配方奶粉&母乳，差距究竟有多大？

乳糖-N-新四糖CAD测定结果

1.1 依据公告文件方法，完成系统适应性测试，溶剂连续进样至少五次，待液相色谱响应稳定后在电雾式检测器条件下进行系统适用性测试。满足下表条件后可进行乳糖-N-新四糖及乳糖-N-新四糖果糖异构体含量测试，测定结果均可满足系统适应性要求，结果见下表所示。

表1. 系统适用性要求及测试结果

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1.2校正曲线测定结果

乳糖-N-新四糖通过紫外检测器测定，其线性校正曲线结果如下图所示，从结果可知，乳糖-N-新四糖在160-240μg/mL浓度范围内，强制过零点，通过一次线性拟合，结果良好，相关系数R²为0.99941，满足＞0.995要求。

乳糖-N-新四糖果糖异构体通过CAD检测器测定，其线性校正曲线结果如下图所示，从结果可知，乳糖-N-新四糖果糖异构体在6-100μg/mL浓度范围内，通过二次线性拟合，结果良好，相关系数R²为0.99996。

1.3定量限测定结果

对乳糖-N-新四糖果糖异构体的定量限进行考察，结果为6.0μg/mL。按标准中样品浓度0.2 mg/mL计算，乳糖-N-新四糖果糖异构体的检出浓度可达0.3%，高于当前标准公示1.0%限度要求，完全满足原料质控的需求。

1.4实际样品分析测定结果

运用本文方法，串联紫外检测器和CAD检测器，完全可以满足对不同批次营养强化剂乳糖-N-新四糖原料中乳糖-N-新四糖（紫外测定）和乳糖-N-新四糖果糖异构体（CAD测定）的含量同时测定的需求，乳糖-N-新四糖果糖异构体CAD结果和乳糖-N-新四糖紫外结果如下图所示。

2′-岩藻糖基乳糖原料CAD测定结果

依据公示方法，通过CAD检测器及对应色谱方法，测定结果下图所示，可满足原料中2′-岩藻糖基乳糖原料中的D-乳糖和二岩藻糖基乳糖含量测定质控的需求。

图 2’岩藻糖基乳糖样品色谱图

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3′-唾液酸乳糖钠盐&6′-唾液酸乳糖钠盐CAD测定结果

依据公示方法，通过CAD检测器及对应色谱方法，结果如下图所示，本方法适用于原料中3′-唾液酸乳糖钠盐及异构体3′-唾液酸乳果糖，6′-唾液酸乳糖钠盐和乳糖含量同时测定质控的需求。

图 乳糖、3′-唾液酸乳糖钠盐&6′-唾液酸乳糖钠盐标品色谱图（点击查看大图）

通过紫外检测器串联电雾式检测器（CAD）成功复现了母乳低聚糖中LNnT(乳糖-N-新四糖)当前公示的国家标准方法。虽然待测物没有明显的紫外吸收，但对于原料中含量较高的主成分，公示方法采用紫外检测器末端吸收205nm进行测定，效果较为理想；而对于需要重点控制的主要杂质乳糖-N-新四糖果糖异构体，由于限度较低，公示标准采用了更加灵敏的CAD检测器进行分析，方法学考察结果显示，灵敏度和重现性均符合标准要求。

基于CAD检测器对无/弱紫外吸收物质检测的优势，其他类型的母乳低聚糖，如2′-FL（2′-岩藻糖基乳糖）、3′-SL（3′-唾液酸乳糖钠盐）及6′-SL（6′-唾液酸乳糖钠盐），也同样适用。同时，本方法也可用于婴幼儿配方奶粉、调制乳粉(儿童用)以及特殊医学婴儿食品中LNnT含量的测试，可作为相关行业分析人员进行该领域分析的重要参考。