辅而为重，细致入微 | 共绘生物制药美好蓝图！

伴随着以蛋白抗体类药物、寡核苷酸药物、mRNA 疫苗、基因和细胞治 疗为代表的生物制药领域的蓬勃发展，使我们在治 疗各种棘手疑难杂症时有更多选择的机会。其中每一款新药的研发都伴随着各种成功和失败，而持之以恒的研究工作始终引领我们通往成功的彼岸，其中生物制剂中的辅料和生产工艺残留，会直接影响药物的安全性、有效性和稳定性，因此我们着力从辅料、载体及工艺残留三个方面去开发切合实际样品分析的色谱方法，为生物药品的质控分析提供更多的参考和思路。

安捷伦在 2021 年初推出了生物制药中辅料及生产工艺残留分析解决方案的第 一版，重 点关注蛋白抗体药物和基因，以及细胞治 疗（CGT）方面相关的辅料和工艺残留物分析，随着近一年国内在 mRNA 疫苗和寡核苷酸药物领域的快速发展，我们应用实验室也开发出更多的分析方法，增加了 mRNA 疫苗和寡核苷酸领域的新型递送载体的分析，以及更多的工艺过程中带入的残留物分析方案。

生物制药产品制剂中

通用型辅料和常见工艺残留分析

文集中涉及到大家比较关注的吐温 20 和吐温 80 的分析方案，可以采用衍生和荧光检测方法对蛋白溶液中的吐温 80 进行分析，同时也可以采用混合基质的色谱柱对蛋白溶液中的吐温 80 分离后用 ELSD 进行检测。当然对于新型的表面活性剂泊洛沙姆（P188）我们也有对应的方案。进一步为了满足更多应用需求，我们开发了一针进样同时分析吐温 80（吐温 20）和泊洛沙姆的方法（图 1），将分析的效率大大提高。

图 1. 同时分析实际蛋白制剂中的 P188 和吐温 20 所得到的色谱图

基因和细胞治 疗

（CGT）药物辅料和工艺残留分析

在基因和细胞治 疗的产品中我们除了关注相关的辅料分析，还更多的考虑了整个生产工艺过程中的残留对产品的影响，因为 CGT 的产品一般都是直接注射进入人体内，对制剂的质量要求更高，产品中的残留物种类和残留量直接决定制剂的品质，因此我们提供了多种残留物分析的解决方案。包括最令大家头疼的聚乙烯亚胺（PEI）残留分析，我们开发了 RP-LC 的方法，以 1290 Infinity II ELSD 作为检测器，最 低可以检测到 1mg/L 浓度的PEI残留（图 2）。同时我们还建立了吐温 20、Triton X-100 和碘克沙醇等等残留物的分析方法，可以为 CGT 产品的安全性提供更多的保障。

图 2. 浓度为 1mg/L 的 PEI 的色谱图（S/N=42）

mRNA 疫苗或核酸药物递送载体分析

文集第二版最 大的亮点是我们增加了 mRNA 疫苗和寡核苷酸药物递送载体的分析方案。载体一直是核酸类药物成功递送的关键，国外知名药企持有这些递送载体的专 利权，当然国内的研发企业也在加紧布局这方面的技术，所以对于递送载体的有效分析，可以让大家的研究工作如虎添翼。我们建立了脂质纳米粒（LNP）的 HPLC-ELSD 分析方法，对其中的几种脂质能够得到较好的分离（图 3），而且在稳定性和灵敏度方面也有非常出色的表现。同时基于安捷伦强有力的单杆质谱的技术平台，我们开发了 LC-ELSD-MSD 并联的分析方法，为深入做脂质体成分含量和杂质定性研究的团队提供强大的分析技术。更进一步开发了极具挑战性的分析方案，包括吐温、司盘、角鲨烯和阳离子纳米脂质同时分析的方法，适用于复杂递送载体的分析。

图 3. 脂质纳米粒（LNP）中四种物质的对照品溶液色谱图

结语

生物制药领域的发展方兴未艾，制剂中辅料、载体和相关工艺残留分析的道路长且曲折，相信秉持至广大而精细微的精神，我们一定可以不断拓宽前行的道路，为生产高质量的生物药贡献一份力量。