【BUNSEN本生】ELISA试剂盒的原理及储存方法?

　　【BUNSEN本生】ELISA试剂盒的原理及储存方法?

　　ELISA试剂盒为捕获抗体具有高亲和力、高特异性、低内毒素的单抗，研究者以刺激剂激活细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。ELISA试剂盒的原理是什么?

　　到目前为止，ELISA法仍在研究当中占有着主流地位，普遍应用使得实验更加方便、经济和准确， ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。LISPOT法来源于ELISA，相比较传统的ELISA法有所突破，是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，传统的酶联免疫吸附法(ELISA法)不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。

　　ELISA试剂盒的原理包括了可以提了两款改良型siRNA用于活体转染。可以增加siRNA-转运试剂复合体的稳定性。而SIRNAPLUS则不需要转运试剂，其转运载体就整合在siRNA分子上。为了解决这一问题，公司开发了一个试剂盒，可以将shRNA插入到基因组的特定位置。这一靶向整合试剂盒采用锌指核酸酶技术，将 shRNAELISA试剂盒插入到人类基因组的AAVS1位点。这一技术将shRNA定位在一个地方，使影响shRNA表达水平的一个重要变量固定下来。

　　ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验。在这种方法中，通常标准配体是固定的，通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键。通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体，而且一开始抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量。第二种抗体能识别抗体的末端，在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应，从而使溶液显色。

　　ELISA试剂盒：准备与贮存

　　ELISA试剂盒收到后立即贮存于2-8℃下，效期见试剂盒标签;所有成分在2-8℃下可保存至有效期。使用前，所有试剂平衡至室温，不同批次的试剂不能交换使用。

　　1. 包被板，96孔，包被了抗人胎球蛋白A抗体;微孔板固定于板架上，密封于含有干燥剂的铝箔密封袋内;贮存于2-8℃至有效期。

　　2. 胎球蛋白A示踪抗体，1瓶，0.6 ml，浓缩，HRP标记的抗人胎球蛋白A示踪抗体溶于稳定的蛋白基质中;此试剂使用前需用示踪剂抗体稀释液进行稀释;贮存于2-8℃至有效期。

　　3. 示踪抗体稀释液，1瓶，11ml，即用，Trizma盐酸溶于缓冲液;根据实验步骤用于示踪抗体稀释;贮存于2-8℃至有效期。

　　4. 试验缓冲液，浓缩，1瓶，11ml，含牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐;建议使用前以1:10比例用双蒸水稀释(如11 ml浓缩+99 ml的双蒸水);贮存于2-8℃至有效期。

　　5. 洗涤液，浓缩，1瓶，20ml，30倍浓缩;试验前需用580ml的双蒸水稀释，混匀;一旦稀释，不含叠氮化物防腐剂的磷酸缓冲盐洗涤液会含表面活性剂;稀释的洗涤液在室温下可保存至效期。

　　6. HRP底物液;1瓶，12ml，含过氧化氢的TMB底物液;贮存于2-8℃至有效期。

　　7. 终止液，1瓶，12ml，0.5M硫酸，贮存于2-8℃至有效期。

　　8. 胎球蛋白A标准品，5瓶，含胎球蛋白A，不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质;各标准品浓度见瓶子标签;3次冻存周期使用后，所有标准品保存至-20℃或更低。

　　9. 胎球蛋白A质控，2瓶，含人胎球蛋白A，不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质，各质控的精确浓度范围见瓶子标签，3次冻存周期使用后质控保存至-20℃或更低。

　　保存——如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。