国产ELISA试剂盒如何正确稀释血清?
摘要:国产ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤,以及它的注意事项,了解了以下的情况后,该如何正确对国产ELISA试剂盒进行浓度分析。
**、国产ELISA试剂盒浓度分析
兔子雌二醇试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中样本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中样本浓度。
第二、国产ELISA试剂盒产品说明
1.有效期:6个月,保证为Zxin批次。
2.经营种类:进口分装和原装、国产。
3.性状:试剂盒kit。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。
第三、ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤:
先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释,将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为Z适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。
第四、国产ELISA试剂盒使用注意事项
1. ELISA试齐9盒从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如来用完,板条应装进密封袋中保存.
2.浓佚涤液可能会有结晶析出.ELISA试剂盒稀释时可在水浴中加沮助溶,洗涤耐不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其正确性,以脏免4m误差。
钟内,如标本数目多,推荐使用排枪加样。
4. EL工SA讨济l盒如标本中待测物质含量过高,请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数。
5.封板膜只限-次性使用川刀避免交叉污染。
6.本试剂不1司批号组分不得混用.显色剂E请避光保存。
7.严格按照诊胡月书的操纵进行,EL工SA试剂盒试验结果判定必须以酶标仪读数为谁。
8. ELISA试剂盒所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
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