德国徕卡 共聚焦显微镜 STELLARIS平台上的STED 显微镜

我们的受激发射损耗（STED）技术与STELLARIS共聚焦平台相结合，为您提供超越衍射极限的快速成像方法。以令人惊叹的图像质量和分辨率迅速获得先进的纳米显微成像，同时还保护您的样本。STED超高分辨率显微技术允许您同时研究多个动态事件，因此您可以在细胞环境中探索分子关系和机制。

STED和STELLARIS平台无缝集成，您可以直接通过共聚焦界面轻松使用 STED。只需点击几下，您就可以从样本中获得更丰富的信息，因为每一个细节都很重要。

TauSTED Xtend：锐利。简单。惊艳。

TauSTED Xtend代表了STED成像技术的下一步演进。它将基于寿命的信息与额外的空间信息相结合， 可显著提高分辨率，尤其是在较低的STED损耗光强下，因而能在令人瞩目的纳米尺度上扩展多色实时成像能力。

能力

在纳米尺度上解析结构中的更小细节。以更高的分辨率进行更长时间的实时成像。

潜力

使用标准荧光团，按照您喜欢的STED实验方法进行操作。即使使用单条STED激光谱线，也可进行扩展多色成像。

生产力

直接以纳米尺度的分辨率监测快速过程。在实验进行中即时获得关于结果的反馈。

以令人瞩目的纳米尺度进行温和的多色实时成像

活体样本内的动态成像仍然是富有挑战性的实验方法。为了获得科学相关结果，根据样本和荧光团的不同，照明需要足够低，以避免光漂白和光毒性。

得益于STELLARIS平台，包括最 新一代白光激光器（WLL）、Power HyD检测器和荧光寿命技术（TauSense，FALCON），多色实时成像和功能成像实验已成为共聚焦成像的常规方法。

有了TauSTED Xtend，您可以显著降低激发光和STED光的剂量，这样您就能长时间研究生物过程，即使在纳米级别下也不例外。

在纳米尺度上解析样本中的更小细节

您是否正在寻找超高分辨率策略，以便在时间和空间上跟踪感兴趣的生物目标，同时将外部扰动降至最 低？

与标准共聚焦成像以及传统gated STED方法相比，TauSTED显著提高了分辨率，从而大大降低了激发光和STED光的剂量。

TauSTED Xtend进一步提高了可达到的最 大分辨率，即使在STED损耗光强较低时也能显示明确的信号。

[Translate to chinese:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488. Only 0.5% of STED light reveals much more detail.

使分辨率超越传统极限

TauSTED可测量每个STED实验中采集的基于荧光寿命的信息，并实时测定荧光团的STED响应。无论您使用哪种激发光和STED谱线（589、660、775），这些信息都能让您提高图像质量（信噪比），利用物理原理消除背景中的光子，使分辨率超越基于强度的STED。

TauSTED Xtend代表了STED成像技术的下一步演进，将基于寿命的信息与额外的空间信息相结合。您会看到分辨率显著提升，尤其是在较低的STED损耗光强下，因而能在令人瞩目的纳米尺度上扩展实时成像能力。

STED 和 DNA 折纸术成像：TauSTED 775 对标称尺寸为23纳米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30纳米。比例尺：1微米。

使用您的标准实验方案

您是否希望使用熟悉的实验方案以及生命科学研究中常用的各种荧光标签和标记物，将实验缩小到纳米尺度？

TauSTED Xtend为使用绿色荧光蛋白和荧光团的单色和多色实验提供了新的机会，绿色荧光蛋白和荧光团是生命科学研究中的强大工具，目前在纳米级研究中使用不多。

即使使用单条STED激光谱线，您也可以扩大荧光团选择范围，充分利用STELLARIS的独特光谱能力。

增加在纳米级别上可同时研究的目标数量

多色荧光标记能够揭示细胞内物质之间的关系，因为您可以对具有分子特异性的不同组分成像。

STED 和 STELLARIS 特别适合多色应用。您可以使用光谱红光区域的优选染料、绿光区域荧光蛋白、橙光区域的新型荧光探针。您可以进行多种荧光共定位研究，并以亚衍射的细节分辨它们。

我们的光谱检测技术可提供多达5个支持 STED 的 Power HyD 探测器，可让您增加需要在时间和空间上定位的目标的数量。此外，Power HyD检测器的数字化功能、速度以及1.5纳秒全系统死区时间，保证了在信噪比和背景方面获得出色的图像质量，同时与扩增光子探测器（APDs）相比，每像素停留时间的光子收集量至少增加10倍。

STED 在发育生物学中的应用：果蝇胚胎全标本制备中RNA的smFISH*。探针被直接标记，信号未放大。上图：三色TauSTED 775可获得hb CalFluor 610（青色）、gt Quasar 670（绿色）和eve Quasar 705（紫色）的信号。下图：整个果蝇胚胎的共聚焦成像。样本由英国曼彻斯特大学的 Tom Pettini 提供。
*单分子原位杂交

通过荧光寿命分离扩展多色STED能力

在STELLARIS 上结合STED和FALCON模式，您可以进一步拓宽荧光团的色谱，以纳米级分辨率研究分子间的相互作用，因为可以通过它们的荧光寿命来进行区分。

这些荧光团的发射光谱无法通过传统的强度采集方法进行区分。STED-FLIM与我们的自动相量分离技术相结合，可通过这些荧光团独有的寿命和单个检测器清楚地将它们分离。

STED Separation 在细胞生物学中的应用：STED 775和FALCON STED Separation 技术可以利用不同荧光的寿命来分离具有重叠光谱的荧光样本。在标记了TOM20和微管蛋白的U2OS细胞中，单纯的光子计数强度信息（灰色）显示两种结构没有区别，而STED-FLIM（青色，AF 647- 微管蛋白；品红色，ATTO 647N-TOM20）可以明显区分它们。

在时间和空间上动态监控实验结果

以纳米级分辨率在时间和空间维度实时观察实验中发生的情况。使用TauSTED Xtend，您可以即时评估快速过程并在进行实验时即时接收反馈结果。

一键式光束自动对准，保护您的样本免受过度光照，全自动匹配染料理想的激发波长，确保STED 的高性能。

使用 LAS X Navigator 对大面积区域快速成像，并选择您感兴趣的区域进行 STED 成像。

借助STELLARIS的能力，例如访问原始数据（真实情况）和快速高效进行光子计数，可验证您的结果。

具有出色亮度和分辨率的2D和3D STED 成像

使用STELLARIS STED显微镜，您在2D和3D图像中都可以获得所需的结果，因为分辨率可在x、y和z轴上调节。为了确保在2D和3D中获得最 佳的亮度和分辨率，我们的显微镜提供了优化过的光学设备，以确保整个光谱中激发和STED PSF的最 优重叠，以及由于自适应校正而不会丧失定量能力。

我们专门开发了下列STED WHITE系列物镜，确保为各种STED实验提供优化条件：

• STED WHITE 100x油镜的分辨率最 高，为日常固定样本的成像提供了出色的性能。

• STED WHITE 93x甘油物镜采用motCORR全电动校正环技术，在深入样本观察时为温度波动、折射率不匹配和不均匀性提供自适应校正。

• 使用motCORR的STED WHITE 86x水介质物镜也可进行自适应校正（如前所述），非常适合温和的活细胞应用以及 STED-FCS(1)。

(1) 《High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy》，作者 F. Schneider 等。J. Phys. D: Appl. Phys. 53 164003, 2020。

STED 和 DNA 折纸术成像：TauSTED 775 对标称尺寸为23纳米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30纳米。比例尺：1微米。