圆二色光谱仪介绍

在蛋白质二级结构的测定方法中，圆二色光谱(简称CD)得到了Z为广泛的应用。在对溶液中蛋白质构象的研究，其比较准确、简单以及快速。其能够在溶液状态下测定，和其生理状态比较接近。并且测定方法快速简便，对构象变化灵敏，因此，到目前为止，在对蛋白质二级结构的研究中，其占据主导地位，并且已经在蛋白质的构象研究中得到了广泛地应用。圆二色光谱仪为按照圆二色光谱法的原理和测试要求设计制成的仪器。到目前为止目前圆二色光谱法及其仪器已在有机化学、生物化学、配位化学和药物化学等领域得到了广泛地应用，已经成为对有机化合物的立体构型进行研究的一个重要方法。

简介

圆二色光谱为一种用于对非对称分子的构型和构象进行推断的旋光光谱。如果光学活性物质对组成平面偏振光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数(ε)是不一致的，εL≠εR，就会具有圆二色性。若横坐标为不同波长的平面偏振光的波长λ，纵坐标为吸收系数之差Δε=εL-εR，然后使用上述内容作图，得到的图谱就是圆二色光谱，简称CD。如果在紫外可见区域内某手性化合物有吸收，具有特征的圆二色光谱就能够得到。因为εL≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是椭圆偏振光，摩尔椭圆度[θ]与Δε的关系为：[θ]=3300Δε。圆二色谱也能够以波长为横坐标，以摩尔椭圆度为纵坐标作图。因为△ε存在正值和负值之分，因此圆二色谱也有呈谷的负性圆二色谱以及呈峰的正性圆二色谱。对有机化合物的构型和构象进行推断为在紫外可见光区域对圆二色谱与旋光谱进行测定的目的。

样品要求

1.缓冲液、溶剂要求：在配制溶液前，要单独的检查缓冲液和溶剂，检查在测定波长范围内是否有吸收干扰，检查是否有沉淀和胶状形成。在蛋白质测量中，缓冲体系经常选择透明性极好的磷酸盐。

2.　样品浓度与池子选择：样品不一样，测定的圆二色光谱范围也会存在差异，对池子大小(光径)的选择和浓度的要求也不相同，通常在相对较稀的溶液中进行蛋白质CD光谱的测量。

3.溶剂必须在测定波长没有吸收干扰，样品必须保持一定的纯度不含光吸收的杂质，，样品在溶剂中可以完全溶解，有均一透明的溶液形成。

4.控制氮气流量