流式细胞仪如何选择和确定单抗组合

流式细胞术是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术（Flow CytoMetry，FCM）是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。抗体的质量控制是实验的关键环节。抗体的质量包括其特异性、灵敏度、精密度。下面就让小编带你了解一下流式分析怎么选择单抗组合。

流式分析Z基础的试剂就是抗体。选择抗体的好坏直接关系到检测结果的准确性。像F/P比值、亚型、全长或片段、种宿来源、标记荧光种类等等都会影响抗体的特性。而且，单抗的种类非常多，有CD分类号的有300多种单抗，没有CD分类号的单抗又有许多，所以抗体组合的选择非常困难。通常，选择抗体组合遵循下面几项原则：

1）选择的抗体组合需要足够宽，Z好能够鉴定样本中的一切细胞亚群，无论是正常群体还是异常群体。

2）应该尽量选择荧光强度强的荧光素标记表达比较少的抗原。

3）需要知道不同抗体的染色模式和细胞反应谱。由于相同CD编号的抗体可能识别不同的抗原决定簇，所以需要根据不同的实验目的选择抗体。

4）抗体的多种组合可能会影响与抗原的结合，因此对于所用抗体组合，必须先了解每个抗体在对照细胞上单色标记的表达情况。

5）对于临床实验应该尽可能使用体外诊断（IVD）试剂和分析特异性（ASR）试剂，研究用（RUO）试剂通常不能在体外诊断实验中使用。在ZG，被用作体外诊断的试剂还必须获得国内的SDA认证。一个抗体组合内的抗体可能来源不同的公司，有不同的浓度、不同的亚型、不同F/P值，所以需要自身的同型对照，但是实际操作非常困难。因此尽可能选择同一家公司的试剂以防干扰。对于临床上常见的流式检测项目，所需的试剂组合基本都有参考或推荐的抗体组合。

例如T细胞亚群检测：CD45/CD4/CD8/CD3、CD45/CD56/CD19/CD3；阵发性血红蛋白尿

（PNH）检测：CD55、CD59；血小板无力症（GT）检测：CD41、CD61等等。