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新品上市 | Tth DNA聚合酶——聚合酶中的多面手

来源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 更新时间:2022-12-15 00:00:00 阅读量:66
导读:Tth DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus thermophilus HB8中发现的耐热DNA聚合酶,在Mg2+存在的条件下,该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性,无3′-5′ 核酸外切酶活性,可广泛用于PCR扩增反应。在Mn2+存在的条件下,该酶在55-70℃条件下表现出较强的逆转录活性,可兼容复杂模板,且没有RNase H活性,在一步法RT-PCR反应中表现出卓越的性能。
对于RNA样本检测,一般需要使用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA,再通过DNA聚合酶进行PCR扩增,整个反应过程需要双酶协同工作,对于体系优化具有一定挑战。针对分子诊断试剂厂家使用痛点,翌圣生物推出一款兼具逆转录酶活性和DNA聚合酶活性的高品质Tth DNA聚合酶。

 

Tth DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus thermophilus HB8中发现的耐热DNA聚合酶,在Mg2+存在的条件下,该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性,无3′-5′ 核酸外切酶活性,可广泛用于PCR扩增反应。在Mn2+存在的条件下,该酶在55-70℃条件下表现出较强的逆转录活性,可兼容复杂模板,且没有RNase H活性,在一步法RT-PCR反应中表现出卓越的性能。

 

产品特点

  • 蛋白纯度(SDS-PAGE)≥95%;

  • 无核酸外切酶、DNase、RNase残留;

  • 热稳定性高达95℃;

  • PCR扩增检测灵敏度可达100 pg。

 

性能展示

无核酸外切酶残留

图1.核酸外切酶残留检测:将10 U 翌圣Tth DNA聚合酶加入到 0.5 μg λDNA- Hind Ⅲ digest中,于37℃孵育4小时,之后进行琼脂糖凝胶电泳 ,结果显示DNA 条带未发生变化,说明翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品无核酸外切酶残留。

 

无DNase残留

图2.DNase残留检测:将10 U 翌圣Tth DNA聚合酶分别加入到 0.5 μg λDNA中,于37℃孵育16小时,之后进行琼脂糖凝胶电泳 ,结果显示DNA 条带未发生变化,说明翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品无DNase残留。

 

无RNase残留

图3.RNase残留检测:将10 U Tth DNA聚合酶分别加入到 0.5 μg 293T RNA中,于37℃孵育2小时,之后进行琼脂糖凝胶电泳 ,结果显示RNA 条带未发生变化,说明翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品无RNase残留。

 

热稳定性高达95℃

图4.翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品热稳定性测试:将Tth DNA聚合酶分别置于45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃、95℃热处理15分钟后进行RT-qPCR实验,结果显示热处理后Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品与未处理组性能保持一致,说明翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品热稳定性高达95℃。

 

PCR扩增检测灵敏度可达100 pg

图5.翌圣Tth DNA聚合酶(Cat#14607ES)产品PCR扩增灵敏度检测:以293 gDNA为模板,对human GAPDH基因进行检测,结果显示其PCR扩增检测灵敏度可达100 pg。
 

 

相关产品

产品定位

产品名称

产品货号

Tth DNA聚合酶

Tth DNA Polymerase (5 U/μL)

14607ES

热启动Taq

Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA Polymerase, 5 U/μL

10726ES

逆转录酶

Hifair® Reverse Transcriptase 第三代耐热逆转录酶

11111ES

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free 第三代耐热逆转录酶(无甘油版)

11302ES

鼠源RNase抑制剂

Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES

Murine RNase Inhibitor(200 U/µL)

10703ES

防污染UDG

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

14455ES

高纯度dNTP Mix

dNTP Mix(10 mM each)

10124ES

高纯度dUTP

dUTP,100mM Solution 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM)

10128ES

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