苦丁茶中孔雀石绿检测的整体解决方案——BJS 202206

称取2 g试样（精确至0.001g）于50 mL聚丙烯离心管中，准确加入120 μL混合内标中间液，再加入10 mL水，涡旋混匀30 s，浸泡30 min。加入15 mL乙酸-乙腈溶液，涡旋提取1 min，再加入CNW dSPE 萃取管（SBEQ-CA8158-BZ），盖上离心管盖，剧烈震摇1 min，4000 r/min离心5 min，吸取2 mL上清液加到CNW QuEChERS净化管（SBEQ-CA8769-25）的15 mL离心管中，涡旋混匀1 min，4000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm有机相微孔滤膜，滤液供液相色谱-串联质谱仪测定；其中3个加标水平分别为：7.5μg/kg、15μg/kg、75μg/kg。

a）色谱柱：Athena C18-WP，4.6 mm*150 mm，5 um，（PN：LAEQ-461572）；

b）柱温：30℃；

c）流速：0.80 mL/min；

d）进样量：10 μL；

e）流动相：A：含0.1%甲酸的5mM/L乙酸铵水溶液，B：乙腈；

表1、液相色谱梯度洗脱条件

a）液相色谱-质谱联用仪API 4000；

b）离子源：电喷雾离子源(ESI)；

c）检测方式：多反应监测(MRM)；

d）扫描方式：正离子模式；

e）离子源温度：550 ℃；

表2、待测目标化合物定性、定量离子对及电压参考条件

图1、混合标准溶液（10.0 ng/mL）谱图

图2、苦丁茶基质空白谱图

图3、苦丁茶基质中水平加标（15 ug/kg）谱图

*由于数据较多，仅罗列部分谱图展示

表3、苦丁茶基质三水平加标回收率

参照标准《BJS 202206 苦丁茶中孔雀石绿的测定》，开发验证了苦丁茶中孔雀石绿的应用方案，实验结果表明，苦丁茶中孔雀石绿和隐性孔雀石绿加标回收率均在 90%-105%，回收率高，RSD<10%，精密度好，符合标准对苦丁茶中孔雀石绿的测定要求。