PCR黏性光学封板膜用途及使用方法
关于“PCR黏性光学封板膜”,这是一种专门为实时荧光定量PCR(qPCR)实验设计的关键耗材。下面本生将为您详细解释其特点、用途和使用方法。
一、
核心功能与特点
顾名思义,这种封板膜结合了三大核心功能:
光学特性
高透光率:膜体本身由高度透明的聚合物(如聚丙烯或特种复合薄膜)制成,确保在实时荧光定量PCR(qPCR)过程中,光学检测系统能够高效、准确地采集荧光信号,不会因膜材的遮挡或自身荧光而干扰实验结果。
低自发荧光:这是最关键的特性。高质量的光学膜经过特殊处理,其自身产生的背景荧光(本底荧光)极低,可减少噪音,提高信噪比,保证数据的精确性和灵敏度。
黏性密封
强粘合剂层:膜的边缘涂有生物相容性的压敏胶。其作用是提供牢固的气密性密封。
防止蒸发:在PCR的热循环过程中(通常涉及95℃以上的高温),反应体系中的液体会剧烈蒸发。黏性密封能有效防止蒸发和冷凝,避免反应体系体积和浓度的变化,这对于实验的重复性和准确性至关重要。
避免污染:密封功能同时防止了样本间的交叉污染以及外界污染物进入孔内。
封板形式
专为标准96孔板、384孔板或其他多孔板设计,可一次性密封整个板子,适用于高通量实验。
二、
主要应用场景
实时荧光定量PCR
数字PCR
其他需要精确光学检测且防止蒸发的微孔板实验。
三、
使用方法(标准步骤)
准备:
完成PCR反应体系的配制,并将液体转移至PCR多孔板中。
从包装中取出封板膜,切勿用手直接触摸膜的中间区域,以免手上的油脂、灰尘或核酸酶污染膜的光学面。应手持膜的边缘。
检查膜是否有破损或污染。
贴合:
将封板膜有粘性的一面对准PCR板,先从一端(例如长边的一端)对齐并贴合。
然后用手指或压板工具,从已贴合的一端缓缓向另一端推进,确保膜平整地、无气泡地覆盖在板子上。这个操作类似于给手机贴膜,目的是排除气泡。
压紧:
使用专用的板膜滚轮用力、均匀地滚压整个封板膜表面,特别是每个孔之间的区域和板的四周边缘,确保粘合紧密,形成有效密封。
重要:如果没有滚轮,可以用手指用力按压,但务必确保每个孔周围都密封到位。密封不严是导致蒸发和交叉污染的常见原因。
上机运行:
将密封好的PCR板放入实时荧光定量PCR仪中进行热循环反应。仪器的光学盖会直接压在封板膜上进行荧光扫描。
移除:
实验结束后,从仪器中取出板子。通常从一角小心地揭开封板膜并丢弃。注意:反应后的板内可能含有扩增产物,是重要的污染源,操作时应戴手套,并将废弃的板子和封板膜作为生物危险废物处理。
总结
PCR黏性光学封板膜是为qPCR实验“量身定做”的密封解决方案。
它平衡了优异的光学透性和可靠的气密密封性两大核心需求,是确保q实验结果准确、可靠的基础保障。在选择时,务必确认其适用于qPCR且具有低自发荧光的特性。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需具体产品资料请咨询技术老师或品牌商。
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