什么,细胞又污染了!?
细胞培养是当前整个生命科学研究与生物工程中Z基本的实验技术,干细胞生物学及再生医学等的发展及其应用在很大程度上基于细胞培养技术的发展。
细胞培养是将真核细胞或原核细胞培养在受人工控制的状态下,于体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能。
通过细胞培养可以获得大量细胞,研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等,为生命科学和生物医学各种研究奠定物质基础;此外,细胞培养技术已成为商品化生物技术产品的核心,为疫苗及细胞代谢产物等大规模制备生产提供现实支撑。
BUT
实验很丰富 现实很残酷
初次接触细胞培养实验的小伙伴
通常会面临一个令人头痛的问题
细胞污染!!!
培养的细胞作为生物个体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,对实验结果造成潜在的威胁,这种威胁还会随着污染时间的延长而增加。
培养环境中的物理、化学及生物因素都可能造成污染:
物理因素如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光) 通过影响细胞培养体系中的生化成分,从而影响细胞代谢。
未纯化的物质、试剂、水、血清、生长辅助因子及储存试剂的容器都可能成为化学性污染的来源。
生物因素如外界的昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染,其不仅影响培养细胞的分离纯化,产生的代谢产物可能会对培养细胞产生毒害作用,从而严重干扰实验结果。
为有效预防污染,保证实验体系的稳定性和可靠性,有效识别细胞培养污染的途径及其危害性,建立细胞培养规范的操作方法及规章制度是非常重要的:
建立细胞冻存库
分建主细胞库和工作细胞库,对每一个冻存标本都应明确记录细胞的性质、代数及有无污染。同时还应建立规范的检测程序进行菌检及细胞鉴定。详细的记录有利于对细胞的遗传及生理特性在常规传代培养中因突变、污染及各种原因导致的改变进行分析;且避免细胞在连续传代过程中因生物特性发生改变而造成的实验结果偏差。
良好的实验环境
保证良好的实验环境,除采取规范的操作程序,注意实验仪器及培养液等的无菌处理外;移取,倾倒液体操作过程中产生的飞沫、废液处理时产生的气溶胶等都可能沉积于超净工作台内物体的表面,造成潜在污染的进一步传播,其不仅影响细胞培养实验结果,还可能对实验人员的安全产生威胁。由此可见,为减少交叉污染的发生,除提升安全意识,严格遵守实验规章制度,选择适宜的移液及废液收集工具也至关重要!
Gilson
帮您多方位减少细胞污染
细胞培养、传代、日常换液无忧
移液工具(电动助吸器Macroman®):
马达平稳:减少物理因素对细胞造成的损伤;
速度多档可调,具逐滴模式:轻松设定,适用性广,提升工作效率;
具侧面支架:轻松置于实验台上,避免移液管接触工作台造成污染;
机身可使用酒精擦拭消毒、UV照射灭菌;鼻嘴和硅胶适配器可高温高压灭菌:保障无菌性,避免实验污染;
内置滤芯:避免气溶胶污染,保护实验人员。
废液收集工具(安全吸液工作站Safe Aspiration):
体积小,具支架:轻松置于工作台内,减少外在操作;安全放置手柄,避免吸嘴接触工作台造成污染;
速度可调,真空吸液:提升工作高效率,减轻实验负担;
内置滤芯:避免气溶胶污染,减少实验室风险,保护实验人员;
液面监测系统:安全提示,避免样液外溢;
与液体接触部分均可高温高压灭菌:保障无菌性,减少实验室风险;
可选工具包:不同形式的吸嘴设计,适用于各种培养皿。
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