培养基分装仪培养基的制备
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基的制备方法
选定培养基的配方
在不同著作中,同一种培养基的配方经常会有所不同。所以若所用的是标准方法,则必须严格按其规定进行配制。若不是,则都应当尽量收集有关资料.加以比较核对,然后按照自己的使用目的加以选用,记录其来源。
记录培养基的制备过程
应当记录每次制备培养基的情况,包括培养基名称,配方及其来源和各种成份的牌号,Z终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等。记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
培养基成分的称取
培养基的各种成分不仅精确称取,还需注意避免错乱。Z好不要中断,一次完成。可将配方置于旁边,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后.还应进行一次检查。
培养基各成份的混合和溶化
培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,避免有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。Z好使用不锈钢锅加热溶化,也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,Z后必须加以补足。
培养基pH 的初步调整
培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的Z终pH,保证培养基的质量。pH调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。
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