SpInsights离心洞察第一期: 如何提高密度梯度离心纯化的重复性
众所周知，密度梯度超速离心（DGUC）是基于密度的高分辨分离金标准。为获得 DGUC分离的最 佳效果，必须精心制备密度梯度液。手工制备密度梯度液，不但耗时且具有挑战性。正因如此，离心前，通常需要对密度梯度液的质量和分布进行表征，以确保超速离心时样品得到充分分离。
密度梯度溶液制备
制备密度梯度溶液时，一般按密度递增或递减的顺序添加溶液。可以直接使用不连续梯度，或者允许其以受控方式扩散，生成连续梯度。通过实践和有效操作以避免混合，可以制备出符合特定分离要求的优质密度梯度溶液。
密度梯度溶液表征
确认密度梯度溶液具有预期的分布，是确保样品得到适当分离的重要环节。接着，采取手动或自动移液、从管底吸液等方法对梯度溶液进行细分。离心前后，可以根据溶液原料，通过单独或组合测量密度、折光率和吸光度（如 UV/Vis）对梯度溶液分布进行表征和优化。
已制备梯度溶液的使用和储存
投入时间和精力制备、表征密度梯度溶液之后，就可以进行超速离心分离。梯度溶液久置会发生扩散，不受控制的扩散会导致不良或不一致的结果。因此，梯度溶液最 好是制备后尽快使用。或者，梯度溶液经优化后可以在低温下存放更久。
小结
通过精密操作制备，很容易获得高质量梯度溶液并对其进行表征，随后可以通过密度梯度超速离心法进行样品高分辨率纯化。
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