Ceturegel®基质胶应用——基质胶塞实验（plug assay）

2024-01-11 00:00:00 22阅读次数

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血管生成（angiogenesis ）会与伤口愈合、炎症、类风湿性关节炎、糖尿病视网膜病变、黄斑变性和肿瘤生长等存在着密切的关联。在生物体生长过程中，血管生成是新组织生长的重要组成部分。在成年期，除在特殊器官中受到严格调节的周期性事件外，由于促血管生成和抗血管生成内源性因素之间的平衡，几乎每个正常组织都缺乏大量的生理性血管生成。当促血管生成方向的平衡被打乱时，微血管内皮细胞 (EC) 会转变为血管生成表型，从而开始血管生成反应，该反应可以被消除或加速。在研究过程中所涉及到血管生成实验，传统的体内血管生成实验方法有：角膜微袋、肠系膜、海绵/基质植入物、圆盘分析 (DAS)、斑马鱼等^【1】。

在模型生成过程中最常用的细胞生长维持基质物就是来源与EHS小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底膜制备物——基质胶来保证血管或胶塞实验成功。Ceturegel^®基质胶不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒），超低内毒素含量，并全部经过支原体检测保证无支原体污染，包括基本浓度、高浓度、低生长因子等不同类型基质胶。

Ceturegel^®基质胶

应用方向

产品特点

安全性高：不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒）；
浓度多样性：浓度范围在8~20 mg/mL之间；
批次稳定性好：严格生产质检过程保证批次间性能稳定；
低内毒素：内毒素含量＜8 EU/mL；
污染物检测： 经检测无支原体和细菌、真菌残留；
产量高：产量在50L/月以上；
兼容性好：可与任何类型的细胞培养基兼容。

基质胶塞实验（plug assay）

实验步骤

^【2】

取3~7周的BALB/c nude小鼠放置在层流净化屏障系统内饲养。
从-20℃冰箱内取Ceturegel^®基质胶放置4℃下 12h，待其变成液态。
将小鼠按实验分对照组、VEGFA组、肝素钠组和VEGFA+肝素钠组。
对照组裸鼠经皮下注射Ceturegel^®高浓度基质胶0.5 mL，VEGFA与肝素钠组裸鼠分别经皮下注射添加VEGFA (20 μg/L) 、肝素钠 (50U/mL)的基质胶0.5 mL，VEGFA+肝素钠组裸鼠皮下注射物为混匀VEGFA (20μg /L) 和肝素钠 (50U/mL) 的基质胶0.5mL，皮下注射部位为裸小鼠的腹中线附近。
1周后处死裸鼠取出基质胶塞，严格根据Drabkin试剂进行血红蛋白浓度测定。

注：Drabkin试剂配制: 碳酸氢钠1.0g，氢化钾0.05g，高铁0.2g，加蒸馏水至1 000ml即可，置4C冰箱保存。

实验结果

图.BALB/c nude培养7天培养栓塞结果

FAQ

实验操作要注意哪些事项？

1、高浓度基质胶极易凝固，接种前基质胶及注射针管冰上预冷！
2、裸鼠皮下注射胶体积较大，进针深度要把握好，慎防漏液！
3、正常饲喂，注意观察注射基质胶部位，稳定1-2周观察即可！

产品选择

类型	货号	产品名称	应用方向
即用型 3-6 mg/ml	40182	Ceturegel® Matrix Ready-to-use，LDEV-Free基质胶	适应于细胞培养、贴壁、侵袭和迁移实验以及细胞分化等研究
基本浓度 8-12 mg/ml	40183	Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶	适应于2D和3D培养、侵袭和迁移实验，也可以用于体内成瘤实验
基本浓度 8-12 mg/ml	40184	Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶	主要应用于需要颜色检测如荧光检测实验等
高浓度 ≥18mg/ml	40187	Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶	主要应用于如血管生成、凝胶栓塞和体内成瘤实验（对于血管生成建议基质胶终浓度要≥10mg/ml）
	40189	Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基质胶
	40188	Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶
低生长因子	40185	Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基质胶	主要是排除生长因子对实验的干扰。应用于与生长因子、信号通路等相关研究。无酚红的也用来做类器官培养
低生长因子	40186	Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶	主要是排除生长因子对实验的干扰。应用于与生长因子、信号通路等相关研究。无酚红的也用来做类器官培养
干细胞用	40190	Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基质胶	主要用于如hESC，iPSC等干细胞培养
类器官用	40191	Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶	类器官培养专用基质胶
鼠尾胶原	40125	Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾胶原蛋白I（大鼠源）	侵袭和迁移。培养或分化研究
鼠尾胶原	40136	Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail 鼠尾胶原蛋白I型（小鼠源）	侵袭和迁移。培养或分化研究

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产品名称	产品编号	规格
Cebrary^® Intestinal Organoid Growth Medium (Mouse) 小鼠肠类器官生长培养基	41426ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肠癌类器官生长培养基	41427ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Gastric Cancer Organoid Growth Medium (Human) 胃癌类器官生长培养基	41428ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Liver Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肝癌类器官生长培养基	41429ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Breast Cancer Organoid Growth Medium (Human) 乳腺癌类器官生长培养基	41430ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肺癌类器官生长培养基	41431ES60/76	100/500mL
Cebrary^® Esophageal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 食管癌类器官生长培养基	41432ES60/76	l00/500mL
Cebrary^® Ovarian cancer Organoid Growth Medium (Human) 卵巢癌类器官生长培养基	41433ES60/76	l00/500mL
Cebrary® Pancreatic cancer Organoid Growth Medium (Human) 胰腺癌类器官生长培养基	41434ES60/76	l00/500mL