DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

产品描述

本品是采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传，适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。使用pUC19质粒检测，转化效率约达10⁸ cfu/μg DNA。

DH5α细胞基因型：F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(r_k^-,m_k⁺) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1phoA

产品组分

运输与保存方法

干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

注意事项

1） 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

2） 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

3） 混入质粒时应轻柔操作。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作

5） 本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻（大约5 min）。

2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置25 min。

注：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 42℃水浴中热激45 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。

注：此过程不要晃动，否则会降低转化效率。

4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。

5. 5000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。如进行蓝白斑筛选操作，请将平板放 37℃培养至少15 h。

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