EMSA PAGE Gel Preparation Kit EMSA PAGE凝胶配制试剂盒

产品简介

凝胶迁移实验(也称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验) (Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)，也称Gel Shift，是一种用于研究蛋白与核酸相互作用的高灵敏实验技术。最初主要用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用于蛋白与DNA、蛋白与RNA相互作用研究。EMSA技术基于进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时，蛋白质与DNA或RNA复合物的迁移速度比游离线性DNA或RNA片段慢，从而导致DNA或RNA迁移位置在与蛋白质结合时滞后。

该试剂盒包含配置EMSA PAGE凝胶的所有试剂，客户可搭配蛋白电泳胶制胶组合（Cat# 80813ES）使用。本试剂盒约可配制30-50块常规大小的EMSA PAGE凝胶，具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。

产品信息

产品组分

储存条件

TBE Buffer (10X)、50% Glycerol和APS室温保存。40% Acr-Bis (39:1)和TEMED Substitute 4ºC避光保存。有效期1年。

操作方法

1. 准备制备凝胶的模具。可以使用常规的制备蛋白电泳凝胶的模具，如我司的蛋白电泳胶制胶组合（Cat# 80813ES）。最好选择可以灌制较薄凝胶的模具(如0.75 mm厚度)，以便于干胶、转膜等后续操作。为获到更好的条带分离效果，可以选择可灌制较大EMSA凝胶的模具。制胶前必须把制胶模具冲洗干净，需特别注意不能有SDS残留。

2. 配置10% APS，如称取0.1 g APS，用蒸馏水溶解，并定容至1 mL，即为10% APS，推荐分装后使用，避免反复冻融。

3. 配制一块常用EMSA PAGE胶(胶板宽度为10厘米)所需凝胶溶液体积：0.75 mm厚度凝胶约5 mL；1 mm厚度凝胶约7 mL；1.5 mm厚度凝胶约10 mL。均含约0.5 mL的余量。

4. 制胶

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，并根据下表配制凝胶：

备注：通常10-30分钟内胶会凝固。具体的凝固时间和温度及光照有关，上表中10% APS和TEMED Substitute的正常推荐用量是室温为25ºC时的推荐用量。为达到与25ºC时相近的凝固时间，当室温低于25ºC时，可以适当增加10%凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的用量，例如20ºC时建议使用正常推荐用量的1.5倍，15ºC时建议使用正常推荐用量的2倍。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2. 本产品仅作科研用途。

Ver.CN20241012