通用RNA提取试剂盒(含RNApure)

产品编号：M005

包装规格：50T/100T

产品简介

本公司的离心柱式通用RNA提取试剂盒是一种基于离心柱法从细胞、组织及细菌中高效、高质量地抽提抽提总RNA的试剂盒，所抽提RNA可以用于如反转录、RT-PCR、qPCR、cDNA克隆等下游实验。

本试剂盒抽提总RNA的得率高、纯度高。

下图为本试剂盒与YD、In品牌同类产品的RNA抽提效果对比。样品为50万个293T细胞，洗脱液用量均为50μl，取5μl洗脱样品在1%琼脂糖凝胶中电泳约8分钟后拍照。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。

有效期12个月。

注意事项

• 本产品仅限于科学研究使用。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴护目镜、一次性手套和口罩操作。
• 所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，避免环境中RNA酶污染样品。
• 需自备无水乙醇。

操作步骤

1. 样本处理：
2. 组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1mLLysis Buffer，充分匀浆。
3. 贴壁细胞：吸尽培养基，每10⁶细胞加1mL Lysis Buffer，吹打混匀。
4. 悬浮细胞：离心收集细胞，每10⁶动物、植物和酵母细胞或每10⁷细菌细胞加1mLLysis Buffer，吹打混匀。
5. 室温放置5min，使核酸蛋白复合物完全分离。
6. 每1mL样品中加2mL RNA pure，盖好管盖，剧烈振荡15s，室温放置3min，4℃ 12000 rpm离心15min。
7. 吸附柱预处理：向吸附柱中加入500μLWash Buffer Ⅰ，室温静置2min，4℃ 12000rpm离心2min，弃废液。
8. 小心吸取步骤3中上层无色水相至新管中，并加入200uL乙醇吹打混匀，转移混合物至吸附柱中，室温放置2min，4℃ 12000rpm离心15s，弃废液。
9. 向吸附柱中加入600μL Wash BufferⅡ(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，4℃ 12000 rpm离心15s，弃废液。重复洗涤一次，弃废液。
10. 4℃ 12000rpm离心2min，弃掉收集管。
11. 将吸附柱放入新管中，向膜ZY滴加40-100μL RNase-free water，室温放置2min，4℃ 12000rpm离心2min即得到RNA。

常见问题解答

1.RNA得率低

样本未充分裂解，需降低初始样本量。

2.RNA降解

样本保存不当，样本收集后需立即进行下游实验，或保存于-80℃；

实验相关器皿耗材都应为RNase-free。

3.RNA被污染

上层水相被中间相污染，转移上层水相时，注意不要扰动中间层，并转移体积低于500uL。

4.A260/A280比值低

样本未充分裂解，需降低初始样本量；

样本被污染，离心分层后不要转移全部上层水相；

样本检测吸光度时使用无酶水稀释会造成比值降低，可使用10mMTris-HCl(5)稀释。