赛默飞mRNA疫苗质量控制解决方案，让您放心苗苗苗

2020年初，随着新型冠状病毒疫情在quan球各地爆发，世界卫生组织（WHO）将此疫情定性为大流行。时至今日，尽管quan球疫情防控取得了一定的成果，但新冠病毒仍在变异，疫情不断反复、传播持续蔓延。近日南京本土疫情的出现，又给人们敲响了防控不可松懈的警钟。人类是否能早日战胜这一疫情大流行？疫苗的问世给人们带来了一线曙光。

目前quan球已有12款疫苗获批上市。分别由美国（辉瑞、莫德纳、强生）、德国、英国（阿斯利康）、俄罗斯（伽马利亚研究所、Vector研究ZX）、中国（国药、科兴、康希诺）和印度（巴拉特）药企研发，多数疫苗需接种两剂。疫苗的种类为传统的灭活病毒疫苗、腺病毒载体疫苗和mRNA疫苗。

传统的灭活病毒疫苗和腺病毒载体疫苗大家都比较熟悉了，像国内接种的科兴、国药或者康希诺，就属于灭活疫苗或腺病毒载体疫苗。mRNA疫苗则相对陌生一些，它打破了传统灭活、减毒疫苗的免疫激活模式，创新性地利用人体本身细胞生产抗原，以此激活特异性免疫。mRNA疫苗的保护率极高，能达到90%。在研发上，mRNA疫苗能够快速地更新迭代以应对不断出现的变异毒株，且生产过程短，只需要60-70天。对于新型冠状病毒疫苗的研制，除了抗原设计外，选择合适的载体也是至关重要的。

疫苗佐剂能够帮助机体对免疫原产生有效、持久的免疫应答，是疫苗中不可或缺的部分。英国及美国上市疫苗在大规模接种过程中发生过几次不良过敏反应，经深入研究后，有专家认为PEG（聚乙二醇）是出现过敏反应的源头。由此看出关键原材料、辅料中的杂质残余极可能影响制剂质量属性的关键要素。2020年8月国家药监局药审ZX发布《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则（试行）》及新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则（试行）等5个指导原则。在指导原则中明确规定应明确制剂CF中每种组分的作用及含量，提供佐剂、缓冲液、盐浓度、pH值以及其他辅料的选择依据。

目前获批上市的疫苗佐剂多数集中在微小颗粒或纳米颗粒，包括铝盐、乳剂、脂质体和病毒载体。

脂质体主要由磷酸类脂、胆固醇、硬脂胺等组成的单层或多层双分子夹水结构，可包裹多种疫苗，并有效地将抗原送至细胞对应靶点。其作用机制与铝佐剂相似，具有储存库效应，并可以增强抗原递呈细胞（APC）对抗原的摄入。

由上述介绍可以看出，大部分佐剂都没有紫外吸收，CAD电雾式检测器较传统紫外检测器、ELSD检测器等有着独特的优势，分析物既不需要发色团也不需要离子化，适用于不挥发及半挥发化合物的高灵敏度检测。

Vanquish Flex & CAD

CAD检测器有更高的灵敏度、更宽的线性范围、更好的重现性成为新冠mRNA疫苗质量控制的shou选。本实验利用Vanquish Flex液相色谱系统和Charged Aerosol Detector H电雾式检测器来分析疫苗中的佐剂。

仪器配置：

Vanquish Flex系列

泵：Binary Pump F VF-P10-A（S/N：8306835）

自动进样器：Split Sampler FT VF-A10-A（S/N：1004811）

柱温箱：Column Compartment H VH-C10-A（S/N：6300969）

检测器：Charged Aerosol Detector H（S/N：8318615）

色谱条件：

分析柱：Acclaim 300 C18 150×2.1mm，3.0um (PN:060264 )

柱    温：50℃（配主动预热）

CAD检测器：过滤常数：3.6s，雾化温度：50℃，采集频率：5Hz

流速=0.4ml/min

进样量：10µL

色谱图：

系统适用性色谱图

实验结果与讨论:

PEG(聚乙二醇)、Chol(胆固醇)、DSPC(二硬脂酰磷脂酰胆碱)以及两种自制佐剂在0.25 µg/ml～50 µg/ml范围内线性良好，相关系数R² >0.999。本方法五种组分检测限为0.125 ppm(S/N=3)，定量限为0.25 ppm(S/N=10)。

定量限色谱图

由实验结果可知，本方法利用CAD电雾式检测器直接检测疫苗中的脂质体载体，无需进行前处理，灵敏度高，分离度和重复性好。

样品前处理简单，样品经纯化水稀释后可直接进样分析。

制剂样品色谱图