。此方法异构化倾向比较低，对于羟基未保护丝氨酸或苏氨酸组分非常适用，同时Nˊ保护的本行酰肼的用途也多种多样。