总RNA提取试剂

产品编号：M002

产品简介

本公司生产的Lysis Buffer是一种适用于细胞、组织及细菌的总RNA抽提试剂。

包装规格

有效期12个月。

注意事项

• 本产品仅限于科学研究使用。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴护目镜、一次性手套和口罩操作。
• 所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，避免环境中RNA酶污染样品。
• 需自备氯仿或RNA pure，异丙醇，DEPC水(货号：M004)，75%乙醇(DEPC水配制)。

操作说明

1. 样本处理：
2. 组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1mLLysis Buffer，充分匀浆。
3. 贴壁细胞：吸尽培养基，每10⁶细胞加1mL Lysis Buffer，吹打混匀。
4. 悬浮细胞：离心收集细胞，每10⁶动物、植物和酵母细胞或每10⁷细菌细胞加1mLLysis Buffer，吹打混匀。
5. 室温放置5min，使核酸蛋白复合物完全分离。
6. 每1mL样品中加2mL氯仿或RNA pure，盖好管盖，剧烈振荡15s，室温放置3min。
7. 4℃ 12000 rpm离心15min，小心吸取上层无色水相至新管中。
8. 按每毫升最初的Trizol加入5mL异丙醇，颠倒数次混匀，室温沉淀10min。如果希望提取 microRNA 等 小 RNA，推荐-70℃沉淀过夜。
9. 4℃ 12000 rpm离心10min，管底可见RNA沉淀，弃上清。
10. 按每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇，颠倒混匀，4℃ 8000 rpm离心5min，弃上清。
11. 4℃ 5000 rpm离心15s，小心吸尽液体。
12. 开盖室温放置数分钟，待RNA略干后，加入DEPC水溶解，-70ºC冻存。注意：切勿让RNA过分干燥，否则将极难溶解，且测出的A260/280值会低于6。