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奥盛春季大促即将开启

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/ 什么是Pathlength Correction？/

Pathlength Correction可中文翻译为光程校正，是指酶标仪在进行样本检测时，传感器会自动将微孔板中样品所测的吸光度标准化成1cm×1cm比色皿模式下的吸光度。无需建立标准曲线，对于具有已知吸收特性的化合物，可直接根据吸光度来计算浓度。

/ Pathlength Correction原理是什么？/

根据朗波——比尔定律（A=ɛ × C × d），在固定波长下，当光程已知时，物质的吸光度与这种物质的浓度具有线性相关性。也就是说，在260nm和1cm光路径下,1.0OD的DNA溶液的DNA浓度是50ng/ul。

但当我们在对微孔板中的核酸进行测量时，由于光程并不是固定的1cm，所以无法直接得出核酸的浓度。如果我们想将朗波——比尔定律应用于微孔板，就需要进行光程校正先确定每个孔的真实液体光程才能得到核酸的浓度。

/ 如何来确定液体光程 /

我们可以通过测量水在IR区域的光吸收来计算微孔板中孔的光程。利用1cm的比色皿分别在975nm和900nm波长下对测定缓冲液的吸光度进行测量，将得到的A975－A900，就可得到叫“K-factor”的参考值。这样我们就可以利用公式1来对微孔板中孔的光程进行测量。当真正的光程确定好了后，我们就可以利用公式2将吸光度换算成在10mm下的校准数值。

/ Pathlength Correction的局限性 /

但Pathlength Correction的技术，并无法应用于所有检测物质，它在某些情况下有一定的局限性。

1. 光程校正方法是基于水在红外区域的光吸收原理设计的。这也限制其只适用于水基缓冲液，或者至少是以水作为主要成份的缓冲液的样本。

2. 由于光程校正将975nm作为校正标准波长，所以要确保样本中不能再有测定物质在975nm波长下的吸光度比水还强。

3. 光程校正不适用于比浊测定法，因为颗粒在红外区域会引起光一定程度的发散，这样基于水在975nm的光吸收原理的光程校正法就不再适用了。

/ u-Nano超微量检测板 /

既然光程校正无法应用于所有样品的浓度检测，那用何种方法才能既不做标曲，又能直接得到样品浓度呢？

奥盛u-Nano超微量检测板搭配FlexA-200全波长酶标仪轻松帮您解决烦恼。

1. 自动将样品吸光度标准化成1cm×1cm比色皿模式下的吸光度

2. 高通量的微量核酸蛋白定量，一次检测1~16个样品，只需2~4μL的样品量，无需稀释，轻松测试。

3. 独立的下位机软件，可快速给出样品浓度和纯度报告。

4. 连续检测只需无尘纸直接擦拭。

文字：精分少女

配图：精分少女  茜茜

排版：茜茜

校对：水果刀  盛夏