DNA双螺旋模型的发现让人们认识到，生命最根本的基石是4个“碱基字母”及其相应的“书写规则”。现代分子生物学的发展对DNA的研究有了更精准的认识；DNA提取是分子生物学实验中必不可少的实验步骤。
土壤中的微生物多种多样，同时，土壤样本中常含有大量的抑制剂（腐殖酸、黄腐酸等腐殖质），腐殖质容易与核酸一起被抽提，且会影响DNA聚合酶活性，进而影响下游PCR及测序过程。获取土壤样本微生物DNA是土壤研究的第一步，也是下游实验能否成功进行的最关键的一步。
样本微生物含量低：增加样本量；调节样本的含水量等因素来优化裂解条件。
裂解不充分：增加物理破碎的时间和次数。
洗脱不充分：建议二次洗脱增加产量或提高洗脱体积。
难点二：提取的核酸出现降解，跑胶有弥散现象
优化裂解条件，避免过度裂解，降低物理破碎的力度；
操作过程中是否有污染 DAase，造成 DNA 降解；
可能有大量RNA的污染，可加入RNase I。
难点三：提取 DNA 的纯度过低，残留抑制物影响下游实验
样本复杂含有有机质高：需要特别去除杂质，必要时可以使用 PBS 清洗土壤并收集菌体；
杂质去除效果差，杂质残留多：选择有去除蛋白、腐质酸等复杂抑制物的去杂剂；
乙醇等没有充分挥发：晾晒步骤要充分，使醇挥发。
MolPure® Soil DNA Kit（Cat#18815ES），能高效获得土壤DNA，有利于实现后续对土壤微生物生态系统多样性的研究。
操作便捷：室温操作，仅需35min即可回收DNA。
产量高：独特的玻璃珠能高效裂解土壤微生物，释放更多DNA，最大限度地提取其产量。
适用范围广：适合花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、黑土等各类型土壤。
纯度高：有效去除土壤中腐殖酸、重金属离子等杂质，并与离心柱法纯化相结合，提高了DNA的纯度。
图1 土壤DNA提取操作流程图
250mg池塘土壤样本，分别用18815ES和竞品提取，洗脱体积50μL，18815ES相对竞品展现出更优异的DNA浓度和纯度。
表1 DNA提取浓度和纯度
图2 土壤DNA琼脂糖凝胶电泳图
肠道微生物的种类、数量、生理活动等，参与影响人体多种生理机能，并与部分疾病的发生紧密相关。粪便中含有的成分非常复杂，包括包括水分、蛋白质、无机物、脂肪、未消化的食物纤维、脱了水的消化液残余、维生素K、维生素B等，因此从粪便中提取核酸并非易事。
难点一：粪便中革兰氏阳性菌难以破壁
加入裂解液后充分震荡混匀；
针对含革兰氏阳性菌等较难裂解的粪便样本，可提高样本裂解的温度。
难点二：提取 DNA 中的残留物质抑制下游实验
转移上清时避免吸到粪便颗粒；
去除杂质时，应充分震荡混匀；
对于非常干燥的粪便样本，需要适当减少样本量。
MolPure® Stool DNA Kit 粪便 DNA 提取试剂盒（Cat#18820ES），能高效提取粪便DNA，有利于实现后续对肠道微生物生态系统多样性的研究。
操作便捷：室温操作，仅需35min即可回收DNA。
产量高：独特裂解液配方，释放更多DNA，最大限度地提取其产量。
纯度高：独特的杂质去除剂配方，能很大程度去除粪便中的杂质，并与离心柱法纯化相结合，提高了DNA的纯度。
图3 粪便DNA提取操作流程图
来自8位自愿者的粪便样本，取200mg样本，采用18820ES和竞品提取粪便DNA，洗脱体积50μL， 18820ES相对竞品展现出更优异的DNA浓度和纯度。
表2 粪便DNA提取浓度和纯度
图4 粪便DNA提取琼脂糖凝胶电泳图
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产品编号 |
产品名称 |
产品应用 |
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18815ES |
MolPure® Soil DNA Kit |
土壤DNA提取 |
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18820ES |
MolPure® Stool DNA Kit |
粪便DNA提取 |
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产品编号 |
产品名称 |
产品应用 |
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18700ES |
MolPure® Cell/Tissue DNA Kit |
细胞/组织DNA提取 |
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18725ES |
MolPure® Marine Animals DNA Kit |
海洋动物DNA提取 |
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18730ES |
MolPure® Blood DNA Kit |
血液DNA提取 |
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18780ES |
MolPure® Micro DNA Kit |
微量DNA提取 |
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18800ES |
MolPure® Plant DNA Kit |
植物DNA提取 |
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18801ES |
MolPure® Plant Plus DNA Kit |
多糖多酚植物DNA提取 |
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18806ES |
MolPure® Bacterial DNA Kit |
细菌DNA提取 |
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18812ES |
MolPure® Fungal DNA Kit |
真菌DNA提取 |
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