限量试用 | LAMP非特异性扩增克星来了！Tte UvrD Helicase让结果更纯净

等温扩增技术（Isothermal Amplification）是一种在恒定温度下高效扩增特定核酸序列的分子生物学技术。与传统PCR技术相比，该技术无需热循环仪，仅需简单的恒温设备即可完成扩增反应，具有操作简便、反应快速、灵敏度高等显著优势，这些特性使其在即时诊断领域展现出巨大的应用潜力。在众多等温扩增技术中，LAMP（环介导等温扩增）技术因其高灵敏度和强特异性而成为主流选择。然而，该技术也存在明显局限：其依赖4-6条特异性引物和Bst DNA聚合酶的复杂反应体系，在实际应用中容易产生非特异性扩增，导致假阳性结果，严重制约了其在临床诊断中的应用可靠性。

最新研究表明，引入Tte UvrD Helicase可有效突破这一技术瓶颈。Tte UvrD Helicase源自嗜热菌Thermus thermophilus，热稳定性强，具有极强的DNA解旋能力，可高效解开双链DNA，适用于高复杂度模板的处理，显著降低LAMP实验中的非特异性扩增^[1]。

图1. Tte UvrD解旋酶在HDA扩增技术中的原理图示意^[2]

在LAMP反应中，高浓度引物（如FIP/BIP）容易形成引物二聚体或与非目标序列结合，导致非特异性扩增。Tte UvrD Helicase能够主动解旋双链DNA，包括由引物二聚体或非特异性退火形成的非目标结构，从而显著减少因引物错误配对或模板二级结构引起的假阳性扩增，提高LAMP反应的特异性。

在此，我们向您推介翌圣生物全新研发的Tte UvrD Helicase（Cat#14572），该产品能在60–75℃高温下保持高效活性，显著提升等温扩增技术的特异性和速度，避免非特异性扩增。该酶尤其适用于各种等温扩增技术，如解旋酶依赖扩增（HDA）、环介导等温扩增（LAMP）、重组酶聚合酶扩增（RPA）、滚环扩增（RCA）和链置换扩增（SDA）等。

翌圣Tte UvrD Helicase（Cat#14572）

分别使用两组LAMP引物配制LAMP反应体系，分别在每组体系中设置添加10 ng Tte UvrD Helicase实验组和未添加Tte UvrD Helicase对照组，结果显示翌圣Tte UvrD Helicase的引入能有效消除LAMP体系的非特异性扩增，且不影响阳性样本的检测。

将20 ng Tte UvrD Helicase分别与核酸底物孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明，翌圣的3个批次Tte UvrD Helicase均未检测出核酸外切酶、切口酶或RNase 残留，为您的实验结果准确性与可靠性保驾护航。

图3. Tte UvrD Helicase核酸外切酶、切口酶、RNase残留检测结果

参考文献：

[1] Bokelmann L, Nickel O, Maricic T, et al. Point-of-care bulk testing for SARS-CoV-2 by combining hybridization capture with improved colorimetric LAMP[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 1467.

[2] Barreda-García S, Miranda-Castro R, de-Los-Santos-álvarez N, et al. Helicase-dependent isothermal amplification: a novel tool in the development of molecular-based analytical systems for rapid pathogen detection[J]. Analytical and bioanalytical chemistry, 2018, 410: 679-693.

翌圣生物科技（上海）股份有限公司成立于2014年，是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事核苷酸、蛋白、细胞和类器官四大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。公司兼备核心技术自主研发和规模化生产能力，核心产品数量达数千种，覆盖分子克隆、qPCR、NGS、体外转录、抗体、蛋白纯化及分析、细胞培养、转染、报告基因检测和类器官等多种系列，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。